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小鼠腎小球上皮細胞

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更新時間:2023-04-23 10:09:10瀏覽次數(shù):252

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 腎組織
小鼠腎小球上皮細胞的相關產(chǎn)品:MFC-GFP (小鼠前胃癌細胞(綠色熒光蛋白標記))1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶人外周血淋巴細胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶SW620 (人結腸癌細胞) (L15) (STR鑒定正確)1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶NRK-52E (大鼠腎細胞) (種屬鑒定正確)1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶人外周血樹突狀細胞(未成熟DC細胞)5×10?Cells

詳細介紹

1.png

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

小鼠腎小球上皮細胞

5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

腎組織

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自腎組織;腎臟是機體的重要器官,它的基本功能是生成尿液,借以清除體內(nèi)代謝產(chǎn)物及某些廢物、毒物,同時經(jīng)重吸收功能保留水份及其他有用物質(zhì),如葡萄糖、蛋白質(zhì)、氨基suan、鈉離子、鉀離子、碳suan氫鈉等,以調(diào)節(jié)水、電解質(zhì)平衡及維護suan堿平衡。腎臟同時還有內(nèi)分泌功能,生成腎素、促紅細胞生成素、活性維生素D3、前列腺素、激肽等,又為機體部分內(nèi)分泌激素的降解場所和腎外激素的靶器官。腎臟的這些功能,保證了機體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定,使新陳代謝得以正常進行。腎小球是腎元中的用于將血液過濾生成原尿的一團毛細血叢,被鮑氏囊所包裹,是尿液形成的重要構造。血液經(jīng)由入球小動脈進入腎小球。腎小球上皮細胞是由間充質(zhì)細胞分化發(fā)育、襯貼于腎小球血管腔的單層扁平上皮細胞,是腎小球的固有細胞之一,也是構成腎小球濾過膜的重要組成部分。腎小球上皮細胞的正常結構和功能是腎單位濾過及腎小球微環(huán)境穩(wěn)定的重要保障。腎小球濾過膜的外層為上皮細胞層,厚約40nm,腎小球上皮細胞是腎小囊的臟層上皮細胞,貼附于腎小球血管外側(cè)基底膜上。上皮細胞又稱足細胞,足細胞的不規(guī)則突起為足突,其間有許多狹小間隙,血液經(jīng)濾過膜過濾入腎小球囊。腎小球上皮細胞可通過合成和分泌腎上腺髓質(zhì)肽抑制系膜細胞增殖,腎上腺髓質(zhì)肽作為一種重要的旁分泌因子,可保持腎小球微環(huán)境穩(wěn)定,并參與腎小球的炎癥過程。體外培養(yǎng)的腎小球上皮細胞對各型腎小球腎炎具有重要的研究價值。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用胰dan白-膠原混合消化法結合差速貼壁法,并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實驗室分離的經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態(tài)  上皮細胞樣

傳代特性  可傳1-2代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

二磷腺苷核糖基化因子核苷交換因子2抗體 孤兒核受體蛋白Nur77封閉多肽 

CD34單克隆抗體 細胞分裂周期蛋白25C封閉多肽 

酪氨蛋白激受體B6抗體 細胞周期依賴性激抑制相關蛋白封閉多肽 

胞苷尿苷鳥苷結合蛋白1抗體 尿鹽重吸收轉(zhuǎn)運子1封閉多肽 

乙基丙二腦病蛋白抗體 1號染色體開放閱讀框25封閉多肽 

G蛋白偶聯(lián)受體128抗體 腺嘌呤核苷轉(zhuǎn)運蛋白1封閉多肽 

環(huán)指蛋白56抗體 β-葡萄糖腦苷脂封閉多肽 

神經(jīng)營養(yǎng)因子HNT抗體 3-氨基-2-惡唑烷酮雞卵白蛋白偶聯(lián)物 

鋅指蛋白20抗體 碳酐4封閉多肽 

鋅指蛋白701抗體 重組人GUCY2C蛋白 

通用轉(zhuǎn)錄因子IIF亞基2/TFIIF RAP 30抗體 附睪精子結合蛋白1封閉多肽 

英文名稱: SGK1 原鈣粘附蛋白α4封閉多肽 

雌激調(diào)節(jié)蛋白LIV1/鋅轉(zhuǎn)運蛋白抗體 染色體區(qū)域穩(wěn)定蛋白/核輸出蛋白1封閉多肽 

英文名稱: CR1 核受體共激活劑1封閉多肽 

MAN1C1蛋白抗體 血小板源性生長因子D/脊髓源性生長因子B封閉多肽 

β2-微球蛋白單克隆抗體 組織相關抗原HLA-B15封閉多肽 

開關相關蛋白70單克隆抗體 長鏈脂肪連接1/2封閉多肽 

SMCR7L蛋白抗體 粘附相關激封閉多肽 
小鼠腎小球上皮細胞人胚肺成纖維細胞培養(yǎng)基100mL人胚肺成纖維細胞培養(yǎng)基由技術團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持人胚肺成纖維細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含人胚肺成纖維細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于人胚肺成纖維細胞的體外培養(yǎng)。

RPMI-1640無糖(含HEPES)500mL-

William's E(含L-丙氨酰-)500mL-

人前列腺成纖維細胞培養(yǎng)基100mL人前列腺成纖維細胞培養(yǎng)基由技術團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持人前列腺成纖維細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含人前列腺成纖維細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于人前列腺成纖維細胞的體外培養(yǎng)。

雞骨骼肌細胞培養(yǎng)基100mL雞骨骼肌細胞培養(yǎng)基由技術團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持雞骨骼肌細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含雞骨骼肌細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于雞骨骼肌細胞的體外培養(yǎng)。

Ham's F-12(不含L-)500mL-

RPMI-1640培養(yǎng)基(含20%FBS)125mL×4RPMI-1640是Moore等人于1967年在美國紐約州法羅市的羅斯韋爾公園紀念研究所(Roswell Park Memorial Institute,RPMI)開發(fā)出來的,RPMI是該研究所開發(fā)的一類細胞培養(yǎng)基,1640是培養(yǎng)基代號。RPMI-1640是改進型的McCoy's 5A培養(yǎng)基,使用碳氫鹽緩沖系統(tǒng),與大多數(shù)哺乳動物細胞培養(yǎng)基不同的是其典型的PH8的配方。RPMI-1640培養(yǎng)基初是為淋巴細胞培養(yǎng)專門設計的,現(xiàn)在已廣泛應用于各種正常細胞和癌細胞的培養(yǎng),尤其是懸浮細胞的培養(yǎng),是使用為廣泛的培養(yǎng)基之一。


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