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大鼠腦動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-21 16:06:41瀏覽次數(shù):225

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來(lái)源 腦動(dòng)脈組織
大鼠腦動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:大鼠淋巴管成纖維細(xì)胞原代細(xì)胞5×105大鼠骨髓肥大細(xì)胞原代細(xì)胞5×105大鼠骨髓單核細(xì)胞原代細(xì)胞5×105大鼠脾淋巴細(xì)胞原代細(xì)胞5×105大鼠骨髓巨噬細(xì)胞原代細(xì)胞5×105

詳細(xì)介紹

1.png

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來(lái)源

大鼠腦動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

腦動(dòng)脈組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

分離自腦動(dòng)脈組織;腦動(dòng)脈有成對(duì)的頸內(nèi)動(dòng)脈和椎動(dòng)脈互相銜接成動(dòng)脈循環(huán);靜脈系多不與同名動(dòng)脈拌行,所收集的靜脈血先進(jìn)入靜脈竇再匯入頸內(nèi)靜脈;各級(jí)靜脈都沒(méi)有瓣膜。它包括腦的動(dòng)脈系統(tǒng)和腦的靜脈系統(tǒng)。腦動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見(jiàn)細(xì)胞貼壁伸展,細(xì)胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細(xì)胞匯合,多數(shù)細(xì)胞伸展呈長(zhǎng)梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長(zhǎng),高低起伏;細(xì)胞密度低時(shí),常交織成網(wǎng)狀;密度高時(shí),則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長(zhǎng)較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長(zhǎng)特點(diǎn)。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用胰dan白 - 膠原聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  成纖維細(xì)胞樣

傳代特性  可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

英文名稱: mTOR 重組人神經(jīng)絲蛋白 

英文名稱: BANF1 心臟和神經(jīng)嵴衍生蛋白2封閉多肽 

G蛋白信號(hào)調(diào)節(jié)蛋白2抗體 ATP依賴RNA解旋DDX41封閉多肽 

肌球蛋白磷抗體 磷化KB抑制蛋白激α/IKK α 封閉多肽 

血清反應(yīng)因子輔助蛋白SAP2抗體 重組SARS病毒的衣殼蛋白 

抑癌基因p16抗體 重組小鼠缺氧誘導(dǎo)蛋白HIG1蛋白 

蛋白激C亞型PKCI抗體 四度跨膜蛋白3封閉多肽 

B Raf抗體 缺氧誘導(dǎo)因子脯氨酰4羥化封閉多肽 

嗜乳脂蛋白樣3抗體 58K高爾基蛋白封閉多肽 

基質(zhì)重塑相關(guān)蛋白5抗體 核苷結(jié)合蛋白9封閉多肽 

跨膜TMIGD1蛋白抗體 氧化還原GlyR1/核蛋白60封閉多肽 

交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian 干擾kappa蛋白封閉多肽 

B淋巴細(xì)胞白血病/淋巴瘤11B抗體 白介33封閉多肽 

磷脂重塑基因SERAC1抗體 神經(jīng)細(xì)胞凋亡抑制蛋白封閉多肽 

磷化DNA拓普西異構(gòu)Ⅱ抗體 線粒體核糖體蛋白S9封閉多肽 

磷脂磷LPIN3抗體 SEC13蛋白封閉多肽 

8號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框42抗體 EFHA2蛋白封閉多肽 

鋅指蛋白503抗體 PTRHD1蛋白封閉多肽 
大鼠腦動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞人白細(xì)胞介IL-6英文名稱:(IL-6)重組蛋白10ug

人白細(xì)胞介IL-6英文名稱:(IL-6)重組蛋白50ug

人白細(xì)胞介10英文名稱:(IL-10)重組蛋白5ug

人白細(xì)胞介10英文名稱:(IL-10)重組蛋白10ug

人白細(xì)胞介10英文名稱:(IL-10)重組蛋白50ug

人白細(xì)胞介8英文名稱:(IL-8)重組蛋白5ug

人白細(xì)胞介8英文名稱:(IL-8)重組蛋白10ug


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