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商品詳細介紹:
4.細胞簡介:
分離自心臟組織;心臟是脊椎動物身體中重要的一個器官,主要功能是為血液流動提供壓力,把血液運行至身體各個部分。心臟由心肌構(gòu)成,左心房、左心室、右心房、右心室四個腔組成。左右心房之間和左右心室之間均由間隔隔開,故互不相通,心房與心室之間有瓣膜(房室瓣),這些瓣膜使血液只能由心房流入心室,而不能倒流。心臟的作用是推動血液流動,向器官、組織提供充足的血流量,以供應氧和各種營養(yǎng)物質(zhì),并帶走代謝的終產(chǎn)物(如二氧化碳、無機鹽、尿素和尿suan等),使細胞維持正常的代謝和功能。心肌細胞呈菱形、多邊形等不規(guī)則形狀;細胞培養(yǎng)2h后開始貼壁,呈梭形;到12h左右,細胞開始伸出偽足,呈菱形、多角形;細胞分離培養(yǎng)48h以后,大部分伸出偽足、呈巴掌狀,部分心肌細胞會出現(xiàn)搏動;心肌細胞為終末分化細胞,在體外不增殖。體外培養(yǎng)的心肌細胞可保持結(jié)構(gòu)及功能上的某些特點,并具有自發(fā)性節(jié)律搏動,且心肌細胞的培養(yǎng)具有簡便、定量、重復性好以及不受神經(jīng)體液因素的影響等特點。利用培養(yǎng)的心肌細胞在探索非血液動力學因素所致的心肌肥厚的調(diào)節(jié),研究心肌細胞的生物力學、凋亡、受體下調(diào)、缺血預處理、信號通路、對作用于心臟的新藥進行篩選并對其安全性進行評價以及從培養(yǎng)的心肌細胞中提取有價值的生物因子等方面具有廣闊的應用前景,對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。
5.方法簡介:
實驗室分離的采用膠原-胰聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法,并用化學試劑抑制法篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
6.質(zhì)量檢測:
實驗室分離的經(jīng)α-Sarcometric actin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
7.培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 屬于終末分化細胞;屬于不增殖細胞群
消化液 0.25%胰dan白
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 組織來源 |
人心肌細胞 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 心臟組織 |
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng): | 二、免疫熒光鑒定: |
| 1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min; |
硬纖毛蛋白STRC抗體 抑制因子DKK4封閉多肽
英文名稱: Podoplanin CD151封閉多肽
RNA聚合I抗體 整合α7封閉多肽
骨形態(tài)發(fā)生蛋白2受體抗體 異染色質(zhì)蛋白1結(jié)合蛋白3封閉多肽
真核翻譯起始因子2C1抗體 血管緊張III封閉多肽
組蛋白結(jié)合蛋白SLBP抗體 受體活性修飾蛋白2封閉多肽
磷化自噬微管相關蛋白輕鏈3抗體 鋅指蛋白84封閉多肽
肺表面活性蛋白A抗體 RNA結(jié)合蛋白RBP封閉多肽
氮調(diào)節(jié)因子3樣蛋白抗體 胰島樣生長因子1受體相互作用蛋白1封閉多肽
英文名稱: phospho-NFKB p65 (Ser529) 組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移MORF封閉多肽
死亡因子4樣蛋白2抗體 MEK1/MAPKK1封閉多肽(N-端)
減數(shù)分裂缺陷蛋白1抗體 MITF相關轉(zhuǎn)錄因子封閉多肽
天冬氨酰tRNA連接2抗體 黑色瘤相關抗原3封閉多肽
細胞纖毛內(nèi)轉(zhuǎn)運同源蛋白140抗體 ZCCHV蛋白封閉多肽
核心結(jié)合因子α1重組兔單克隆抗體 蛋白質(zhì)單ADP核糖基轉(zhuǎn)移PARP3封閉多肽
英文名稱: RAB7A N-乙酰轉(zhuǎn)移8封閉多肽
α1性糖蛋白1/類粘蛋白1抗體 核斑點剪接調(diào)控蛋白1封閉多肽
DOCK10蛋白抗體 維甲受體G封閉多肽
人心肌細胞MDA-MB-468 (人乳腺癌細胞) (DMEM) (STR鑒定正確)DMEM+10% FBS+1% P/S1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
NALM-6 (人B淋巴白血病細胞) (STR鑒定正確)RPMI-1640+10% FBS+1% P/S1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
兔羊膜上皮細胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
人腦成纖維細胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
A172 (人膠質(zhì)母細胞瘤細胞) (STR鑒定正確)DMEM+10% FBS+1% P/S1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
大鼠脾臟單核細胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
小鼠外周血白細胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。