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小鼠卵泡膜細胞

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更新時間:2023-04-21 12:32:05瀏覽次數(shù):259

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 卵巢組織
小鼠卵泡膜細胞的相關(guān)產(chǎn)品:panc02+LUC小鼠胰腺癌細胞熒光標記小鼠細胞系1×106PT-67小鼠源基于MLV-10A1逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝細胞系小鼠細胞系1×106RAG小鼠腎腺癌細胞小鼠細胞系1×106RAW 264.7小鼠單核巨噬細胞白血病細胞小鼠細胞系1×106RAW 264.7+GFP小鼠單核巨噬細胞白血病細胞+GFP小鼠細胞系1×106

詳細介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

小鼠卵泡膜細胞

5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

卵巢組織

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自卵巢組織;卵巢是雌性動物的生殖器官,卵巢的功能是產(chǎn)生卵以及類固醇激素。卵巢的位置與睪丸相同,僅左側(cè)發(fā)育(右側(cè)已退化),呈葡萄狀,均為處于不同發(fā)育時期的卵泡,卵泡呈黃色,卵巢表面密布血管。卵巢的大小與年齡和產(chǎn)卵期有關(guān)。大多數(shù)脊椎動物有兩個卵巢,但是部分魚類的兩個卵巢融合為單個結(jié)構(gòu),而所有鳥類只有左側(cè)卵巢有機能。卵巢是位于子宮兩側(cè)的一對卵圓形的生殖器官,它的外表有一層上皮組織,其下方有薄層的結(jié)締組織。卵巢的內(nèi)部結(jié)構(gòu)可分為皮質(zhì)和髓質(zhì)。皮質(zhì)位于卵巢的周圍部分,主要由卵泡和結(jié)締組織構(gòu)成;髓質(zhì)位于中央,由疏松結(jié)締組織構(gòu)成,其中有許多血管、淋巴管和神經(jīng)。哺乳動物的卵巢內(nèi)卵泡的發(fā)育需要相關(guān)激素的調(diào)節(jié)才能完成,垂體促性素(卵泡刺激素和黃體生成素)使原始卵泡開始發(fā)育,其過程中還產(chǎn)生大量的雌激素。雌激素是卵巢的顆粒細胞和卵泡膜細胞在垂體促激素的作用下協(xié)同合成的,卵泡膜細胞合成的雄激素透過基膜進入顆粒細胞,并轉(zhuǎn)變?yōu)榇萍に?。因此,卵泡膜細胞在生殖?nèi)分泌調(diào)節(jié)中占有關(guān)鍵的位置,了解其在病理及生理中的作用,對于與性激素有關(guān)的婦產(chǎn)科疾病(如多囊卵巢綜合癥、卵巢癌等)的研究有著重要意義。在哺乳動物卵泡生長發(fā)育的過程中,卵母細胞由不斷增加的顆粒細胞層包裹。卵巢組織中的膜細胞作為卵泡的外層細胞可以維持卵泡結(jié)構(gòu)的完整性,參與構(gòu)成卵母細胞和顆粒細胞發(fā)育的微環(huán)境且為類固醇激素的生成提供底物。在哺乳動物中調(diào)節(jié)膜細胞類固醇激素生成的機制已見相關(guān)報道,但是有關(guān)卵泡膜細胞的聚集、生長和分化的研究尚不深入。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用先機械分離后膠原消化結(jié)合Percoll密度梯度離心法、并通過專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實驗室分離的經(jīng)3β-HSD免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態(tài)  成纖維細胞樣

傳代特性  可傳3代左右

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

糖皮質(zhì)激誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄蛋白1抗體 腦特異性血管生成抑制蛋白2封閉多肽 小鼠白介10(IL-10)ELISA試劑盒

微管相關(guān)蛋白輕鏈3C抗體 整合樣金屬與樣6蛋白封閉多肽 小鼠白介11(IL-11)試劑盒ELISA

英文名稱: HA Tag 補體C1q腫瘤壞死因子相關(guān)蛋白6封閉多肽 小鼠白介15(IL-15)ELISA檢測試劑盒

英文名稱: CD3 gamma 碳酐9封閉多肽 小鼠17羥皮質(zhì)類固醇(17-OHCS)elisa試劑盒

活化白細胞粘附分子抗體 α-s2酪蛋白封閉多肽 小鼠白介1α(IL-1α)試劑盒elisa

肥大細胞類糜1抗體 免疫球蛋白D重鏈保守區(qū)封閉多肽 小鼠白介2(IL-2)檢測試劑盒elisa

白細胞介-7受體a(CD127)抗體 G蛋白偶聯(lián)受體150封閉多肽 小鼠白介4(IL-4)ELISA試劑盒

角質(zhì)蛋白β抗體 NLE1蛋白封閉多肽 小鼠白介6(IL-6)試劑盒ELISA

β淀粉樣肽(31-35)/Aβ 31-35 抗體 電壓門控性鉀通道Kv1.6封閉多肽 小鼠白介9(IL-9)ELISA檢測試劑盒

英文名稱: Keratin 6 富含亮氨軟骨蛋白封閉多肽 小鼠苗條受體(LR/Ob-R)elisa試劑盒

微管相關(guān)蛋白2抗體 胰島樣生長因子2 mRNA 結(jié)合蛋白3封閉多肽 小鼠瘦(LEP)試劑盒elisa

核受體結(jié)合蛋白2抗體 著絲粒蛋白H封閉多肽 小鼠白血病抑制因子(LIF)檢測試劑盒elisa

人腫瘤抑制蛋白抗體 磷化絲裂原活化蛋白激MKK7封閉多肽 小鼠巨噬細胞炎性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)ELISA試劑盒

14-3-3τ蛋白抗體 β分泌封閉多肽 小鼠巨噬細胞炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)試劑盒ELISA

磷化粘著斑激抗體 接觸蛋白封閉多肽 小鼠基質(zhì)金屬2/明膠A(MMP-2/GelatinaseA)ELISA檢測試劑盒

Toll樣受體6抗體 PYROXD2蛋白封閉多肽 小鼠腺嘌呤二核苷磷(NADPH)elisa試劑盒

細胞角蛋白18單克隆抗體 甘油三磷脫氫1封閉多肽 鼠抗人D-泛(PantothenicAcid)單抗試劑盒elisa

英文名稱: phospho-SMAD5 (Ser463 + Ser465) 細胞粘附分子1封閉多肽 小鼠粘蛋白/粘液5B(MUC5B)檢測試劑盒elisa
小鼠卵泡膜細胞A375人惡性黑色瘤細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:A375細胞專用培養(yǎng)基125ML

A375人惡性黑色瘤細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:A375細胞專用培養(yǎng)基500ML

A375+EGFP人惡性黑色瘤+EGFP細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:A375+EGFP細胞專用培養(yǎng)基125ML

A375+EGFP人惡性黑色瘤+EGFP細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:A375+EGFP細胞專用培養(yǎng)基500ML

A431(A-431)人表皮癌細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:A431(A-431)細胞專用培養(yǎng)基125ML

A431(A-431)人表皮癌細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:A431(A-431)細胞專用培養(yǎng)基500ML

A498人腎癌細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:A498細胞專用培養(yǎng)基125ML

 


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