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小鼠滋養(yǎng)層干細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-21 16:34:33瀏覽次數(shù):215

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來源 胎盤組織
小鼠滋養(yǎng)層干細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:小鼠DC細(xì)胞原代細(xì)胞1×106小鼠NK細(xì)胞原代細(xì)胞1×106小鼠內(nèi)皮祖細(xì)胞原代細(xì)胞5×105小鼠脾基質(zhì)細(xì)胞原代細(xì)胞5×105小鼠脾源性內(nèi)皮祖細(xì)胞原代細(xì)胞5×105

詳細(xì)介紹

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡介:

分離自胎盤組織;胎盤(placenta)是哺乳動(dòng)物妊娠期間由胚胎的胚膜和母體子宮內(nèi)膜聯(lián)合長成的母子間交換物質(zhì)的過渡性器官,由羊膜、葉狀絨毛膜和底蛻膜構(gòu)成。胎兒在子宮中發(fā)育,依靠胎盤從母體取得營養(yǎng),而雙方保持相當(dāng)?shù)莫?dú)立性。胎盤還產(chǎn)生多種維持妊娠的激素,是一個(gè)重要的內(nèi)分泌器官。有些爬行類和魚類也以胎生方式繁殖后代,胚胎生長出一些輔助結(jié)構(gòu)如卵黃囊、鰓絲等與母體組織緊密結(jié)合,以達(dá)到母子間物質(zhì)的交換,這樣的結(jié)構(gòu)稱假胎盤。滋養(yǎng)層干細(xì)胞是胎盤組織細(xì)胞的祖細(xì)胞,與胚胎著床和胎盤的形成密切相關(guān)。胚胎著床和胎盤形成是母體與胎兒建立聯(lián)系的關(guān)鍵時(shí)期,此時(shí)期滋養(yǎng)層細(xì)胞增殖速度快,滋養(yǎng)層干細(xì)胞自我更新和分化旺盛,與多種妊娠相關(guān)疾病的發(fā)生、發(fā)展及其增殖、功能調(diào)節(jié)的失常有密切關(guān)系。在哺乳動(dòng)物胚胎發(fā)育過程中,胚胎細(xì)胞第一次分化形成內(nèi)細(xì)胞團(tuán)和滋養(yǎng)外胚層。滋養(yǎng)層干細(xì)胞是胎盤細(xì)胞的前體細(xì)胞,在胎盤發(fā)育中有重要作用。

5.方法簡介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用囊胚組織貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)HLA-E(白細(xì)胞抗原)免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  成纖維細(xì)胞樣

傳代特性  可傳2-3代左右

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

小鼠滋養(yǎng)層干細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

胎盤組織

1.png

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大?。?/span>
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

肌鈣蛋白C2抗體 LRRC39蛋白封閉多肽 

GADD153抗體 EHBP1L1蛋白封閉多肽 

磷化cGMP依賴性蛋白激1抗體 黑色瘤相關(guān)抗原/黑色-A封閉多肽 

FAM116A蛋白抗體 突觸相關(guān)蛋白97封閉多肽 

內(nèi)皮-1抗體 硫轉(zhuǎn)移pi封閉多肽 

胍基乙N甲基轉(zhuǎn)移抗體 FAM90A27P封閉多肽 

肌球蛋白9B抗體 鈉鉀ATP通道蛋白(內(nèi)參)封閉多肽 

G蛋白偶聯(lián)受體149抗體 葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白5封閉多肽 

線粒體轉(zhuǎn)錄終止因子2抗體 磷化酪氨蛋白激BTK封閉多肽 

ATP依賴解螺旋ETL1抗體 干擾α17封閉多肽 

熱休克蛋白J1抗體 Mob1同源蛋白MOBKL2C封閉多肽 

神經(jīng)營養(yǎng)因子1/B淋巴細(xì)胞刺激因子3抗體 9號染色體開放閱讀框174封閉多肽 

螺旋環(huán)螺旋轉(zhuǎn)錄因子HATH6抗體 3號染色體開放閱讀框23封閉多肽 

多腺苷二磷多聚PARP11抗體 晚期糖基化終末產(chǎn)物特異性受體封閉多肽 

英文名稱: PDP1 身材矮小同源盒基因SHOX2封閉多肽 

轉(zhuǎn)運(yùn)體樣蛋白4 NBPF6蛋白封閉多肽 

磷化熱休克因子1抗體 甲基化樣蛋白9封閉多肽 

視錐感光細(xì)胞環(huán)磷鳥苷門控通道蛋白CNG3抗體 巨噬細(xì)胞炎性蛋白15 
小鼠滋養(yǎng)層干細(xì)胞人小腸平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基100mL人小腸平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持人小腸平滑肌細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含人小腸平滑肌細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于人小腸平滑肌細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

RTE細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4RTE細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持RTE細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含RTE細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于RTE細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

HCC1937細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4HCC1937細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持HCC1937細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含HCC1937細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于HCC1937細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

M-07e細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4M-07e細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持M-07e細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含M-07e細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于M-07e細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

U251細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4U251細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持U251細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含U251細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于U251細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

PL45細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4PL45細(xì)胞專用培養(yǎng)由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持PL45細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含PL45細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于PL45細(xì)胞的體外培養(yǎng)。本產(chǎn)品僅供進(jìn)一步科研使用,不得用于診斷、治療、臨床、家庭及其他用途。

兔肺大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基100mL兔肺大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持兔肺大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含兔肺大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于兔肺大動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞的體外培養(yǎng)。
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

 


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