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小鼠腓腸肌細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-21 14:51:00瀏覽次數(shù):246

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來源 骨骼肌組織
小鼠腓腸肌細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:RF/6A猴脈絡(luò)膜-視網(wǎng)膜內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500MLVERO非洲綠猴腎細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基125MLVERO非洲綠猴腎細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500MLVERO E6非洲綠猴腎細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基125MLVERO E6非洲綠猴腎細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500ML

詳細(xì)介紹

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產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

小鼠腓腸肌細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

骨骼肌組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

分離自小腿肌肉組織;腓腸肌位于小腿后面的皮下,是一個(gè)淺表的肌肉,當(dāng)人體站立時(shí),可以在小腿后面看到隆起肌肉的輪廓就是腓腸肌。腓腸肌為小腿后側(cè)群淺組肌肉,有內(nèi)、外二頭,內(nèi)側(cè)頭起自股骨內(nèi)側(cè)髁上的三角形隆起,外側(cè)頭起自股骨外側(cè)髁的近側(cè)端,在二頭的深面各有一滑膜囊。腓腸肌的二肌腹增大,在腘窩下角彼此鄰近,所成夾角多為25°~30°,此肌下行與比目魚肌移行為跟腱,止于跟骨結(jié)節(jié)。腓腸肌的動(dòng)脈發(fā)自腘動(dòng)脈、靜脈與動(dòng)脈伴行,注入腘靜脈或小隱靜脈。腓腸肌的神經(jīng)全部來自脛神經(jīng)。包括內(nèi)、外側(cè)肌神經(jīng)。腓腸肌在行走及站立時(shí)能提足跟向上,直立時(shí),腓腸肌和比目魚肌都參加強(qiáng)固膝關(guān)節(jié),并調(diào)節(jié)小腿和足的位置。脛前皮膚缺損或深部竇道及瘢痕,可以切取腓腸肌內(nèi)側(cè)頭及其皮面皮膚所形成的肌皮瓣向前旋轉(zhuǎn)。腓腸肌還可影響足的縱弓,該肌癱瘓或時(shí),足縱弓將加深。該肌由脛神經(jīng)支配,股骨髁上骨折時(shí),因腓腸肌收縮遠(yuǎn)側(cè)端常自后移位。腓腸肌是脛骨和腓骨后面的一塊肌肉。腓腸肌細(xì)胞屬于骨骼肌細(xì)胞的一種,骨骼肌又稱橫紋肌,肌肉中的一種,約占全身重量的40%。骨骼肌纖維為長柱形的多核細(xì)胞,肌膜的外面有基膜緊密貼附。屬于橫紋肌,橫紋肌還包括心肌與內(nèi)臟橫紋肌,其中骨骼肌主要分布于四肢。每塊肌肉都是具有一定形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能的器官,有豐富的血管、淋巴分布,在軀體神經(jīng)支配下收縮或舒張,進(jìn)行隨意運(yùn)動(dòng)。肌肉可根據(jù)共形狀、大小、位置、起止點(diǎn)、纖維方向和作用等命名。依形態(tài)命名的如斜方肌、菱形肌、三角肌、梨狀肌等。骨骼肌細(xì)胞呈纖維狀,不分支,有明顯橫紋,核很多,且都位于細(xì)胞膜下方。肌細(xì)胞內(nèi)有許多沿細(xì)胞長軸平行排列的細(xì)絲狀肌原纖維。每一肌原纖維都有相間排列的明帶(Ⅰ帶)及暗帶(A帶)。明帶染色較淺,而暗帶染色較深。暗帶中間有一條較明亮的線稱H線。H線的中部有一M線。明帶中間,有一條較暗的線稱為Z線。兩個(gè)Z線之間的區(qū)段,叫做一個(gè)肌節(jié)。骨骼肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見細(xì)胞貼壁伸展,細(xì)胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細(xì)胞匯合,多數(shù)細(xì)胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,高低起伏;細(xì)胞密度低時(shí),常交織成網(wǎng)狀;密度高時(shí),則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點(diǎn)。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用膠原消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)α-Sarcometric actin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  成纖維細(xì)胞樣

傳代特性  可傳3-5代左右

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大?。?/span>
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

胰島樣生長因子1受體相互作用蛋白1抗體 著絲粒蛋白T封閉多肽 人血小板因子3(PF-3)ELISA試劑盒

Bcl-2樣蛋白2抗體 轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白DISP2封閉多肽 人原片段F1+2(F1+2)ELISA試劑盒 ELISA

葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白94抗體 重組人甲胎蛋白 人甘露糖結(jié)合蛋白/甘露糖結(jié)合凝集(MBP/MBL) ELISA檢測(cè)試劑盒

BTBD6蛋白抗體 熒光標(biāo)記親合 人膜攻擊復(fù)合物(MAC) ELISA Kit

GLIS1蛋白抗體 衰老關(guān)鍵蛋白封閉多肽 人優(yōu)球蛋白(EL) ELISA試劑盒

磷化核糖體S6蛋白激抗體 結(jié)蛋白樣蛋白CGNL1封閉多肽 人游離血紅蛋白(f-Hb) 試劑盒 ELISA

趨化樣因子超家族成員2抗體 原癌基因相關(guān)蛋白R(shí)AP2B封閉多肽 人1(PRM1)ELISA檢測(cè)試劑盒

磷化雌激受體α抗體 突觸后蛋白CRIPT封閉多肽 人一氧化碳血紅蛋白(HbCO) ELISA Kit

磷化白細(xì)胞介1受體銜接蛋白抗體 細(xì)胞粘附分子伴侶蛋白1封閉多肽 人血小板相關(guān)免疫球蛋白(PAIg) ELISA試劑盒

跨膜蛋白59抗體 E3泛連接NEDD4結(jié)合蛋白2封閉多肽 人血小板相關(guān)補(bǔ)體3(PAC3)試劑盒 ELISA

泛樣蛋白特異性6抗體 螢火蟲熒光封閉多肽 人血栓A2(TX-A2) ELISA檢測(cè)試劑盒

MAB21L1蛋白抗體 異質(zhì)核糖核蛋白C樣蛋白1封閉多肽 人血紅蛋白H(HbH) ELISA Kit

RAS相關(guān)蛋白R(shí)ab5B抗體 鉻細(xì)胞瘤患者抑癌基因SDHB封閉多肽 人血紅蛋白C(HbC) ELISA試劑盒

21號(hào)染色體開放閱讀框56抗體 磷化糖原合激3α/β封閉多肽 人纖維蛋白(Fibrin) 試劑盒 ELISA

FAM19A3蛋白抗體 5-三磷肌醇受體2封閉多肽 人血纖肽/纖維蛋白肽B(FPB) ELISA檢測(cè)試劑盒

EI2BL/MRI1蛋白抗體 FAS凋亡抑制分子3封閉多肽 人纖溶原激活劑(PLGA) ELISA Kit

同源相互作用蛋白激4抗體 KLHDC1蛋白封閉多肽 人細(xì)胞膜表面免疫球蛋白(SmIg) ELISA試劑盒

G蛋白家族RAB21蛋白抗體 組織型纖溶原激活蛋白封閉多肽 人前白蛋白(PA) 試劑盒 ELISA
小鼠腓腸肌細(xì)胞小鼠氣管平滑肌細(xì)胞英文名稱:小鼠氣管平滑肌細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

小鼠支氣管上皮細(xì)胞英文名稱:小鼠支氣管上皮細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

小鼠支氣管平滑肌細(xì)胞英文名稱:小鼠支氣管平滑肌細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

小鼠肺成纖維細(xì)胞英文名稱:小鼠肺成纖維細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

小鼠肺巨噬細(xì)胞英文名稱:小鼠肺巨噬細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

小鼠肺微血管周細(xì)胞英文名稱:小鼠肺微血管周細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

小鼠心肌細(xì)胞英文名稱:小鼠心肌細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告


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