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人神經(jīng)少突膠質(zhì)細(xì)胞

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來源 腦組織
人神經(jīng)少突膠質(zhì)細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:人腮腺腫瘤細(xì)胞原代細(xì)胞5×105人扁桃體間質(zhì)細(xì)胞原代細(xì)胞5×105人頜下腺囊腫細(xì)胞原代細(xì)胞5×105人甲狀腺微血管內(nèi)皮細(xì)胞原代細(xì)胞5×105人扁桃體上皮細(xì)胞原代細(xì)胞5×105

詳細(xì)介紹

1.png

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

人神經(jīng)少突膠質(zhì)細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

腦組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡介:

分離自腦皮層組織;大腦分左右兩個(gè)半球,大腦皮質(zhì)(灰質(zhì))覆蓋著每個(gè)大腦半球的大部分,它是神經(jīng)元胞體集中的地方。內(nèi)部則是由神經(jīng)纖維或髓鞘構(gòu)成的白質(zhì)。每一個(gè)半球都有三個(gè)面,即外側(cè)面(約占整個(gè)皮質(zhì)面積的1/3)、內(nèi)側(cè)面和底面(占2/3的面積);半球表面有很多深淺不等的溝或裂,溝或裂之間的隆起叫回,它們大大增加了大腦的表面積;大腦外側(cè)面重要的溝、裂有大腦外側(cè)裂、頂枕裂和中央溝。由于三溝裂之界隔,使大腦皮質(zhì)組分為額葉、頂葉、顳葉、枕葉四大部分。少突膠質(zhì)細(xì)胞分布于中樞神經(jīng)系統(tǒng),在銀浸染標(biāo)本中,少突膠質(zhì)細(xì)胞比星狀膠質(zhì)細(xì)胞小,其突起也較小而少,呈珠狀,故被稱為少突膠質(zhì)細(xì)胞或寡突膠質(zhì)細(xì)胞。但是用特異性免疫細(xì)胞化學(xué)染色顯示的少突膠質(zhì)細(xì)胞,其突起并不少,而且還有許多分支。少突膠質(zhì)細(xì)胞的主要功能是在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中包繞軸突、形成絕緣的髓鞘結(jié)構(gòu)、協(xié)助生物電信號的跳躍式高效傳遞并維持和保護(hù)神經(jīng)元的正常功能。其異常不僅會(huì)導(dǎo)致中樞神經(jīng)系統(tǒng)脫髓鞘病變,還會(huì)引起神經(jīng)元損傷或精神類疾病,甚至可以引發(fā)腦腫瘤。根據(jù)少突膠質(zhì)細(xì)胞的分布和位置可分為三種:①束間少突膠質(zhì)細(xì)胞(interfasicular-oligodendrocyte),分布在中樞神經(jīng)系統(tǒng)的白質(zhì)的神經(jīng)纖維束之間;②神經(jīng)細(xì)胞周少突膠質(zhì)細(xì)胞(perineuronal-oligodendrocyte),分布在中樞神經(jīng)系統(tǒng)的灰質(zhì)區(qū),常位于神經(jīng)細(xì)胞周圍,與神經(jīng)細(xì)胞的關(guān)系密切,故又稱為神經(jīng)細(xì)胞周衛(wèi)星細(xì)胞(perineuronal-satellite-cell),但在神經(jīng)細(xì)胞胞體與此類細(xì)胞之間亦常有星形膠質(zhì)細(xì)胞的薄片狀突起分隔;③血管周少突膠質(zhì)細(xì)胞(pcrivascular-oligodendrocyte),主要分布在中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)的血管周圍。少突膠質(zhì)細(xì)胞形成的髓鞘膜是為特化和復(fù)雜動(dòng)物細(xì)胞膜之一,其上有眾多跨膜蛋白和表面蛋白用以維持髓鞘的致密穩(wěn)定結(jié)構(gòu)。如半乳糖腦苷脂(GC),它是髓鞘的一種主要類脂,用GC抗體鑒別成熟的少突膠質(zhì)細(xì)胞是一種比較早的免疫鑒定方法。近十年來,神經(jīng)發(fā)育學(xué)科進(jìn)展較快,更多的少突膠質(zhì)細(xì)胞分子標(biāo)記物被鑒定出來,如PDGFRa、Mbp、CNP、SOX-10。

5.方法簡介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用胰dan白消化、混合細(xì)胞營養(yǎng)缺失培養(yǎng)、搖床振蕩結(jié)合差速貼壁法并通過專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)少突膠質(zhì)細(xì)胞經(jīng)GC(Galactocerebroside)免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  B-27 Supplement、PDGF-AA、bFGF、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  梭形、多角形

傳代特性  不增殖;不傳代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大?。?/span>
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

S轉(zhuǎn)移M2抗體 瞬時(shí)受體電位蛋白12封閉多肽 大鼠鈣結(jié)合蛋白(CR)ELISA檢測試劑盒

周期D2抗體 磷化細(xì)胞核因子p50/k基因結(jié)合核因子封閉多肽 大鼠透明質(zhì)結(jié)合蛋白(HABP)ELISA Kit

促腎上腺皮質(zhì)激釋放因子/促腎上皮質(zhì)激釋放激抗體 CP2相關(guān)轉(zhuǎn)錄抑制因子1封閉多肽 大鼠骨形成蛋白6(BMP-6)ELISA試劑盒

胃動(dòng)受體抗體 ABI1/SSH3BP1蛋白封閉多肽 大鼠淋巴細(xì)胞因子試劑盒 ELISA

突觸融合蛋白1A抗體 戊型肝炎病毒封閉多肽 大鼠N-乙酰基-絲氨酰-天門冬酰-賴氨酰-脯氨(AcSDKP)ELISA檢測試劑盒

四分子交聯(lián)體14抗體(四旋蛋白) 神經(jīng)肽Y1受體封閉多肽 大鼠抗血小板抗體IgG/M/A(PA-IgG/M/A)ELISA Kit

SHISA5蛋白抗體 EIF3S4蛋白封閉多肽 大鼠Ⅰ型膠原N末端肽(NTX)ELISA試劑盒

甘油二酯激δ/DGK-δ抗體 白細(xì)胞介1受體相關(guān)蛋白封閉多肽 大鼠熱休克蛋白27(HSP-27)試劑盒 ELISA

C型凝集4家族E抗體 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜蛋白UNC93B封閉多肽 大鼠Smad1  ELISA檢測試劑盒

耳聾常染色體顯性遺傳相關(guān)蛋白3抗體 組織相容性抗原H封閉多肽 大鼠Smad7  ELISA Kit

整合β7抗體 重組人雌激受體β蛋白 大鼠26S體(26S PSM) ELISA試劑盒

腦特異性同源POU結(jié)構(gòu)域蛋白5抗體 血小板糖蛋白GPIb封閉多肽 大鼠TGF-β誘導(dǎo)早期基因1(TIEG1) 試劑盒 ELISA

NUDT14蛋白抗體 辣椒受體5封閉多肽 大鼠內(nèi)脂/內(nèi)臟脂肪(visfatin)ELISA檢測試劑盒

艾滋病病毒抗體 SLAMF7封閉多肽 大鼠胰原激活肽(TAP)ELISA Kit

2號染色體開放閱讀框24抗體 APC標(biāo)記豬胰島蛋白 大鼠補(bǔ)體因子H(CFH)ELISA試劑盒

Leishmanolysin樣肽抗體 AHA3(擬南芥)封閉多肽 大鼠膀胱腫瘤抗原(BTA)試劑盒 ELISA

英文名稱: Cytokeratin 16 牛血清白蛋白偶聯(lián)物 大鼠血小板衍生生長因子BB(PDGF-BB) ELISA檢測試劑盒

線粒體核糖體蛋白L12抗體 前列腺跨膜上皮1抗原封閉多肽 大鼠胃(PP)ELISA Kit
人神經(jīng)少突膠質(zhì)細(xì)胞兔陰道真皮成纖維細(xì)胞英文名稱:兔陰道真皮成纖維細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

兔骨細(xì)胞英文名稱:兔骨細(xì)胞5×105提供化學(xué)染色報(bào)告

兔成骨細(xì)胞英文名稱:兔成骨細(xì)胞5×105提供化學(xué)染色報(bào)告

兔軟骨細(xì)胞英文名稱:兔軟骨細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

兔滑膜成纖維細(xì)胞英文名稱:兔滑膜成纖維細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

兔骨骼肌細(xì)胞英文名稱:兔骨骼肌細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

兔骨骼肌成纖維細(xì)胞英文名稱:兔骨骼肌成纖維細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告


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