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小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-23 10:14:01瀏覽次數(shù):256

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來源 骨髓
小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:MET-5A (人間皮細(xì)胞) (STR鑒定正確)1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶人瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶A2058 (人皮膚癌細(xì)胞) (STR鑒定正確)1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶人骨髓來源內(nèi)皮祖細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶小鼠口腔上皮細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

骨髓

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

分離自骨髓;骨髓是機(jī)體的造血組織,位于身體的許多骨骼內(nèi)。成年動(dòng)物的骨髓分兩種:紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細(xì)胞、血小板和各種白細(xì)胞。血小板有止血作用,白細(xì)胞能殺滅與抑制各種病原體,包括細(xì)菌、病毒等;某些淋巴細(xì)胞能制造抗體。因此,骨髓不但是造血器官,它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中,是一種海綿狀的組織,能產(chǎn)生血細(xì)胞的骨髓略呈紅色,稱為紅骨髓。出生時(shí),紅骨髓充滿全身骨髓腔,隨著年齡增大,脂肪細(xì)胞增多,相當(dāng)部分紅骨髓被黃骨髓取代,后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。骨髓基質(zhì)系統(tǒng)內(nèi)存在的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞是一種除造血干細(xì)胞以外的、具有高度自我更新能力和多向分化潛能的干細(xì)胞,可以向骨、軟骨、肌組織、皮膚、脂肪、神經(jīng)等多種組織分化,因此可以作為組織工程中的種子細(xì)胞。在骨髓中,BMSC占骨髓有核細(xì)胞總數(shù)的0.001%-0.1%,含量極低。骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的體外培養(yǎng)條件要求較高,在培養(yǎng)過程中,受貼壁時(shí)間、種植密度、血清含量、培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)基pH值等條件的影響。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用沖洗骨髓、密度梯度離心、差速貼壁法結(jié)合培養(yǎng)基篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)CD29、CD44免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  成纖維細(xì)胞樣

傳代特性  可傳2-3代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

NDST2蛋白抗體 細(xì)胞色b245輕鏈封閉多肽 

二肽氨基肽3抗體 成纖維細(xì)胞生長因子23封閉多肽 

過氧化活化增生受體γ單克隆抗體 補(bǔ)體C5β鏈封閉多肽 

受體酪氨激單克隆抗體 甘露聚糖結(jié)合凝集封閉多肽 

維甲早期轉(zhuǎn)錄1G蛋白抗體 GDP甘露糖焦磷化封閉多肽 

溶血磷脂?;D(zhuǎn)移β抗體 人乙肝病毒pre S1/S2蛋白封閉多肽 

DPY30蛋白抗體 附睪特異蛋白10封閉多肽 

鈣加壓2抗體 鋅指蛋白297封閉多肽 

蛋白激A2抗體 RAS相關(guān)GTP結(jié)合蛋白A封閉多肽 

白細(xì)胞介-10抗體 破傷風(fēng)毒輕鏈封閉多肽 

異質(zhì)核糖核蛋白A0抗體 干擾α-1b/IFN a1b封閉多肽 

磷化相似腫瘤抑制基因HUGL抗體 磷化細(xì)胞角蛋白18封閉多肽 

/葡萄糖協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗體 HORMAD1蛋白封閉多肽 

DNAJC1蛋白抗體 轉(zhuǎn)鐵蛋白封閉多肽 

G蛋白信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)因子8抗體 環(huán)腺苷應(yīng)答元件結(jié)合蛋白樣蛋白2封閉多肽 

ADP-核糖基化因子核苷交換蛋白100抗體 磷脂DDHD2封閉多肽 

跨膜蛋白Sema3C抗體?。ㄟM(jìn)口) 

造血干細(xì)胞特異性蛋白抗體 N-甲基嘌呤DNA糖基化 
小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞DMEM無糖(不含酚紅、鈉)500mL-

A-498細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4A-498細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持A-498細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含A-498細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于A-498細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

SCC-9 [SCC 9; SCC9]細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4SCC-9 [SCC 9; SCC9]細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持SCC-9 [SCC 9; SCC9]細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含SCC-9 [SCC 9; SCC9]細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于SCC-9 [SCC 9; SCC9]細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

大鼠冠狀動(dòng)脈成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基100mL大鼠冠狀動(dòng)脈成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持大鼠冠狀動(dòng)脈成纖維細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含大鼠冠狀動(dòng)脈成纖維細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于大鼠冠狀動(dòng)脈成纖維細(xì)胞的體外培養(yǎng)。本產(chǎn)品僅供進(jìn)一步科研使用,不得用于診斷、治療、臨床、家庭及其他用途。

人腦動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基100mL人腦動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持人腦動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含人腦動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于人腦動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

NCI-H1944細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4NCI-H1944細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持NCI-H1944細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含NCI-H1944細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于NCI-H1944細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

CTLA4 Ig-24細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4CTLA4 Ig-24細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持CTLA4 Ig-24細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含CTLA4 Ig-24細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于CTLA4 Ig-24細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

 


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