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詳細(xì)介紹
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 組織來源 |
大鼠支氣管成纖維細(xì)胞 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 支氣管組織 |
商品詳細(xì)介紹：
4.細(xì)胞簡介：
分離自支氣管組織；支氣管(Bronchi)，是指由氣管分出的各級分枝，由氣管分出的一級支氣管，即左、右主支氣管。左主支氣管與右主支氣管相比較，前者較細(xì)長，走向傾斜；后者較粗短，走向較前者略直，所以經(jīng)氣管墮入的異物多進(jìn)入右主支氣管。支氣管和氣管還有以區(qū)別就是，氣管是以“C"型的氣管軟骨為支架，而支氣管不是。成纖維細(xì)胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分，由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來。成纖維細(xì)胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu)，其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動旺盛，細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動，在一定條件下，它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化；成纖維細(xì)胞對不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的支氣管成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起；6h后細(xì)胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團(tuán)；細(xì)胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態(tài)，細(xì)胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細(xì)胞質(zhì)透明，細(xì)胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細(xì)胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀；細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。支氣管成纖維細(xì)胞在生理?xiàng)l件下的主要功能包括：構(gòu)造和維持組織的正常形態(tài)，合成和釋放細(xì)胞外基質(zhì)以及組織損傷后及時(shí)大量聚集修復(fù)損傷組織。
5.方法簡介：
實(shí)驗(yàn)室分離的采用膠原 - 胰聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
6.質(zhì)量檢測：
實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
7.培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%胰dan白
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
實(shí)驗(yàn)報(bào)告：
一、分離與培養(yǎng)： | 二、免疫熒光鑒定： |
| 1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min； |
操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
Artemin抗體 C型凝集結(jié)構(gòu)域家族6成員A封閉多肽
磷化微管相關(guān)蛋白抗體 腦納前體封閉多肽
GEN1蛋白抗體 肝癌缺失基因1/2封閉多肽
交叉蛋白1抗體 細(xì)胞周期蛋白依賴性激抑制劑2C封閉多肽
監(jiān)理蛋白抗體 乙醇脫氫1封閉多肽
FAM96B蛋白抗體 神經(jīng)元鈣結(jié)合相關(guān)蛋白EFCBP1封閉多肽
精子發(fā)生相關(guān)蛋白7抗體 毒蕈堿型乙酰受體封閉多肽
白介-17B受體抗體 6號染色體開放閱讀框201封閉多肽
鋅指蛋白101抗體 單氨氧化A+B封閉多肽
交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian G蛋白偶聯(lián)受體GPR85蛋白封閉多肽
鋅指蛋白828抗體 磷化神經(jīng)性舞蹈病蛋白封閉多肽
軟脂酰化磷蛋白Sprouty1抗體 味覺受體蛋白家族2亞基50封閉多肽
丙型肝炎病毒-NS4a抗體 磷化血清應(yīng)答因子封閉多肽
X染色體開放閱讀框6抗體 固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白裂解激活蛋白封閉多肽
緊密連接蛋白14抗體 NYNRIN封閉多肽
光導(dǎo)蛋白樣蛋白PDCL3抗體 KIAA1161蛋白封閉多肽
交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian 谷氧還蛋白/巰基轉(zhuǎn)移封閉多肽
軸突生長誘導(dǎo)因子3抗體 6號染色體開放閱讀框120封閉多肽
大鼠支氣管成纖維細(xì)胞L-英文名稱：L-GAlutamine（200 mM）100mL
L-丙酰胺-L-英文名稱：L-Alanyl-L-Glutamine (200mM)100mL
氫化英文名稱：氫化5g
嘌呤霉英文名稱：puromycin25mg
（還原型）英文名稱：5g
碳?xì)溻c溶液（7.5% ）iCell-01300英文名稱：Sodium bicarbonate100mL
胰島-轉(zhuǎn)鐵蛋白-硒添加劑英文名稱：（ITS-G）100X10mL
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