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人臍靜脈內(nèi)皮細胞

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更新時間:2023-04-21 13:18:04瀏覽次數(shù):231

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 臍帶組織
人臍靜脈內(nèi)皮細胞的相關產(chǎn)品:HEK-293(293)人胚腎細胞專用培養(yǎng)基細胞培養(yǎng)基500MLHEK-293A人胚腎細胞專用培養(yǎng)基細胞培養(yǎng)基125MLHEK-293A人胚腎細胞專用培養(yǎng)基細胞培養(yǎng)基500MLHEL人紅白白血病細胞專用培養(yǎng)基細胞培養(yǎng)基125MLHEL人紅白白血病細胞專用培養(yǎng)基細胞培養(yǎng)基500ML

詳細介紹

1.png

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

人臍靜脈內(nèi)皮細胞

5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

臍帶組織

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自臍帶組織;它是臍靜脈的重要結構組成細胞之一,在機體的正常生理過程中發(fā)揮著重要作用。臍帶是哺乳類的連接胎兒和胎盤的管狀結構,臍帶中通過尿膜的血管即臍動脈和臍靜脈,卵黃囊的血管即臍腸系膜動脈及臍腸系膜靜脈。在子宮中,子宮動脈在胎盤的母體部分出的毛細血管,與胎盤的子體部胎兒毛細血管靠近,在此處母體和胎兒的血液間進行CO2和O2,代謝產(chǎn)物即代謝廢物和營養(yǎng)物質(zhì)的交換。臍動脈將胎兒產(chǎn)生的廢物運送至胎盤,臍靜脈將O2和營養(yǎng)物質(zhì)從胎盤運送給胎兒。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用胰dan白-膠原聯(lián)合消化法結合差速貼壁法、并通過內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實驗室分離的經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態(tài)  內(nèi)皮細胞樣

傳代特性  可傳3-5代;3代以內(nèi)佳

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

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腺苷環(huán)化激活肽受體1抗體 鋅指蛋白385B封閉多肽 雞腫瘤壞死因子α(TNF-α)elisa試劑盒

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人臍靜脈內(nèi)皮細胞Panc 03.27人胰腺癌細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:Panc 03.27細胞專用培養(yǎng)基500ML

Panc 05.04人胰腺癌上皮細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:Panc 05.04細胞專用培養(yǎng)基125ML

Panc 05.04人胰腺癌上皮細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:Panc 05.04細胞專用培養(yǎng)基500ML

PANC-1人胰腺癌細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:PANC-1細胞專用培養(yǎng)基125ML

PANC-1人胰腺癌細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:PANC-1細胞專用培養(yǎng)基500ML

PANC10.05人胰腺癌 細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:PANC10.05細胞專用培養(yǎng)基125ML

PANC10.05人胰腺癌 細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:PANC10.05細胞專用培養(yǎng)基500ML


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