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小鼠小腸Cajal間質(zhì)細(xì)胞

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更新時間:2023-04-21 14:52:19瀏覽次數(shù):329

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來源 小腸組織
小鼠小腸Cajal間質(zhì)細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:MDCK狗腎轉(zhuǎn)化細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500MLOAR-L1綿羊肺成纖維(原代永生化)細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基125MLOAR-L1綿羊肺成纖維(原代永生化)細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500MLpac2斑馬魚胚胎成纖維細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基125MLpac2斑馬魚胚胎成纖維細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500ML

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

小鼠小腸Cajal間質(zhì)細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

小腸組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡介:

分離自小腸組織;小腸位于腹中,上端接幽門與胃相通,下端通過闌門與大腸相連,是食物消化吸收的主要場所。小腸盤曲于腹腔內(nèi),上連胃幽門,下接盲腸,分為十二指腸、空腸和回腸三部分。小腸內(nèi)消化是至關(guān)重要的,因?yàn)槭澄锝?jīng)過小腸內(nèi)胰液、膽汁和小腸液的化學(xué)性消化及小腸運(yùn)動的機(jī)械性消化后,基本上完成了消化過程,同時營養(yǎng)物質(zhì)被小腸粘膜吸收了。小腸管壁由粘膜、粘膜下層、肌層和漿膜構(gòu)成。其結(jié)構(gòu)特點(diǎn)是管壁有環(huán)形皺襞,粘膜有許多絨毛,絨毛根部的上皮下陷至固有層,形成管狀的腸腺,其開口位于絨毛根部之間。絨毛和腸腺與小腸的消化和吸收功能關(guān)系密切;構(gòu)成腸腺的細(xì)胞有柱狀細(xì)胞、杯狀細(xì)胞、潘氏細(xì)胞和未分化細(xì)胞。柱狀細(xì)胞和內(nèi)分泌細(xì)胞與絨毛上皮相似,接近絨毛的柱狀細(xì)胞與吸收細(xì)胞相似,絨毛深部的柱狀細(xì)胞微絨毛少而短,不形成紋狀緣。Cajal間質(zhì)細(xì)胞(ICC)是一類主要分布于胃腸道的間質(zhì)細(xì)胞,是胃腸道的起搏細(xì)胞和信號傳導(dǎo)細(xì)胞,與肌細(xì)胞以及末梢神經(jīng)元有著緊密的關(guān)系,具有激發(fā)和促進(jìn)胃腸蠕動的作用。借助于電子顯微鏡技術(shù),清楚觀察到了ICC位置分布和內(nèi)部精細(xì)結(jié)構(gòu);應(yīng)用免疫熒光等生化技術(shù),發(fā)現(xiàn)了其特殊表達(dá)的c-kit蛋白;利用電生理技術(shù),得知多種胃腸動力障礙疾病也與其異常有關(guān)。多年來,學(xué)者逐漸在胃腸道、膽道、膀胱、子宮等部位發(fā)現(xiàn)了ICC的蹤跡,并試圖闡述其與某些疾病的發(fā)生機(jī)制。

5.方法簡介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用膠原消化法結(jié)合組織貼塊法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)c-kit免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  成纖維細(xì)胞樣

傳代特性  不建議傳代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實(shí)驗(yàn)報告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

腦衰蛋白反應(yīng)調(diào)節(jié)蛋白4抗體 絨毛蛋白封閉多肽 人補(bǔ)體片斷3a(C3a)ELISA試劑盒

髓系細(xì)胞觸發(fā)受體1抗體 Nano-Tag (15) 多肽 人Ⅷ相關(guān)抗原(Ⅷ-Ag)試劑盒 ELISA

組蛋白去甲基轉(zhuǎn)移JMJD7抗體 磷化D酪氨激衰減蛋白2封閉多肽 人Ⅸ(FⅨ)ELISA檢測試劑盒

鈣粘蛋白16抗體 磷化Fas相關(guān)死亡結(jié)構(gòu)域蛋白封閉多肽 人Ⅹ(FⅩ)ELISA Kit

1號染色體開放閱讀框103抗體 CD318封閉多肽 人血管性血友病因子/瑞斯托霉輔因子(VWF)ELISA試劑盒

富含嘌呤元件結(jié)合蛋白A抗體 紅細(xì)胞磷脂酰肌醇聚糖A封閉多肽 人纖溶抗纖溶復(fù)合物(PAP)試劑盒 ELISA

降鈣基因相關(guān)肽1/2抗體 ECHDC1蛋白封閉多肽 人抗復(fù)合物(TAT)ELISA檢測試劑盒

英文名稱: COPS3 軸突蛋白3 beta封閉多肽 人抗受體(ATR)ELISA Kit

葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4增強(qiáng)因子抗體 去整合樣金屬18封閉多肽 人受體(TR)ELISA試劑盒

8號染色體開放閱讀框58抗體 鋅結(jié)合乙醇脫氫結(jié)構(gòu)域蛋白1封閉多肽 人第八因子相關(guān)抗原(FⅧAg)試劑盒 ELISA

磷化真核翻譯起始因子4B抗體 性神經(jīng)鞘磷脂封閉多肽 人血纖蛋白原(Fbg)ELISA檢測試劑盒

SPIRE2蛋白抗體 重組小鼠鳥苷激GMK蛋白 人主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類(MHCⅠ/HLAⅠ)ELISA Kit

磷化富含脯氨的酪氨激2抗體 血栓調(diào)節(jié)蛋白封閉多肽 人抗Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)ELISA試劑盒

表皮生長因子抗體 驅(qū)動蛋白家族成員5C封閉多肽 人血栓前體蛋白(TpP)試劑盒 ELISA

SHROOM4蛋白抗體 磷化樁蛋白Paxillin封閉多肽 人淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原3(LFA-3/CD58) ELISA檢測試劑盒

英文名稱: FOXP1 β淀粉樣蛋白胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白1封閉多肽 人主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類(MHCⅢ/HLA-Ⅲ)ELISA Kit

腫瘤壞死因子-α單克隆抗體 磷化轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子CEBP α 封閉多肽 人主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類(MHCⅡ/HLA-Ⅱ)ELISA試劑盒

神經(jīng)營養(yǎng)因子抗體 3號染色體開放閱讀框21封閉多肽 人載脂蛋白A1(apo-A1)試劑盒 ELISA
小鼠小腸Cajal間質(zhì)細(xì)胞小鼠主動脈瓣膜間質(zhì)細(xì)胞英文名稱:小鼠主動脈瓣膜間質(zhì)細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

小鼠大隱靜脈內(nèi)皮細(xì)胞英文名稱:小鼠大隱靜脈內(nèi)皮細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

小鼠腎動脈平滑肌細(xì)胞英文名稱:小鼠腎動脈平滑肌細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

小鼠腎動脈內(nèi)皮細(xì)胞英文名稱:小鼠腎動脈內(nèi)皮細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

小鼠胸主動脈平滑肌細(xì)胞英文名稱:小鼠胸主動脈平滑肌細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

小鼠食管上皮細(xì)胞英文名稱:小鼠食管上皮細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

小鼠食管平滑肌細(xì)胞英文名稱:小鼠食管平滑肌細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

 


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