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小鼠主動脈平滑肌細胞

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更新時間:2023-04-23 09:02:02瀏覽次數(shù):261

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 主動脈組織
小鼠主動脈平滑肌細胞的相關(guān)產(chǎn)品:原代肥大細胞添加劑細胞培養(yǎng)基5mL(100X)原代樹突狀(DC)細胞添加劑細胞培養(yǎng)基5mL(100X)原代破骨細胞添加劑細胞培養(yǎng)基5mL(100X)原代NK細胞添加劑細胞培養(yǎng)基5mL(100X)原代精原細胞添加劑細胞培養(yǎng)基5mL(100X)

詳細介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

小鼠主動脈平滑肌細胞

5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

主動脈組織

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自主動脈組織;主動脈是體循環(huán)的動脈主干。其運行路徑為:升主動脈起于左心室,至右側(cè)第2胸肋關(guān)節(jié)高度移行為主動脈弓,弓行向左后至第4胸椎體下緣移行為降主動脈;在第12胸椎體高度穿膈的主動脈裂孔移行為腹主動脈,以上為胸主動脈,至第4腰椎體下緣分為左、右髂總動脈;髂總動脈在骶髂關(guān)節(jié)高度分為髂內(nèi)、外動脈。主動脈平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見細胞貼壁伸展,細胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細胞匯合,多數(shù)細胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,高低起伏;細胞密度低時,常交織成網(wǎng)狀;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點。主動脈平滑肌細胞在心血管疾病發(fā)生、發(fā)展中具有重要作用,以主動脈平滑肌細胞為實驗研究對象,探討心血管疾病相關(guān)發(fā)病機制是目前研究的熱點;體外培養(yǎng)的主動脈平滑肌細胞對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用胰dan白 - 膠原聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實驗室分離的經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態(tài)  成纖維細胞樣

傳代特性  可傳3代左右

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

磷化µ-型受體抗體 G蛋白偶聯(lián)受體58封閉多肽 

磷化白細胞介13受體α1抗體 G蛋白偶聯(lián)受體GPR62蛋白封閉多肽 

1號染色體開放閱讀框19抗體 淋巴管內(nèi)皮透明質(zhì)受體封閉多肽 

MSTO1蛋白抗體 磷化細胞分裂周期蛋白25B封閉多肽 

谷氧還蛋白3抗體 8/第八/第八因子相關(guān)抗原輕鏈封閉多肽 

四分子交聯(lián)體13抗體(四旋蛋白) 脂肪合成封閉多肽 

交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian NDUFA9蛋白封閉多肽 

AICAR甲?;D(zhuǎn)移抗體 S100鈣結(jié)合蛋白A12封閉多肽 

AF750標記小鼠抗人CD22單克隆抗體 重組結(jié)核桿菌Ag85B/fbpB蛋白 

鋅指蛋白14抗體 脂肪營養(yǎng)PNPLA3封閉多肽 

胰島受體底物p53蛋白單克隆抗體 細胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SMAD3封閉多肽 

BEND3蛋白抗體 重組人Ki67蛋白 

軟骨蛋白聚糖抗體 鈣結(jié)合蛋白5/3封閉多肽 

TMTC1蛋白抗體 CD36封閉多肽 

ALKB蛋白抗體 LIN37蛋白封閉多肽 

磷化微管相關(guān)蛋白抗體 核受體0相關(guān)蛋白B家族2封閉多肽 

早期B淋巴細胞因子1抗體 白介8封閉多肽 

溶質(zhì)載體家族蛋白12成員A4抗體 鋅指蛋白444封閉多肽 
小鼠主動脈平滑肌細胞GH3細胞專用培養(yǎng)基125mL×4GH3細胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持GH3細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含GH3細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于GH3細胞的體外培養(yǎng)。

人髓母細胞瘤組織源細胞培養(yǎng)基100mL人髓母細胞瘤組織源細胞培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持人髓母細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含人髓母細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于人髓母細胞的體外培養(yǎng)。

人外周血樹突狀細胞(成熟DC細胞)培養(yǎng)基100mL人外周血樹突狀細胞(成熟DC細胞)培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持人外周血樹突狀細胞(成熟DC細胞)佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含人外周血樹突狀細胞(成熟DC細胞)生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于人外周血樹突狀細胞(成熟DC細胞)的體外培養(yǎng)。

小鼠肝內(nèi)膽管上皮細胞培養(yǎng)基100mL小鼠肝內(nèi)膽管上皮細胞培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持小鼠肝內(nèi)膽管上皮細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含小鼠肝內(nèi)膽管上皮細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于小鼠肝內(nèi)膽管上皮細胞的體外培養(yǎng)。

McCoy's 5A(含HEPES、雙抗)500mL-

HCT-15細胞專用培養(yǎng)基125mL×4HCT-15細胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持HCT-15細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含HCT-15細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于HCT-15細胞的體外培養(yǎng)。

MuM-2B細胞專用培養(yǎng)基125mL×4MuM-2B細胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持MuM-2B細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含MuM-2B細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于MuM-2B細胞的體外培養(yǎng)。

 


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