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大鼠直腸平滑肌細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-21 13:21:31瀏覽次數(shù):319

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來源 直腸組織
大鼠直腸平滑肌細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:HPAF-II人胰腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500MLHs 815.Pl人胎盤(有限系)細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基125MLHs 815.Pl人胎盤(有限系)細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500MLHS578T人乳腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基125MLHS578T人乳腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500ML

詳細(xì)介紹

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產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

大鼠直腸平滑肌細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

直腸組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡介:

分離自直腸組織;直腸為大腸的未段,位于小骨盆內(nèi)。上端平第3骶椎處接續(xù)乙狀結(jié)腸,沿骶骨和尾骨的前面下行,穿過盆膈,下端以gang門而終。直腸上端的大小似結(jié)腸,其下端擴(kuò)大成直腸壺腹,是糞便排出前的暫存部位,下端變細(xì)接gang管。直腸在盆腔內(nèi)的位置與骶椎腹面關(guān)系密切,與骶椎有相同的曲度。直腸周圍多脂肪、無縱帶,位于膀胱和生殖器官的背側(cè)。直腸平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見細(xì)胞貼壁伸展,細(xì)胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細(xì)胞匯合,多數(shù)細(xì)胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,高低起伏;細(xì)胞密度低時(shí),常交織成網(wǎng)狀;密度高時(shí),則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點(diǎn)。直腸的動(dòng)脈血供主要是來自腸系膜下動(dòng)脈的直腸上動(dòng)脈,來自髂內(nèi)動(dòng)脈的直腸中動(dòng)脈和來自髂內(nèi)動(dòng)脈的直腸下動(dòng)脈。平滑肌收縮是胃腸蠕動(dòng)中基本的運(yùn)動(dòng)方式;腸炎時(shí)由于平滑肌特殊肌動(dòng)蛋白的增加導(dǎo)致了平滑肌層的增厚。平滑肌肌動(dòng)蛋白可能影響收縮力的產(chǎn)生,這進(jìn)一步證明了炎癥時(shí)的腸平滑肌細(xì)胞具有可塑性。利用腸平滑肌細(xì)胞的培養(yǎng),可以幫助了解收縮、增殖和胃腸道結(jié)締組織對平滑肌細(xì)胞的反應(yīng)。

5.方法簡介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用胰dan白 - 膠原聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  成纖維細(xì)胞樣

傳代特性  可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

組蛋白賴氨N-甲基EZH1抗體 白細(xì)胞介31封閉多肽 人遠(yuǎn)端上游元件結(jié)合蛋白1(FUBP1)ELISA試劑盒

果糖二磷1抗體 鋅指轉(zhuǎn)錄因子Slug封閉多肽 人原纖維蛋白-1(FBN1)試劑盒ELISA

SH2結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)化蛋白1抗體 非霍奇金淋巴瘤重復(fù)蛋白3封閉多肽 人有絲分裂原活化蛋白激14(MAPK14)ELISA檢測試劑盒

亮氨羧基甲基轉(zhuǎn)移1抗體 巨噬細(xì)胞調(diào)控相關(guān)蛋白LRRFIP1封閉多肽 人游離肉堿ELISA試劑盒

磷化整合β2(CD18)抗體 核糖體蛋白S6激樣1封閉多肽 人游離雌三醇(FE3)試劑盒ELISA

轉(zhuǎn)化生長因子β1抗體 肽基脯氨異構(gòu)FKBP8封閉多肽 人幽門螺旋菌抗體(IgA)檢測試劑盒elisa

髓樣細(xì)胞白血病-1抗體 絲氨羧肽1封閉多肽 人硬骨(SOST)ELISA試劑盒

晚期糖基化終末產(chǎn)物抗體 磷化抑癌基因p16封閉多肽 人印度刺猬因子(IHH) 試劑盒ELISA

G蛋白偶聯(lián)受體147抗體 20號染色體開放閱讀框173封閉多肽 人隱熱蛋白(NLRP3/C1orf7/CIAS1/NALP3/PYPAF1)ELISA檢測試劑盒

蛋白酪氨激7抗體 重組2 Spike突變蛋白RBD(XBB.1/Omicron) 人吲哚胺(INDO)自身抗體ELISA試劑盒

組蛋白去乙?;?/span>1抗體 大腦蛋白1封閉多肽 人音猬因子N端(Shh-N)試劑盒ELISA

碳水化合物磺基轉(zhuǎn)移8抗體 電壓門控鈉通道SCN3α蛋白/Na+ CP type IIIα封閉多肽  人音猬因子(SHH)檢測試劑盒elisa

Toll樣受體4(CD284)抗體 心磷脂?;D(zhuǎn)移1封閉多肽 人抑制βA(INHBA)ELISA試劑盒

酪氨激C-SRC抗體 G蛋白偶聯(lián)受體21封閉多肽 人異質(zhì)性胞核核糖核蛋白R(hnRNP R)試劑盒ELISA

血小板糖蛋白GPIb(CD42b)抗體 環(huán)指蛋白125封閉多肽 人異質(zhì)性胞核核糖核蛋白P2(hnRNP P2)ELISA檢測試劑盒

延伸因子EF-1 γ抗體 GCNT1葡萄糖轉(zhuǎn)移封閉多肽 人異質(zhì)性胞核核糖核蛋白M(hnRNP M)ELISA試劑盒

Bruton酪氨激抑制劑蛋白抗體 10封閉多肽 人異質(zhì)性胞核核糖核蛋白L(HNRPL)抗體試劑盒ELISA

成骨相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子抗體 胰島受體底物-1封閉多肽 人異質(zhì)性胞核核糖核蛋白L(hnRNP L)檢測試劑盒elisa
大鼠直腸平滑肌細(xì)胞SK-HEP-1人肝腹水腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:SK-HEP-1細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

SK-LU-1人低分化肺腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:SK-LU-1細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

SK-LU-1人低分化肺腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:SK-LU-1細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

SK-MEL-1人皮膚黑色瘤細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:SK-MEL-1細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

SK-MEL-1人皮膚黑色瘤細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:SK-MEL-1細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

SK-MEL-2人皮膚黑色瘤細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:SK-MEL-2細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

SK-MEL-2人皮膚黑色瘤細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:SK-MEL-2細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML


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