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人大隱靜脈平滑肌細胞

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更新時間:2023-04-21 16:05:56瀏覽次數(shù):237

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 大隱靜脈組織
人大隱靜脈平滑肌細胞的相關產(chǎn)品:大鼠股骨頭微血管內皮細胞原代細胞5×105大鼠B淋巴細胞原代細胞1×106大鼠T淋巴細胞原代細胞1×106大鼠單核細胞原代細胞1×106大鼠DC細胞原代細胞1×106

詳細介紹

1.png

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

人大隱靜脈平滑肌細胞

5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

大隱靜脈組織

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自大隱靜脈;大隱靜脈起于足背靜脈弓內側端,經(jīng)內踝前方,沿小腿內側緣伴隱神經(jīng)上行,經(jīng)股骨內側髁后方,進入大腿內側部,與股內側皮神經(jīng)伴行,逐漸向前上,在恥骨結節(jié)外下方穿隱靜脈裂孔,匯入股靜脈,其匯入點稱為隱股點。有5條屬支:旋髂淺靜脈、腹壁淺靜脈、外靜脈、股內側淺靜脈和股外側淺靜脈,它們匯入大隱靜脈的形式多樣,相互間吻合豐富。大隱靜脈曲張行高位結扎時,須分別結扎、切斷各屬支,以防復發(fā)。大隱靜脈平滑肌細胞主要功能:①血管平滑肌細胞的生長潛力是原發(fā)血管病發(fā)的重要異常因素;②參與血管壁的炎癥反應,并與血管疾病的進展和穩(wěn)定有關。因此,研究大隱靜脈平滑肌細胞的代謝和信號通路是研究大隱靜脈擴張等疾病的良好實驗材料。大隱靜脈平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見細胞貼壁伸展,細胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細胞匯合,多數(shù)細胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,高低起伏;細胞密度低時,常交織成網(wǎng)狀;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學特征和生長特點。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用胰dan白 - 膠原聯(lián)合消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態(tài)  成纖維細胞樣

傳代特性  可傳5代左右;3代以內狀態(tài)佳

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

胸苷激2抗體 AFAP1L2封閉多肽 

線粒體型共濟失調蛋白抗體 Ras樣蛋白A+B封閉多肽 

交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian GATA結合蛋白4封閉多肽 

膜相關環(huán)指蛋白8抗體 環(huán)氧化物水解1封閉多肽 

絨毛膜癌不表達蛋白1抗體 溶質載體轉運蛋白家族37成員A3封閉多肽 

轉錄調節(jié)因子MAZR抗體 B7-H4封閉多肽 

KB抑制蛋白激α/β抗體 生長因子受體結合蛋白14封閉多肽 

鏈親和抗體 EFCAB5蛋白封閉多肽 

肝細胞生長因子受體抗體 G氨基丁A型受體rho2 /GABAA Rρ2封閉多肽 

磷化微管相關蛋白抗體 絲氨甲基化mSHMT封閉多肽 

鈉離子通道β1抗體 造血細胞信號轉導蛋白封閉多肽 

絲裂原活化蛋白激1/2單克隆抗體 LENG8蛋白封閉多肽 

硒蛋白V抗體 干擾誘導蛋白AIM2封閉多肽 

PROSC蛋白抗體 CD33封閉多肽 

胰腺彈性2B抗體 錨蛋白重復序列與SOCS盒蛋白13封閉多肽 

SNX29蛋白抗體 鈣調蛋白激激β封閉多肽 

內皮細胞活化蛋白受體(CD201)抗體 單羧轉運蛋白5封閉多肽 

緊密連接蛋白22抗體 重組人葡萄糖轉運蛋白1 
人大隱靜脈平滑肌細胞人轉化生長因子B2 英文名稱:(TGFB2)重組蛋白50ug

人腫瘤壞死因子alpha 英文名稱:(TNF-α)重組蛋白10ug

人腫瘤壞死因子alpha 英文名稱:(TNF-α)重組蛋白50ug

人骨形態(tài)發(fā)生蛋白受體I型beta英文名稱:(BMPR1B)重組蛋白5ug

人骨形態(tài)發(fā)生蛋白受體I型beta英文名稱:(BMPR1B)重組蛋白10ug

人骨形態(tài)發(fā)生蛋白受體I型beta英文名稱:(BMPR1B)重組蛋白50ug

人干擾γ(IFNγ)英文名稱:重組蛋白 IFNγ10ug


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