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人心肌細胞

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更新時間:2023-04-23 10:49:53瀏覽次數(shù):245

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 心臟組織
人心肌細胞的相關產(chǎn)品:大鼠腦微血管內(nèi)皮細胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶人直腸黏膜上皮細胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶RPMI 8226 (人多發(fā)性骨髓瘤外周血B淋巴細胞) (STR鑒定正確)1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶人子宮頸上皮細胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶小鼠腸系膜上動脈內(nèi)皮細胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

詳細介紹

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自心臟組織;心臟是脊椎動物身體中重要的一個器官,主要功能是為血液流動提供壓力,把血液運行至身體各個部分。心臟由心肌構(gòu)成,左心房、左心室、右心房、右心室四個腔組成。左右心房之間和左右心室之間均由間隔隔開,故互不相通,心房與心室之間有瓣膜(房室瓣),這些瓣膜使血液只能由心房流入心室,而不能倒流。心臟的作用是推動血液流動,向器官、組織提供充足的血流量,以供應氧和各種營養(yǎng)物質(zhì),并帶走代謝的終產(chǎn)物(如二氧化碳、無機鹽、尿素和尿suan等),使細胞維持正常的代謝和功能。心肌細胞呈菱形、多邊形等不規(guī)則形狀;細胞培養(yǎng)2h后開始貼壁,呈梭形;到12h左右,細胞開始伸出偽足,呈菱形、多角形;細胞分離培養(yǎng)48h以后,大部分伸出偽足、呈巴掌狀,部分心肌細胞會出現(xiàn)搏動;心肌細胞為終末分化細胞,在體外不增殖。體外培養(yǎng)的心肌細胞可保持結(jié)構(gòu)及功能上的某些特點,并具有自發(fā)性節(jié)律搏動,且心肌細胞的培養(yǎng)具有簡便、定量、重復性好以及不受神經(jīng)體液因素的影響等特點。利用培養(yǎng)的心肌細胞在探索非血液動力學因素所致的心肌肥厚的調(diào)節(jié),研究心肌細胞的生物力學、凋亡、受體下調(diào)、缺血預處理、信號通路、對作用于心臟的新藥進行篩選并對其安全性進行評價以及從培養(yǎng)的心肌細胞中提取有價值的生物因子等方面具有廣闊的應用前景,對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用膠原-胰聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法,并用化學試劑抑制法篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實驗室分離的經(jīng)α-Sarcometric actin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態(tài)  梭形、多角形

傳代特性  屬于終末分化細胞;屬于不增殖細胞群

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

人心肌細胞

5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

心臟組織

1.png

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

硬纖毛蛋白STRC抗體 抑制因子DKK4封閉多肽 

英文名稱: Podoplanin CD151封閉多肽 

RNA聚合I抗體 整合α7封閉多肽 

骨形態(tài)發(fā)生蛋白2受體抗體 異染色質(zhì)蛋白1結(jié)合蛋白3封閉多肽 

真核翻譯起始因子2C1抗體 血管緊張III封閉多肽 

組蛋白結(jié)合蛋白SLBP抗體 受體活性修飾蛋白2封閉多肽 

磷化自噬微管相關蛋白輕鏈3抗體 鋅指蛋白84封閉多肽 

肺表面活性蛋白A抗體 RNA結(jié)合蛋白RBP封閉多肽 

氮調(diào)節(jié)因子3樣蛋白抗體 胰島樣生長因子1受體相互作用蛋白1封閉多肽 

英文名稱: phospho-NFKB p65 (Ser529) 組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移MORF封閉多肽 

死亡因子4樣蛋白2抗體 MEK1/MAPKK1封閉多肽(N-端) 

減數(shù)分裂缺陷蛋白1抗體 MITF相關轉(zhuǎn)錄因子封閉多肽 

天冬氨酰tRNA連接2抗體 黑色瘤相關抗原3封閉多肽 

細胞纖毛內(nèi)轉(zhuǎn)運同源蛋白140抗體 ZCCHV蛋白封閉多肽 

核心結(jié)合因子α1重組兔單克隆抗體 蛋白質(zhì)單ADP核糖基轉(zhuǎn)移PARP3封閉多肽 

英文名稱: RAB7A N-乙酰轉(zhuǎn)移8封閉多肽 

α1性糖蛋白1/類粘蛋白1抗體 核斑點剪接調(diào)控蛋白1封閉多肽 

DOCK10蛋白抗體 維甲受體G封閉多肽 
人心肌細胞MDA-MB-468 (人乳腺癌細胞) (DMEM) (STR鑒定正確)DMEM+10% FBS+1% P/S1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

NALM-6 (人B淋巴白血病細胞) (STR鑒定正確)RPMI-1640+10% FBS+1% P/S1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

兔羊膜上皮細胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

人腦成纖維細胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

A172 (人膠質(zhì)母細胞瘤細胞) (STR鑒定正確)DMEM+10% FBS+1% P/S1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

大鼠脾臟單核細胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

小鼠外周血白細胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

 


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