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小鼠精原干細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-21 13:22:31瀏覽次數(shù):231

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來源 睪丸組織
小鼠精原干細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:HSF(SV40)人真皮成纖維(原代永生化)細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500MLHT-1080人纖維肉瘤細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基125MLHT-1080人纖維肉瘤細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500MLHT-1376人膀胱癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基125MLHT-1376人膀胱癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500ML

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

小鼠精原干細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

睪丸組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡介:

分離自睪丸組織;精原干細(xì)胞是位于睪丸生精小管的生精上皮內(nèi)的一群生精干細(xì)胞,是成體內(nèi)的定向干細(xì)胞。精原干細(xì)胞的一些優(yōu)勢使其成為動(dòng)物轉(zhuǎn)基因的理想宿主細(xì)胞。精原干細(xì)胞的生理生化特性及其分裂增殖、分化等多項(xiàng)生命活動(dòng)的調(diào)節(jié)機(jī)制的深入研究,精子發(fā)生機(jī)理的進(jìn)一步闡明以及精原干細(xì)胞轉(zhuǎn)染,異體、異種移植技術(shù)的實(shí)際應(yīng)用,都迫切需要找到一種可行的方法將其分離純化,以期得到較高產(chǎn)量和純度的有活力的精原細(xì)胞用于體外培養(yǎng)。在哺乳動(dòng)睪丸內(nèi),精子發(fā)生時(shí)一個(gè)受高度調(diào)控和持續(xù)的過程,精原干細(xì)胞(SSCs)一方面進(jìn)行自我更新維持干細(xì)胞數(shù)量,另一方面又不斷執(zhí)行分化成各級(jí)生精細(xì)胞直至后生成精子。精原干細(xì)胞定居在曲精細(xì)管上皮的基膜處,是哺乳動(dòng)物精子發(fā)生的原始細(xì)胞,也是動(dòng)物體內(nèi)一起能將遺傳信息傳遞的干細(xì)胞。精原干細(xì)胞體外培養(yǎng)體系的建立,在生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、畜牧業(yè)生產(chǎn)及制備轉(zhuǎn)基因動(dòng)物等領(lǐng)域具有廣闊的應(yīng)用前景。精原干細(xì)胞(SSCs)是生精上皮近基底膜的一群細(xì)胞,具有自我更新能力和多向分化潛能,是哺乳動(dòng)物體內(nèi)能將遺傳信息傳遞給下一代的成體干細(xì)胞。

5.方法簡介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用先機(jī)械吹打、后胰dan白消化,結(jié)合密度梯度離心法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)c-kit免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  梭形、圓形

傳代特性  可傳1-2代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大?。?/span>
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

磷化活化復(fù)制因子2抗體 1號(hào)染色體開放閱讀框96封閉多肽 人乙型肝炎病毒表面抗體(HBsAb)ELISA試劑盒

HOXB4抗體 MSI2蛋白封閉多肽 人乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)試劑盒ELISA

英文名稱: Histone H3 (acetyl K14) HDHD3蛋白封閉多肽 人乙型肝炎病毒e抗體(HBeAb)ELISA檢測試劑盒

細(xì)胞分裂周期相關(guān)蛋白1抗體 重組人心型脂肪結(jié)合蛋白/脂肪結(jié)合蛋白3蛋白 人乙酰羧化合成(ACC)ELISA試劑盒

信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子3單克隆抗體 磷化原癌基因蛋白c-kit封閉多肽 人乙酰酯(AChE)抗體(IgG)試劑盒ELISA

銜接蛋白γ/γ-Adaptin抗體 熱休克蛋白-22封閉多肽 人乙醛脫氫18家族成員A1(ALDH18A1)檢測試劑盒elisa

英文名稱: Mono-Methyl-Histone H3 (Lys23) 脊髓灰質(zhì)炎病毒受體封閉多肽 人乙基丙二ELISA試劑盒

交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian SKAP55蛋白封閉多肽 人乙肝表面抗原大蛋白(HBV-LP)試劑盒ELISA

FA20A抗體 酪蛋白硫轉(zhuǎn)移2封閉多肽 人胰脂肪(PL)ELISA檢測試劑盒

氨基末端激1/3抗體 環(huán)指蛋白138封閉多肽 人胰腺癌標(biāo)志物CA242 ELISA試劑盒

蛋白磷2調(diào)節(jié)亞基5E抗體 結(jié)合珠蛋白相關(guān)蛋白封閉多肽 人胰高血糖樣肽2受體(GLP2R)試劑盒ELISA

磷化胰島受體β(Tyr1361)抗體 Lix1樣蛋白封閉多肽 人胰高血糖樣肽2(GLP2)檢測試劑盒elisa

CD4抗體 信號(hào)調(diào)節(jié)蛋白β1/SIRP-?1封閉多肽 人胰高血糖樣肽1受體(GLP1R)ELISA試劑盒

磷化Bcl-2抗體 CD28封閉多肽 人胰島細(xì)胞抗原2抗體/蛋白酪氨磷抗體(IA-2A)試劑盒ELISA

活化半胱胺蛋白-3抗體 RUNX1 / AML1 + RUNX3 + RUNX2封閉多肽 人胰島樣因子3(INSL3)ELISA檢測試劑盒

上皮鈣粘附分子抗體 WAC蛋白封閉多肽 人胰島樣生長因子結(jié)合蛋白7(IGFBP7/MAC25/PSF)ELISA試劑盒

波形蛋白抗體 酪氨蛋白激A5受體封閉多肽 人胰島樣生長因子結(jié)合蛋白5(IGFBP-5)試劑盒ELISA

過氧化物-2抗體 ATPIF1蛋白封閉多肽 人胰島樣生長因子2受體(IGF-2R)檢測試劑盒elisa
小鼠精原干細(xì)胞SK-N-BE(2)人神經(jīng)母瘤細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:SK-N-BE(2)細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

SK-N-MC人神經(jīng)上皮瘤細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:SK-N-MC細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

SK-N-MC人神經(jīng)上皮瘤細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:SK-N-MC細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

SK-NEP-1人腎母瘤細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:SK-NEP-1細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

SK-NEP-1人腎母瘤細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:SK-NEP-1細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

SK-NO-1人急性髓系白血病細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:SK-NO-1細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

SK-NO-1人急性髓系白血病細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:SK-NO-1細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

 


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