豬托克特諾病毒PCR檢測試劑盒操作說明

  今日立冬，深秋的江南已漸有寒意，常綠的喬木已在不經意間換上了金色的冬裝，南渡的雁雀急揮著翅膀匆匆南飛，偶爾有落單的鳥兒一邊悲鳴著一邊奮力的前行，仿佛在訴說著同伴們的無情與現實的無奈，甚怕稍稍慢些就會被南下的寒流凍成冰棍，金色的稻田已經被勤勞的農民搶收完畢，看上去空蕩蕩的，只剩下幾顆狼尾草在飄搖，秋風越來越大膽了，開始變得肆無忌憚起來，卷起那一地又一地金黃色的梧桐葉，毫不憐香惜玉的把她拋向天空，再吹落到各個角落直至粉碎化成泥土!接下來介紹豬托克特諾病毒PCR檢測試劑盒操作說明

產品特點:

PCR引物設計的目的是為了找到一對合適的核苷酸片段，使其能有效地擴增模板DNA序列。因此，引物的優(yōu)劣直接關系到PCR的特異性與成功與否。

要設計引物首先要找到DNA序列的保守區(qū)。同時應預測將要擴增的片段單鏈是否形成二級結構。如這個區(qū)域單鏈能形成二級結構，就要避開它。如這一段不能形成二級結構，那就可以在這一區(qū)域設計引物。

現在可以在這一保守區(qū)域里設計一對引物。一般引物長度為15-30堿基，擴增片段長度為100-600堿基對。

讓我們先看看P1引物。一般引物序列中G+C含量一般為40%-60%。而且四種堿基的分布隨機。不要有聚嘌呤或聚嘧啶存在。否則P1引物設計的就不合理。應重新尋找區(qū)域設計引物。

同時引物之間也不能有互補性，一般一對引物間不應多于4個連續(xù)堿基的互補。

引物確定以后，可以對引物進行必要的修飾，例如可以在引物的5′端加酶切位點序列；標記生物素、熒光素、等，這對擴增的特異性影響不大。但3′端不能進行任何修飾，因為引物的延伸是從3′端開始的。這里還需提醒的是3′端不要終止于密碼子的第3位，因為密碼子第3位易發(fā)生簡并，會影響擴增的特異性與效率。

引物的設計原則：

1、引物應用核酸系列保守區(qū)內設計并具有特異性。

2、 產物不能形成二級結構。

3、引物長度一般在15~30堿基之間。

4、G+C含量在40%~60%之間。

5、堿基要隨機分布。

6、引物自身不能有連續(xù)4個堿基的互補。

7、引物之間不能有連續(xù)4個堿基的互補。

8、引物5′端可以修飾。

9、引物3′端不可修飾。

10、引物3′端要避開密碼子的第3位。