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小鼠腮腺細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-21 13:05:41瀏覽次數(shù):256

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來源 腮腺組織
小鼠腮腺細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:ECV-304人膀胱癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基125MLECV-304人膀胱癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500MLEJ-1[EJ1]人膀胱癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基125MLEJ-1[EJ1]人膀胱癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500MLES-2人卵巢透明癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基125ML

詳細(xì)介紹

1.png

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

小鼠腮腺細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

腮腺組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

分離自腮腺組織;腮腺是哺乳類動(dòng)物口腔中位于下頜角處的大唾液腺,位于外耳道的前下方,下頜后窩內(nèi)及下頜支的深面。腮腺也是某些無尾目動(dòng)物頸部有毒皮膚腺的聚集體;唾液腺有3對(duì),腮腺、舌下腺和頜下腺,其中大的一對(duì)是腮腺。腮腺細(xì)胞是高度分化的上皮源性細(xì)胞,是一種營(yíng)養(yǎng)需要復(fù)雜、在一般合成培養(yǎng)基中不易生長(zhǎng),體外培養(yǎng)比較困難。目前,DMEM培養(yǎng)液被認(rèn)為較適于腺細(xì)胞的培養(yǎng)。加入一定量的血清更有利于細(xì)胞的生長(zhǎng)、增殖與分化。另外,接種的細(xì)胞密度也是培養(yǎng)成功的關(guān)鍵因素之一,尤其是在腺細(xì)胞這種單層細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),接種的細(xì)胞總數(shù)量和生長(zhǎng)基質(zhì)表面的細(xì)胞密度對(duì)整個(gè)細(xì)胞的生長(zhǎng)均有影響。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用膠原-胰dan白聯(lián)合消化后差速貼壁,結(jié)合上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)PCK免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  梭形、多角形

傳代特性  不建議傳代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大?。?/span>
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

磷化細(xì)胞核因子p50/k基因結(jié)合核因子抗體 自噬效應(yīng)蛋白Beclin 1封閉多肽 大鼠新生甲狀腺(NN-T4)ELISA試劑盒

DNA引物抗體 熱休克蛋白70樣蛋白封閉多肽 大鼠胰島(INS)試劑盒ELISA

中性粒細(xì)胞彈性ELANE抗體 高分子量神經(jīng)絲蛋白封閉多肽 大鼠C肽(C-Peptide)ELISA檢測(cè)試劑盒

FITM1蛋白抗體 突觸核膜蛋白2封閉多肽 大鼠絨毛膜促性腺激(CG)elisa試劑盒

脂聯(lián)受體1抗體 GPN2蛋白封閉多肽 大鼠促黃體激(LH)試劑盒elisa

p38調(diào)節(jié)/激活蛋白激抗體 降鈣封閉多肽 大鼠抗心肌抗體(AMA)檢測(cè)試劑盒elisa

整合αL抗體 絲氨/蘇氨蛋白激31封閉多肽 大鼠抗中性粒/中心體抗體(ACA)ELISA試劑盒

Klotho多肽蛋白抗體 KIAA1522蛋白封閉多肽 大鼠磷脂酰肌醇抗體IgG/IgM(PIAb-IgG/IgM)試劑盒ELISA

胎兒阿茲海默病抗原/核小體重塑因子抗體 唾液轉(zhuǎn)移8D封閉多肽 大鼠復(fù)合前列腺特異性抗原(CPSA)ELISA檢測(cè)試劑盒

FUBP3單克隆抗體 鏈霉親和 大鼠胰(trypsin)elisa試劑盒

去整合樣金屬2抗體 NADH氧化還原輔4封閉多肽 大鼠β干擾(IFN-β/IFNB)試劑盒elisa

絲裂原活化蛋白激相關(guān)蛋白1抗體 雙氧化激活因子2封閉多肽 大鼠血小板因子3(PF-3)檢測(cè)試劑盒elisa

嗜乳脂蛋白2亞型A1抗體 金屬組織抑制因子-4封閉多肽 大鼠可溶性瘦受體(sLR)ELISA試劑盒

RAD51AP2蛋白抗體 慢性粒細(xì)胞白血病相關(guān)蛋白封閉多肽 大鼠窖蛋白Caveolin1(Cav-1)試劑盒ELISA

多肽N-乙酰氨基半乳糖轉(zhuǎn)移12抗體 MARCKS樣蛋白1封閉多肽 大鼠艾杜糖硫酯(IDS)ELISA檢測(cè)試劑盒

腺苷環(huán)化3抗體 電壓門控鉀通道Kv1.2封閉多肽 大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)elisa試劑盒

人微管相關(guān)蛋白Tau-4單克隆抗體 人A核蛋白封閉多肽 大鼠腫瘤壞死因子α(TNF-α)試劑盒elisa

英文名稱: phospho-c-Jun (Ser63) 富含脯氨蛋白9封閉多肽 大鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGF-β1)檢測(cè)試劑盒elisa
小鼠腮腺細(xì)胞NCI-H1299人非小肺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:NCI-H1299細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

NCI-H1299人非小肺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:NCI-H1299細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

NCI-H1395人肺腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:NCI-H1395細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

NCI-H1395人肺腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:NCI-H1395細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

NCI-H1437人肺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:NCI-H1437細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

NCI-H1437人肺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:NCI-H1437細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

NCI-H157人非小肺腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:NCI-H157細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML


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