詳細介紹
規(guī)格參數(shù):
產(chǎn)品名稱 | 小鼠骨髓樹突狀細胞(未成熟DC細胞) |
組織來源 | 骨髓 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 |
4.細胞簡介:
分離自骨髓;骨髓是機體的造血組織,位于身體的許多骨骼內(nèi)。成年動物的骨髓分兩種:紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細胞、血小板和各種白細胞。血小板有止血作用,白細胞能殺滅與抑制各種病原體,包括細菌、病毒等;某些淋巴細胞能制造抗體。因此,骨髓不但是造血器官,它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中,是一種海綿狀的組織,能產(chǎn)生血細胞的骨髓略呈紅色,稱為紅骨髓。出生時,紅骨髓充滿全身骨髓腔,隨著年齡增大,脂肪細胞增多,相當(dāng)部分紅骨髓被黃骨髓取代,后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。骨髓DC細胞是由骨髓單核細胞誘導(dǎo)而成的;樹突狀細胞分為成熟樹突狀細胞和未成熟樹突狀細胞,典型的未成熟樹突狀細胞呈半貼壁生長,在GM-CSF、IL4的作用下形成葡萄串樣集落,細胞大而形態(tài)不規(guī)則,表面皺褶多,亦可見少量短刺狀突,胞內(nèi)細胞器豐富并可見吞噬泡,具有較強的遷移能力,伴隨有部分未誘導(dǎo)成的單核細胞,貼壁形態(tài)多樣。而成熟的樹突狀細胞由未成熟DC進一步經(jīng)TNFα、LPS等誘導(dǎo)而成,多數(shù)呈懸浮生長, 細胞呈圓形,細胞體積進一步增大,表面大量粗細不等的樹枝樣突起(高倍鏡或者電鏡下可觀察到 ),伴隨少量貼壁未成熟細胞或者單核細胞。未成熟DC細胞長時間培養(yǎng)也可能導(dǎo)致自發(fā)分化成熟。DC細胞尚無特異性細胞表面分子標志,主要通過形態(tài)學(xué)、組合性細胞表面標志、在混合淋巴細胞反應(yīng)中能激活初始T細胞等特征進行鑒定。其中成熟樹突狀細胞表面高表達主要組織相容性復(fù)合物(MHC)以及CD80、CD86等共刺激分子,進而激活T淋巴細胞,誘導(dǎo)免疫應(yīng)答,處于啟動、調(diào)控、并維持免疫應(yīng)答的中心環(huán)節(jié);未成熟樹突狀細胞具有很強的抗原攝取加工能力,但由于缺乏多種共刺激分子不能使初始T細胞活化、增殖產(chǎn)生免疫應(yīng)答,不能激活T細胞的第二信號,可導(dǎo)致T細胞無能,從而誘導(dǎo)免疫低反應(yīng)或抗原免疫特異性耐受。未成熟樹突狀細胞表面CD80、CD86、MHC-Ⅱ類分子等共刺激分子表達較低,一般在30%以下。
5.方法簡介:
實驗室分離的采用密度梯度離心法分離骨髓單個核細胞、培養(yǎng)過程添加細胞因子誘導(dǎo)而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
6.質(zhì)量檢測:
實驗室分離的經(jīng)CD86免疫熒光鑒定、細 胞 形態(tài)等綜合鑒定,純度可達80%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
7.培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 半貼半懸浮
細胞形態(tài) 圓形、梭形、多角形,形態(tài)多樣
傳代特性 屬于高度分化細胞;屬于不增殖細胞群
消化液 0.25%胰dan白
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
運輸和保存:
視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復(fù)蘇細胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復(fù)蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
收到如何處理:
1、首先,觀察培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請拍照,并及時與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。
2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3、仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。?、細胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細胞:若細胞生長密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細胞:將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時,若細胞密度超過80%,可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),補加培養(yǎng)基至5ml;若細胞密度未超過80%,將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作。
SHISA5蛋白抗體 9號染色體開放閱讀框43封閉多肽
CD24抗體 細胞周期調(diào)控相關(guān)蛋白1封閉多肽
三核苷重復(fù)蛋白6B抗體 細胞表面受體PILRβ封閉多肽
囊泡相關(guān)膜蛋白4抗體 異質(zhì)性核糖核蛋白M封閉多肽
肝表達抗菌肽2抗體 親環(huán)J封閉多肽
1號染色體開放閱讀框100抗體 半胱胺蛋白-13封閉多肽
磷化細胞分裂周期蛋白16抗體 跨膜蛋白TMED4封閉多肽
磷化信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子5a抗體 Jun激活區(qū)域-連接蛋白1封閉多肽
tRNA異亮氨連接抗體 維生D3受體封閉多肽
CD7抗體 磷化細胞分裂周期蛋白25B封閉多肽
肥大細胞表達膜蛋白1抗體 三磷腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運體3封閉多肽
英文名稱: Gibberellins PE標記雞卵白蛋白
大腦蛋白2抗體 載脂蛋白E封閉多肽
甲硫氨轉(zhuǎn)運RNA合成2抗體 褪黑受體1B封閉多肽
GRAM結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體 醛糖還原封閉多肽
英文名稱: Cytokeratin 15 磷化蛋白激C亞性D型封閉多肽
巨噬細胞炎癥蛋白-1γ抗體 FAM19A1蛋白封閉多肽
甲基化樣蛋白4抗體 FAM18B蛋白封閉多肽
小鼠骨髓樹突狀細胞(未成熟DC細胞)大鼠肝外膽管上皮細胞培養(yǎng)基100mL大鼠肝外膽管上皮細胞培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持大鼠肝外膽管上皮細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含大鼠肝外膽管上皮細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于大鼠肝外膽管上皮細胞的體外培養(yǎng)。
DMEM低糖 (含L-丙氨酰-L-,不含鈉)500mL-
SW 1990細胞專用培養(yǎng)基(L15)125mL×4SW 1990細胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持SW 1990細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含SW 1990細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于SW 1990細胞的體外培養(yǎng)。
293E細胞專用培養(yǎng)基125mL×4293E細胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持293E細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含293E細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于293E細胞的體外培養(yǎng)。
大鼠食管平滑肌細胞培養(yǎng)基100mL大鼠食管平滑肌細胞培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持大鼠食管平滑肌細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含大鼠食管平滑肌細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于大鼠食管平滑肌細胞的體外培養(yǎng)。
M199(含HEPES)500mL-
RK1細胞專用培養(yǎng)基125mL×4RK1細胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持RK1細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含RK1細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于RK1細胞的體外培養(yǎng)。