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人外周血巨噬細(xì)胞

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更新時間:2023-04-21 15:20:23瀏覽次數(shù):253

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 外周血
人外周血巨噬細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:人肝門靜脈成纖維細(xì)胞原代細(xì)胞5×105人結(jié)腸癌相關(guān)成纖維細(xì)胞原代細(xì)胞5×105人腎小管上皮細(xì)胞原代細(xì)胞5×105人腎小球系膜細(xì)胞原代細(xì)胞5×105人腎小球內(nèi)皮細(xì)胞原代細(xì)胞5×105

詳細(xì)介紹

1.png

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

人外周血巨噬細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

外周血

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡介:

分離自外周血;外周血是除骨髓之外的血液,臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細(xì)胞釋放到血液中,再在從血液中提取分離得到造血干細(xì)胞,我們把這樣得到的干細(xì)胞稱為外周血干細(xì)胞,在二十一世紀(jì)初人類開始的生命方舟計劃中提出外周血這一新概念。巨噬細(xì)胞屬免疫細(xì)胞,有多種功能,是研究細(xì)胞吞噬、細(xì)胞免疫和分子免疫學(xué)的重要對象。巨噬細(xì)胞較易獲得,便于培養(yǎng),并可進(jìn)行純化。巨噬細(xì)胞屬不繁殖細(xì)胞群,在條件適宜下可生活2-3周,多用做原代培養(yǎng),難以長期生存。巨噬細(xì)胞(Macrophages)是一種位于組織內(nèi)的白血球,源自單核細(xì)胞,而單核細(xì)胞又來源于骨髓中的前體細(xì)胞。巨噬細(xì)胞和單核細(xì)胞皆為吞噬細(xì)胞,在脊椎動物體內(nèi)參與非特異性防衛(wèi)(先天性免疫)和特異性防衛(wèi)(細(xì)胞免疫)。它們的主要功能是以固定細(xì)胞或游離細(xì)胞的形式對細(xì)胞殘片及病原體進(jìn)行噬菌作用(即吞噬以及消化),并激活淋巴球或其他免疫細(xì)胞,令其對病原體作出反應(yīng)。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用取外周血、通過密度梯度離心法、差速貼壁、細(xì)胞因子誘導(dǎo)法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實驗室分離的經(jīng)CD68免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、M-CSF、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  巨噬細(xì)胞樣

傳代特性   屬于終末分化細(xì)胞;屬于不增殖細(xì)胞群

消化液  12mM)

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

沉默調(diào)節(jié)相關(guān)蛋白4抗體 Toll樣受體2(CD282)封閉多肽 大鼠乙酰酯(AChE) ELISA試劑盒

MOSC2蛋白抗體 周期依賴激1封閉多肽 大鼠糖缺失性轉(zhuǎn)鐵蛋白(CDT) 試劑盒 ELISA

1號染色體開放閱讀框228抗體 激活受體-2封閉多肽 大鼠總膽汁(TBA) ELISA檢測試劑盒

8號染色體開放閱讀框30a抗體 MOBKL2A蛋白封閉多肽 大鼠β2微球蛋白(BMG/β2-MG)ELISA Kit

核突觸蛋白-α(N端)抗體 磷化肌肉型6磷果糖激/磷果糖激1封閉多肽 大鼠結(jié)合蛋白(RBP)ELISA試劑盒

三羧載體樣蛋白3抗體 2 Spike S1(P681H)突變多肽 大鼠促性腺激釋放激受體抗體(GNRHR-Ab)試劑盒 ELISA

肌側(cè)索硬化2染色體區(qū)域候選蛋白8抗體 效應(yīng)細(xì)胞受體1封閉多肽 大鼠血管性血友病因子裂解(ADAMTS13/vWF-cp)ELISA檢測試劑盒

神經(jīng)突觸相關(guān)蛋白SLITRK5抗體 磷化酪氨蛋白激受體B1封閉多肽 大鼠主要堿性蛋白(MBP) ELISA Kit

整合α11單克隆抗體 重組2 Spike突變蛋白RBD(L452R,E484Q)  大鼠嗜性粒細(xì)胞陽離子蛋白(ECP)ELISA試劑盒

生發(fā)中心激樣激抗體 乙型肝炎病毒X蛋白上調(diào)基因11封閉多肽 大鼠鈣調(diào)磷(CaN) 試劑盒 ELISA

免疫球蛋白μ鏈結(jié)合蛋白2抗體 鞘磷脂磷二酯4封閉多肽 大鼠抑制結(jié)合蛋白(INHBP)ELISA檢測試劑盒

自噬微管相關(guān)蛋白輕鏈3抗體 ENPP4蛋白封閉多肽 大鼠抗甲狀腺過氧化物抗體(TPO-Ab)ELISA Kit

嗅覺受體52E2抗體 金屬組織抑制因子-1封閉多肽 大鼠凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)ELISA試劑盒

12輕鏈抗體 磷化腎上腺能受體β2/β2-AR封閉多肽 大鼠抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體(dsDNA) 試劑盒 ELISA

同源盒蛋白C4抗體 絲氨抑制劑B10封閉多肽 大鼠堿性磷(ALP)ELISA檢測試劑盒

ZCCHC2蛋白抗體 重組人CD80蛋白 大鼠血管生成4(ANG-4)ELISA Kit

細(xì)胞周期蛋白依賴性激抑制蛋白3抗體 肌肉封閉多肽 大鼠脂多糖結(jié)合蛋白(LBP) ELISA試劑盒

9號染色體開放閱讀框93抗體 磷化p21激活激1/2封閉多肽 大鼠乙醇脫氫(ADH)試劑盒 ELISA
人外周血巨噬細(xì)胞兔胰島細(xì)胞英文名稱:兔胰島細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

兔垂體細(xì)胞英文名稱:兔垂體細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

兔胸腺上皮細(xì)胞英文名稱:兔胸腺上皮細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

兔胸腺基質(zhì)細(xì)胞英文名稱:兔胸腺基質(zhì)細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

兔頜下腺上皮細(xì)胞英文名稱:兔頜下腺上皮細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

兔腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞英文名稱:兔腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

兔腎上腺髓質(zhì)細(xì)胞英文名稱:兔腎上腺髓質(zhì)細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報告


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