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大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來(lái)源 骨髓
大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:BAF3小鼠原B株細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500MLBALB/3T3 clone A31小鼠胚胎成纖維細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基125MLBALB/3T3 clone A31小鼠胚胎成纖維細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500MLbEnd.3小鼠腦微血管內(nèi)皮株細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基125MLbEnd.3小鼠腦微血管內(nèi)皮株細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500ML

詳細(xì)介紹

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產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱(chēng)

規(guī)格

組織來(lái)源

大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

骨髓

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

分離自骨髓;骨髓是機(jī)體的造血組織,位于身體的許多骨骼內(nèi)。成年動(dòng)物的骨髓分兩種:紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細(xì)胞、血小板和各種白細(xì)胞。血小板有止血作用,白細(xì)胞能殺滅與抑制各種病原體,包括細(xì)菌、病毒等;某些淋巴細(xì)胞能制造抗體。因此,骨髓不但是造血器官,它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長(zhǎng)骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中,是一種海綿狀的組織,能產(chǎn)生血細(xì)胞的骨髓略呈紅色,稱(chēng)為紅骨髓。出生時(shí),紅骨髓充滿(mǎn)全身骨髓腔,隨著年齡增大,脂肪細(xì)胞增多,相當(dāng)部分紅骨髓被黃骨髓取代,后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。骨髓基質(zhì)系統(tǒng)內(nèi)存在的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞是一種除造血干細(xì)胞以外的、具有高度自我更新能力和多向分化潛能的干細(xì)胞,可以向骨、軟骨、肌組織、皮膚、脂肪、神經(jīng)等多種組織分化,因此可以作為組織工程中的種子細(xì)胞。在骨髓中,BMSC占骨髓有核細(xì)胞總數(shù)的0.001%-0.1%,含量極低。骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的體外培養(yǎng)條件要求較高,在培養(yǎng)過(guò)程中,受貼壁時(shí)間、種植密度、血清含量、培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)基pH值等條件的影響。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用沖洗骨髓、密度梯度離心、差速貼壁法結(jié)合培養(yǎng)基篩選制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)CD90免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  成纖維細(xì)胞樣

傳代特性  可傳5代左右;3代以?xún)?nèi)狀態(tài)佳

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀(guān)察圖像并拍照。

絨毛膜特異性轉(zhuǎn)錄因子GCMa抗體 1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框173封閉多肽 人抗IgA抗體(anti-IgA-Ab) ELISA試劑盒

ATP結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)因子2抗體 原癌基因蛋白c-kit封閉多肽 人抗神經(jīng)元核抗體1型/抗Hu抗體(ANNA-1/Hu) 試劑盒 ELISA

跨膜通道蛋白8抗體 衰變加速因子CD55封閉多肽 人抗DNAB抗體(anti-DNase B) ELISA檢測(cè)試劑盒

交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian DYDC2蛋白封閉多肽 人抗BP180抗體(BP180-Ab) ELISA Kit

G蛋白偶聯(lián)受體109A抗體 細(xì)胞色P450 27B1封閉多肽 人抗BB抗體(BB-Ab) ELISA試劑盒

E3泛蛋白連接HACE1單克隆抗體 腦糖原磷化封閉多肽 人抗平滑肌抗體(ASMA)試劑盒 ELISA

鈣結(jié)合蛋白39單克隆抗體 Ras樣蛋白A封閉多肽 人抗肝細(xì)胞膜抗體(LMA)ELISA檢測(cè)試劑盒

β淀粉樣蛋白前體蛋白結(jié)合蛋白2抗體 舞蹈癥相關(guān)蛋白40/8相關(guān)蛋白/第八因子相關(guān)蛋白封閉多肽 人抗肝特異性脂蛋白抗體(LSP)ELISA Kit

鋅指蛋白142抗體 磷化粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子受體β封閉多肽 人抗眼肌抗體(EMAb)ELISA試劑盒

白介13抗體 胰島誘導(dǎo)基因2封閉多肽 人抗補(bǔ)體1q抗體(C1q) 試劑盒 ELISA

胞質(zhì)緊密粘連蛋白1/閉鎖小帶蛋白1抗體 半胱氨酰白三烯受體2型封閉多肽 人抗內(nèi)因子抗體(IFA)ELISA檢測(cè)試劑盒

磷化HER4抗體 神經(jīng)激肽A受體/K物質(zhì)受體封閉多肽 人抗磷脂抗體(Apl/APA)ELISA Kit

β葡萄糖苷3抗體 環(huán)指蛋白146封閉多肽 人抗組蛋白抗體(AHA)ELISA試劑盒

整合αVβ1抗體 補(bǔ)體因子I輕鏈封閉多肽 人晶體蛋白α(Cryα)試劑盒 ELISA

補(bǔ)體C3cα 鏈片段1抗體 Rad51封閉多肽 人晶體蛋白β(Cryβ) ELISA檢測(cè)試劑盒

IGF2基因的互補(bǔ)基因1蛋白抗體 MAL蛋白封閉多肽 人抗膠原蛋白抗體(CLA)ELISA Kit

囊泡相關(guān)膜蛋白相關(guān)蛋白A抗體 肌微管相關(guān)蛋白10封閉多肽 人抗角蛋白絲聚集/絲集蛋白抗體(AFA)ELISA試劑盒

人巨細(xì)胞病毒UL49蛋白抗體 多瘤病毒增強(qiáng)了結(jié)合蛋白2β封閉多肽 人抗環(huán)胍氨肽抗體(CCP)試劑盒 ELISA
大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞人乳腺癌相關(guān)成纖維細(xì)胞英文名稱(chēng):人乳腺癌相關(guān)成纖維細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

人睪丸血管內(nèi)皮細(xì)胞英文名稱(chēng):人睪丸血管內(nèi)皮細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

人卵巢微血管內(nèi)皮細(xì)胞英文名稱(chēng):人卵巢微血管內(nèi)皮細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

人子宮內(nèi)膜成纖維細(xì)胞英文名稱(chēng):人子宮內(nèi)膜成纖維細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

人蛻膜成纖維細(xì)胞英文名稱(chēng):人蛻膜成纖維細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

人卵巢成纖維細(xì)胞英文名稱(chēng):人卵巢成纖維細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

人陰道成纖維細(xì)胞英文名稱(chēng):人陰道成纖維細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告


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