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大鼠微血管周細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-21 14:49:57瀏覽次數(shù):250

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來(lái)源 微血管組織
大鼠微血管周細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:PIEC豬髖動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500MLB95-8EBV 轉(zhuǎn)化的絨猴白細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基125MLB95-8EBV 轉(zhuǎn)化的絨猴白細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500MLCOS-7非洲綠猴腎 SV40轉(zhuǎn)化 細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基125MLCOS-7非洲綠猴腎 SV40轉(zhuǎn)化 細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500ML

詳細(xì)介紹

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

分離自微血管組織;周細(xì)胞(pericyte)又稱Rouget細(xì)胞和壁細(xì)胞,是一種包圍全身毛細(xì)血管和靜脈中內(nèi)皮細(xì)胞的細(xì)胞,可以收縮。周細(xì)胞嵌入毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞的基膜中,通過(guò)物理接觸和旁分泌信號(hào)與內(nèi)皮細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞通訊,監(jiān)視和穩(wěn)定內(nèi)皮細(xì)胞的成熟過(guò)程。此外,周細(xì)胞還具有調(diào)控毛細(xì)血管血流量、細(xì)胞碎屑清除和吞噬以及血腦屏障滲透性的作用,其多功能性是目前研究的熱點(diǎn)之一,所以對(duì)血管周細(xì)胞的生物學(xué)特征、標(biāo)記物、細(xì)胞功能等的研究都為相關(guān)研究提供基礎(chǔ)資料。周細(xì)胞產(chǎn)生手指狀的外延以調(diào)控毛細(xì)血管的血流量。周細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞之間共同擁有一個(gè)基膜,基膜上有多種細(xì)胞連接,包括多種整合素、神經(jīng)鈣黏素、纖連蛋白以及接合素。它還參與毛細(xì)血管直徑的雙向調(diào)控;毛細(xì)血管受損時(shí),周細(xì)胞還可增殖,分化為內(nèi)皮細(xì)胞和成纖維細(xì)胞。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用膠原-中性dan白聯(lián)合消化法及不銹鋼網(wǎng)篩過(guò)濾法結(jié)合密度梯度離心法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)alpha-SMA免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  成纖維細(xì)胞樣

傳代特性  可傳2-3代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來(lái)源

大鼠微血管周細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

微血管組織

1.png

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

19號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框80抗體 快速周期蛋白C封閉多肽 人細(xì)胞纖維連接蛋白(cFn) ELISA試劑盒

溶質(zhì)載體家族25成員35抗體 LASP1蛋白封閉多肽 人總蛋白S(TPS)試劑盒 ELISA

肝再生磷酯2抗體 FRA-1蛋白封閉多肽 人血清剝奪反應(yīng)相關(guān)蛋白(SDPR)ELISA檢測(cè)試劑盒

碳酐9抗體 G蛋白偶聯(lián)受體149封閉多肽 人中性粒細(xì)胞防御1-3(HNP1-3)ELISA Kit

磷化心臟磷蛋白抗體 小泛樣修飾蛋白4封閉多肽 人嗜性粒細(xì)胞陽(yáng)離子蛋白(ECP)ELISA試劑盒

死亡結(jié)構(gòu)域蛋白NRH2抗體 細(xì)胞周期蛋白3封閉多肽 人血漿抗凝蛋白S(PS)  試劑盒 ELISA

角蛋白相關(guān)蛋白15.1抗體 鋅指蛋白Y染色體2封閉多肽 人血漿抗凝蛋白C(PC)  ELISA檢測(cè)試劑盒

交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian 乙?;?xì)胞核因子(K314/K315)封閉多肽 G Fc片段(Fcγ)ELISA Kit

磷化G氨基丁B型受體2抗體 NFE2相關(guān)因子1封閉多肽 人嗜環(huán)蛋白/親環(huán)B(CyPB) ELISA試劑盒

G蛋白偶聯(lián)受體GPR142蛋白抗體 蛋白磷2調(diào)節(jié)亞基4封閉多肽 人C4結(jié)合蛋白(C4BP)試劑盒 ELISA

EIF2S1單克隆抗體 CD151封閉多肽 人補(bǔ)體片段3c(C3c)ELISA檢測(cè)試劑盒

半乳糖凝集8抗體 蛋白激錨定蛋白封閉多肽 人補(bǔ)體7(C7)ELISA Kit

CAPNS1單克隆抗體 SEL1L封閉多肽 人補(bǔ)體7(C7)ELISA試劑盒

11號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框67抗體 Cervical cancer oncogene 3/宮頸癌原癌基因3封閉多肽 人β淀粉樣蛋白1-42(Aβ1-42)試劑盒 ELISA

英文名稱: CBX4 核糖體蛋白S6激1封閉多肽 人chemerin  ELISA檢測(cè)試劑盒

7號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框34抗體 DNA聚合μ/DNA pol μ封閉多肽 人Ⅻ(FⅫ) ELISA Kit

黑色瘤抑制活性蛋白3抗體 KIAA1045蛋白封閉多肽 人ⅩⅢ(FⅩⅢ)ELISA試劑盒

髓鞘表達(dá)因子2抗體 磷化叉頭蛋白3A封閉多肽 人Ⅲ(FⅢ)試劑盒 ELISA
大鼠微血管周細(xì)胞大鼠視網(wǎng)膜前體細(xì)胞英文名稱:大鼠視網(wǎng)膜前體細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

大鼠胎盤(pán)間充質(zhì)干細(xì)胞英文名稱:大鼠胎盤(pán)間充質(zhì)干細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

大鼠胚胎成纖維細(xì)胞英文名稱:大鼠胚胎成纖維細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

大鼠臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞英文名稱:大鼠臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

大鼠臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞英文名稱:大鼠臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

大鼠胎盤(pán)絨毛膜滋養(yǎng)層細(xì)胞英文名稱:大鼠胎盤(pán)絨毛膜滋養(yǎng)層細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

大鼠羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞英文名稱:大鼠羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

 


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