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兔角膜基質細胞

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更新時間:2023-04-23 09:00:14瀏覽次數(shù):229

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網上看到的信息,謝謝!

產品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 角膜組織
兔角膜基質細胞的相關產品:原代星狀細胞添加劑細胞培養(yǎng)基5mL(100X)原代巨噬細胞添加劑細胞培養(yǎng)基5mL(100X)原代間充質干細胞無血清細胞添加劑細胞培養(yǎng)基25mL(20X)原代間充質干細胞添加劑細胞培養(yǎng)基5mL(100X)原代內皮祖細胞添加劑細胞培養(yǎng)基5mL(100X)

詳細介紹

1.png

產品屬性:

產品名稱

規(guī)格

組織來源

兔角膜基質細胞

5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

角膜組織

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自眼角膜組織;角膜位于眼球前壁的一層透明膜,約占纖維膜的前1/6,從后面看角膜呈正圓形,從前面看為橫橢圓形。角膜厚度各部分不盡相同,中央部薄。角膜有十分敏感的神經末梢,如有外物接觸角膜,眼瞼便會不由自主地合上以保護眼睛。為了保持透明,角膜并沒有血管,透過外界空氣、淚液及房水獲取養(yǎng)份及氧氣。角膜分為五層,由前向后依次為:上皮細胞層、前彈力層、基質層、后彈力層、內皮細胞層。角膜基質層是角膜的主要組成部分,占據角膜厚度的90%,由角膜基質細胞、膠原纖維和細胞外基質構成。角膜基質層缺損的修復主要由角膜基質細胞的增殖及分泌細胞外基質完成。角膜基質層具有結構規(guī)整,透明度高的特點,正常情況下角膜基質細胞分泌組成基質層的成分,維持角膜的透明度,此細胞對于角膜損傷的修復具有重要意義。角膜基質細胞,存在于角膜基質層中,在正常情況下,處于靜止狀態(tài)。但當角膜損傷時,不同上皮來源的因子及環(huán)境信號,將影響角膜基質細胞的應答反應,決定著角膜能否被修復。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用混合膠原消化法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的經Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態(tài)  成纖維細胞樣

傳代特性  可傳5代左右;3代以內狀態(tài)佳

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

轉錄因子相關蛋白NK2抗體 CD3封閉多肽 

單鏈結合蛋白70抗體 牛血清白蛋白偶聯(lián)物 

鈉鈣交換蛋白2抗體 信號調節(jié)蛋白α封閉多肽 

ZNFN1A2蛋白抗體 細胞角蛋白7封閉多肽 

胚胎外胚層發(fā)育蛋白EED抗體 磷化微管相關蛋白封閉多肽 

皮卡丘抗體 ZNT6蛋白封閉多肽 

細胞色C氧化7A2樣蛋白抗體 線粒體核糖體蛋白L54封閉多肽 

賴氨特異性脫甲基4B抗體 SPOCD1蛋白封閉多肽 

腫瘤壞死因子配體超家族成員10C 睪丸分化過程轉錄因子MRO封閉多肽 

3'-5'外切1蛋白抗體 磷半乳糖尿苷轉移1封閉多肽 

5-羥色胺受體1B抗體 鈉鈣交換蛋白3封閉多肽 

脆性X相關蛋白1/脆性X智力低下綜合征相關蛋白1抗體 FBXL21蛋白封閉多肽 

5-羥色胺轉運蛋白抗體 囊泡轉運蛋白SEC20 封閉多肽 

酪蛋白激1γ2/casein kinase Iγ1抗體 磷化核因子κB抑制蛋白α封閉多肽 

葡萄糖轉運蛋白6抗體 重組人甘露聚糖結合凝集絲氨肽2蛋白 

核小體組裝蛋白1抗體 TOM1L2蛋白封閉多肽 

DNA切除修復蛋白1單克隆抗體 ELOV3蛋白封閉多肽 

細胞核因子p105/k基因結合核因子抗體 PTCD3蛋白封閉多肽 
兔角膜基質細胞大鼠腎小球內皮細胞培養(yǎng)基100mL大鼠腎小球內皮細胞培養(yǎng)基由技術團隊精心優(yōu)化,經過長期測試,本產品可保持大鼠腎小球內皮細胞佳的生長狀態(tài)。本產品中已包含大鼠腎小球內皮細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于大鼠腎小球內皮細胞的體外培養(yǎng)。

MEM無糖(不含酚紅、L-)500mL-

H22細胞專用培養(yǎng)基125mL×4H22細胞專用培養(yǎng)基由技術團隊精心優(yōu)化,經過長期測試,本產品可保持H22細胞佳的生長狀態(tài)。本產品中已包含H22細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于H22細胞的體外培養(yǎng)。

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DMEM/F12培養(yǎng)基(含HEPES、10%FBS)125mL×4DMEM/F12培養(yǎng)基是在DMEM培養(yǎng)基的基礎上,添加F12培養(yǎng)基中更為豐富的營養(yǎng)成分,含有多種微量元,廣泛應用于多種哺乳類細胞的培養(yǎng)。同時,DMEM/F12培養(yǎng)基常作為開發(fā)無血清培養(yǎng)基的基礎,也適用于低血清含量下哺乳動物細胞的培養(yǎng)以及克隆密度培養(yǎng)。

Waymouth's MB 752/1500mL-

SW620細胞專用培養(yǎng)基(L15)125mL×4SW620細胞專用培養(yǎng)基由技術團隊精心優(yōu)化,經過長期測試,本產品可保持SW620細胞佳的生長狀態(tài)。本產品中已包含SW620細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于SW620細胞的體外培養(yǎng)。


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