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小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-23 08:35:51瀏覽次數(shù):248

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來(lái)源 骨髓
小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:兔破骨細(xì)胞原代細(xì)胞5×105兔皮膚成纖維細(xì)胞原代細(xì)胞5×105兔角質(zhì)形成細(xì)胞原代細(xì)胞5×105兔表皮干細(xì)胞原代細(xì)胞5×105兔前脂肪細(xì)胞原代細(xì)胞5×105

詳細(xì)介紹

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

分離自骨髓;骨髓是機(jī)體的造血組織,位于身體的許多骨骼內(nèi)。成年動(dòng)物的骨髓分兩種:紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細(xì)胞、血小板和各種白細(xì)胞。血小板有止血作用,白細(xì)胞能殺滅與抑制各種病原體,包括細(xì)菌、病毒等;某些淋巴細(xì)胞能制造抗體。因此,骨髓不但是造血器官,它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長(zhǎng)骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中,是一種海綿狀的組織,能產(chǎn)生血細(xì)胞的骨髓略呈紅色,稱為紅骨髓。出生時(shí),紅骨髓充滿全身骨髓腔,隨著年齡增大,脂肪細(xì)胞增多,相當(dāng)部分紅骨髓被黃骨髓取代,后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。骨髓基質(zhì)細(xì)胞是一類具有多向分化潛能的干細(xì)胞,其中部分細(xì)胞有自我復(fù)制、高度增殖和多向分化能力,在特定培養(yǎng)條件下可向骨、軟骨、神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞、心肌、骨胳肌、脂肪細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞等間葉組織細(xì)胞轉(zhuǎn)化。骨髓基質(zhì)細(xì)胞在自然條件下主要分化為成骨細(xì)胞,在不同的培養(yǎng)條件下其分化途徑不同,其在成骨細(xì)胞與成脂細(xì)胞分化之間呈反向變化。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用密度梯度離心法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)CD29、CD44免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  成纖維細(xì)胞樣

傳代特性  可傳3代左右

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來(lái)源

小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

骨髓

1.png

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

MEX3A蛋白抗體 腺嘌呤受體封閉多肽 

鋅指蛋白205抗體 NADH復(fù)合體6封閉多肽 

酪氨蛋白激受體B1抗體 鋅指蛋白323封閉多肽 

鋅指蛋白690抗體 LYPD6B蛋白封閉多肽 

卷曲螺旋蛋白DIX1抗體 FAM134B蛋白封閉多肽 

殺菌/通透性增加蛋白樣3抗體 磷化G氨基丁B型受體2封閉多肽 

磷化促凋亡Bik蛋白抗體 絲氨/蘇氨激p90RSK蛋白封閉多肽 

硒蛋白H抗體 肌肉型6磷果糖激/磷果糖激1封閉多肽 

RNA核外切同源蛋白2抗體 鈉離子/氫離子交換蛋白3封閉多肽 

細(xì)胞表面趨化因子受體4相關(guān)蛋白2抗體 免疫交叉反應(yīng)抗原1封閉多肽 

髓鞘相關(guān)糖蛋白a/b抗體 EVPLL蛋白封閉多肽 

醌氧化還原抗體 G蛋白偶聯(lián)受體γ12封閉多肽 

TIMELESS相互作用蛋白抗體 6號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框15封閉多肽 

軟骨蛋白聚糖抗體 神經(jīng)細(xì)胞凋亡調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)化蛋白1/前蛋白轉(zhuǎn)化枯草溶菌9封閉多肽 

中性酯水解1抗體 磷化原癌基因Yes相關(guān)蛋白1封閉多肽 

泛樣蛋白Sumo2抗體 重做2 N+RBD蛋白 

細(xì)胞色C1抗體 基質(zhì)金屬-7封閉多肽 

膠質(zhì)纖維性蛋白單克隆抗體 1型前膠原氨基末端前肽/I型前膠原氨基末端前肽封閉多肽封閉多肽 
小鼠骨髓基質(zhì)細(xì)胞MEM (不含酚紅,含L-丙氨酰-L-)500mL-

MEM無(wú)糖500mL-

DU 145細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4DU 145細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持DU 145細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含DU 145細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無(wú)需添加任何成分,可直接用于DU 145細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

人羊膜成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基100mL人羊膜成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持人羊膜成纖維細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含人羊膜成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無(wú)需添加任何成分,可直接用于人羊膜成纖維細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

Grace's昆蟲(chóng)細(xì)胞培養(yǎng)基125mL×4-

NCI-H2347細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4NCI-H2347細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持NCI-H2347細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含NCI-H2347細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無(wú)需添加任何成分,可直接用于NCI-H2347細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

JeKo-1細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4JeKo-1細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持JeKo-1細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含JeKo-1細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無(wú)需添加任何成分,可直接用于JeKo-1細(xì)胞的體外培養(yǎng)。
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

 


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