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小鼠小梁網(wǎng)細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-21 14:16:43瀏覽次數(shù):193

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來源 眼球
小鼠小梁網(wǎng)細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:U251 MG/TMZ人類星形膠質(zhì)瘤耐胺細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基125MLU251 MG/TMZ人類星形膠質(zhì)唑胺細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500MLU251 MG/TMZ+LUC(3000)人類星形膠質(zhì)瘤耐替光標(biāo)記細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基125MLU251 MG/TMZ+LUC(3000)人類星形膠質(zhì)光標(biāo)記細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500M

詳細(xì)介紹

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡介:

分離自眼球組織;小梁網(wǎng)由角膜基質(zhì)纖維、后界膜和角膜內(nèi)皮向后擴(kuò)展而成,覆蓋在鞏膜靜脈竇的內(nèi)側(cè)。小梁網(wǎng)細(xì)胞在眼內(nèi)壓調(diào)節(jié)中起著關(guān)鍵作用;小梁網(wǎng)細(xì)胞內(nèi)有特定的神經(jīng)遞質(zhì)和神經(jīng)肽受體,其中包括腎上腺素、乙酰膽和神經(jīng)肽Y。青光眼是由于眼內(nèi)壓力升高而造成的一種不可逆致盲眼病,小梁網(wǎng)細(xì)胞的體外培養(yǎng)是青光眼病因?qū)W研究的重要手段之一。在小梁網(wǎng)細(xì)胞中,一長串的血管活性多肽和生長因子能夠觸發(fā)細(xì)胞內(nèi)信號傳導(dǎo)機(jī)制,小梁網(wǎng)細(xì)胞可合成不同類型的細(xì)胞外基質(zhì)蛋白以及金屬dan白。形態(tài)學(xué)觀察可見,剛從組織塊長出的原代細(xì)胞,形態(tài)各異,多數(shù)呈星狀或不規(guī)則形。細(xì)胞有胞突,核橢圓形,胞體肥大,胞漿豐富,且可見吞噬顆粒。隨著細(xì)胞的增生及相互融合為單層,細(xì)胞的形態(tài)趨于一致。胞漿的色素顆粒及胞突消失,排列緊密呈類似上皮細(xì)胞的扁橢圓形或不規(guī)則形。胞體透亮,包膜清晰。

5.方法簡介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用組織貼塊法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)NSE(神經(jīng)元特異性烯醇化)免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  梭形、多角形

傳代特性  可傳2-3代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

小鼠小梁網(wǎng)細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

眼球

1.png

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大?。?/span>
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

小鼠抗人CD14單克隆抗體 白血病抑制因子封閉多肽 人癌胚鐵蛋白(CEF) ELISA檢測試劑盒

補(bǔ)體因子H相關(guān)蛋白2抗體 磷化GATA結(jié)合蛋白3封閉多肽 人鱗狀細(xì)胞癌相關(guān)抗原(SCCAg)ELISA Kit

k輕鏈抗體 肌微管蛋白MTMR13封閉多肽 人腫瘤特異性抗原(TSA)  ELISA試劑盒

次磷核糖基轉(zhuǎn)移1單克隆抗體 磷化信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子4封閉多肽 人黑色瘤轉(zhuǎn)移表面黏附分子(MMSAM)試劑盒 ELISA

鉀離子通道蛋白KCNJ15抗體 乳腺癌轉(zhuǎn)移抑制基因1封閉多肽 人乳腺癌易感蛋白2(BRCA-2)ELISA檢測試劑盒

交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian 紅細(xì)胞腺苷脫氨3封閉多肽 人凋亡信號調(diào)節(jié)激I(ASK-1)ELISA Kit

β淀粉樣肽(1-28)單克隆抗體 蛋白酪氨磷H1封閉多肽 人凋亡信號調(diào)節(jié)激I(ASK-1)ELISA試劑盒

磷化D酪氨激衰減蛋白2抗體 磷化丙氨蛋白激C底物Marcks封閉多肽 人Bcl-2相關(guān)X蛋白(BAX) 試劑盒 ELISA

G蛋白調(diào)節(jié)誘導(dǎo)神經(jīng)突增生蛋白3抗體 內(nèi)收蛋白a1封閉多肽 人轉(zhuǎn)移因子(TF) ELISA檢測試劑盒

免疫球蛋白結(jié)合蛋白-1抗體 白介2受體γ鏈封閉多肽 人結(jié)腸癌抗原(CCA)ELISA Kit

微管結(jié)合蛋白CYLD單克隆抗體 細(xì)胞周期蛋白依賴性激CABLES2封閉多肽 人H-ras ELISA試劑盒

乳腺癌抗雌激耐藥蛋白1 三磷腺苷門控陽離子通道蛋白封閉多肽 人c-sis 試劑盒 ELISA

絲氨抑制劑B4/鱗狀細(xì)胞癌抗原2抗體 細(xì)胞色cP450 CYP20A1封閉多肽 人c-jun ELISA檢測試劑盒

SH3BGR蛋白抗體 NK細(xì)胞抑制性受體2DL1封閉多肽 人c-fos ELISA Kit

線粒體核糖體蛋白S7抗體 磷化絲裂原活化蛋白激MKK6封閉多肽 人c-myc癌基因產(chǎn)物(c-myc)ELISA試劑盒

腫瘤血管內(nèi)皮調(diào)節(jié)蛋白Robo4抗體 ChAT乙酰轉(zhuǎn)移封閉多肽 人Smad1  試劑盒 ELISA

磷化B-Raf抗體 S100B蛋白封閉多肽 人Smad7  ELISA檢測試劑盒

LCK相互作用膜蛋白抗體 VSV-G tag多肽 人腫瘤相關(guān)抗原(TAA) ELISA Kit
小鼠小梁網(wǎng)細(xì)胞人食管癌細(xì)胞英文名稱:人食管癌細(xì)胞5×105不提供細(xì)胞鑒定報(bào)告

人食管纖維瘤細(xì)胞英文名稱:人食管纖維瘤細(xì)胞5×105不提供細(xì)胞鑒定報(bào)告

人肝癌細(xì)胞英文名稱:人肝癌細(xì)胞5×105不提供細(xì)胞鑒定報(bào)告

人肝癌相關(guān)成纖維細(xì)胞英文名稱:人肝癌相關(guān)成纖維細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

人肝纖維母細(xì)胞英文名稱:人肝纖維母細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

人胃癌相關(guān)成纖維細(xì)胞英文名稱:人胃癌相關(guān)成纖維細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

gang門上皮細(xì)胞英文名稱:人gang門上皮細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

 


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