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大鼠淋巴結(jié)淋巴細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-21 16:04:51瀏覽次數(shù):270

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來(lái)源 淋巴結(jié)
大鼠淋巴結(jié)淋巴細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:大鼠椎體終板軟骨細(xì)胞原代細(xì)胞5×105大鼠骨骼肌微血管內(nèi)皮細(xì)胞原代細(xì)胞5×105大鼠耳軟骨細(xì)胞原代細(xì)胞5×105大鼠骨膜干細(xì)胞原代細(xì)胞5×105大鼠中耳上皮細(xì)胞原代細(xì)胞5×105

詳細(xì)介紹

1.png

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來(lái)源

大鼠淋巴結(jié)淋巴細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

淋巴結(jié)

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

分離自淋巴結(jié);淋巴結(jié)是哺乳類*的周圍淋巴器官,由淋巴細(xì)胞集合而成。呈豆形,位于淋巴管行進(jìn)途中,是產(chǎn)生免疫應(yīng)答的重要器官之一。淋巴結(jié)表面包有被膜,被膜的結(jié)締組織伸入淋巴結(jié)內(nèi)形成小梁,構(gòu)成淋巴結(jié)的支架。被膜下為皮質(zhì)區(qū),淋巴結(jié)的中心及門(mén)部為髓質(zhì)區(qū)。皮質(zhì)區(qū)有淋巴小結(jié)、彌散淋巴組織和皮質(zhì)淋巴竇(簡(jiǎn)稱皮竇),髓質(zhì)包括由致密淋巴組織構(gòu)成的髓索和髓質(zhì)淋巴竇(簡(jiǎn)稱髓竇)。淋巴竇的竇腔內(nèi)有許多淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞,從輸入淋巴管流來(lái)的淋巴液先進(jìn)入皮竇再流向髓竇,后經(jīng)輸出淋巴管離開(kāi)淋巴結(jié)。淋巴結(jié)的主要功能是濾過(guò)淋巴液,產(chǎn)生淋巴細(xì)胞和漿細(xì)胞,參與機(jī)體的免疫反應(yīng)。淋巴結(jié)腫大或疼痛常表示其屬區(qū)范圍內(nèi)的器官有炎癥或其他病變。主要功能是濾過(guò)淋巴液,產(chǎn)生淋巴細(xì)胞和漿細(xì)胞,參與機(jī)體的免疫反應(yīng);當(dāng)局部感染時(shí),細(xì)菌、病毒或癌細(xì)胞等可沿淋巴管侵入,引起局部淋巴結(jié)腫大。如該淋巴結(jié)不能阻止和消滅它們,則病變可沿淋巴管的流注方向擴(kuò)散和轉(zhuǎn)移。淋巴結(jié)淋巴細(xì)胞是白細(xì)胞的一種,由次級(jí)淋巴器官淋巴結(jié)產(chǎn)生,是機(jī)體免疫應(yīng)答功能的重要細(xì)胞成分;細(xì)胞為圓形細(xì)胞核,細(xì)胞質(zhì)少。成熟淋巴細(xì)胞需依賴抗原刺激而分化增殖,繼而發(fā)揮其免疫功能。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用分離淋巴結(jié)組織、研磨獲取單細(xì)胞懸液后通過(guò)密度梯度離心法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為1×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)過(guò)檢測(cè),且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性  懸浮

細(xì)胞形態(tài)  圓形

傳代特性  不增殖;不傳代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

顆粒B抗體 巰基氧化2封閉多肽 

磷化原癌基因c-Met抗體 去泛A封閉多肽 

磷化原癌基因c-Met相關(guān)酪氨激抗體 X連鎖先天性視網(wǎng)膜劈裂XLRS1蛋白封閉多肽 

磷化D酪氨激衰減蛋白2抗體 肌側(cè)索硬化癥相關(guān)蛋白HECW1封閉多肽 

鋅指蛋白192抗體 辛諾柏病毒糖VP8封閉多肽 

NDUFB7蛋白抗體 蛋白C抑制因子封閉多肽 

凝血調(diào)節(jié)蛋白/血栓調(diào)節(jié)抗體 白細(xì)胞免疫球蛋白樣受體-B封閉多肽 

FMO9P蛋白抗體 激肽原1重鏈封閉多肽 

果糖-2,6-二磷4抗體 腺苷激封閉多肽 

葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白3抗體 自噬相關(guān)蛋白16A封閉多肽 

磷化離子型谷氨受體1抗體 組蛋白賴氨N-甲基轉(zhuǎn)移2C封閉多肽 

AF750標(biāo)記小鼠抗人CD45單克隆抗體 磷脂酰基醇蛋白聚糖1封閉多肽 

鋅指蛋白768抗體 磷激1封閉多肽 

表皮生長(zhǎng)因子樣蛋白1/Flamingo homolog 1抗體 核孔蛋白1封閉多肽 

1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框148抗體 磷化核突觸蛋白α封閉多肽 

NUDT10蛋白抗體 肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白Z盤(pán)狀蛋白封閉多肽 

PCQAP蛋白抗體 重組人S100B蛋白 

信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子5b抗體 利什曼原蟲(chóng)表面(GP63)封閉多肽 
大鼠淋巴結(jié)淋巴細(xì)胞重組人白細(xì)胞介-2(凍干粉GMP級(jí))英文名稱:HUM IL-2(GMP級(jí))1mg

重組小鼠白細(xì)胞介-2英文名稱:IL-2(大腸桿菌)10ug

重組小鼠白細(xì)胞介-2英文名稱:IL-2(大腸桿菌)50ug

白介-3英文名稱:IL-3(C-6his Mouse )10ug

重組人胰島英文名稱:rh Insulin1g

重組人白細(xì)胞介-4 英文名稱:重組人IL-410ug

重組人白細(xì)胞介-4 英文名稱:重組人IL-4(大腸桿菌)

10ug


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