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小鼠腎小管上皮細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-21 14:47:55瀏覽次數(shù):275

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來(lái)源 腎組織
小鼠腎小管上皮細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:UMR-106大鼠骨肉瘤細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500MLWalker/LLC-WRC 256大鼠腹水癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基125MLWalker/LLC-WRC 256大鼠腹水癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500MLBHK-21(C-13)倉(cāng)鼠腎成纖維細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基125MLBHK-21(C-13)倉(cāng)鼠腎成纖維細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500ML

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來(lái)源

小鼠腎小管上皮細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

腎組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

分離自腎組織;腎臟是機(jī)體的重要器官,它的基本功能是生成尿液,借以清除體內(nèi)代謝產(chǎn)物及某些廢物、毒物,同時(shí)經(jīng)重吸收功能保留水份及其他有用物質(zhì),如葡萄糖、蛋白質(zhì)、氨基酸、鈉離子、鉀離子、碳suan氫鈉等,以調(diào)節(jié)水、電解質(zhì)平衡及維護(hù)酸堿平衡。腎臟同時(shí)還有內(nèi)分泌功能,生成腎素、促紅細(xì)胞生成素、活性維生素D3、前列腺素、激肽等,又為機(jī)體部分內(nèi)分泌激素的降解場(chǎng)所和腎外激素的靶器官。腎臟的這些功能,保證了機(jī)體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定,使新陳代謝得以正常進(jìn)行。腎小管是機(jī)體腎臟器官上與腎小囊壁層相連的一條細(xì)長(zhǎng)上皮性小管,具有重吸收(reabsorption)和排泌作用。腎小管按不同的形態(tài)結(jié)構(gòu)、分布位置和功能分成近端小管、髓袢和遠(yuǎn)端小管三部分;近端小管可分為直部和曲部,曲部也稱為近曲小管,位于皮質(zhì)迷路內(nèi),于腎小體附近高度蟠曲;遠(yuǎn)端小管曲部也稱為遠(yuǎn)曲小管,位于皮質(zhì)迷路內(nèi)。腎小管上皮細(xì)胞是腎小管外面的一層細(xì)胞,腎小管上皮細(xì)胞的分離、培養(yǎng)是研究腎臟疾病的一項(xiàng)重要技術(shù),目前該細(xì)胞分離方法有分離法、化學(xué)分離法篩網(wǎng)分離法、顯微解剖分離法、流式細(xì)胞儀分離法等。腎小管上皮細(xì)胞主要功能:①腎小管上皮細(xì)胞重吸收原尿中幾乎全部的葡萄糖和氨基酸;②排泌非營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)進(jìn)入終尿;③細(xì)胞能分泌炎癥介質(zhì)如細(xì)胞因子和趨化因子,通過(guò)產(chǎn)生IL-8或直接趨化白細(xì)胞參與急性炎癥反應(yīng);④移植腎炎癥和新月體腎炎中PTEpiC表達(dá)IL-2R和MHC-Ⅱ類抗原,這說(shuō)明腎小管上皮細(xì)胞參與腎免疫損傷的發(fā)生。隨著對(duì)腎間質(zhì)纖維化機(jī)制研究的日漸加深,腎小管上皮細(xì)胞(RTECs)在其中的作用日益被人們重視。因此,提供良好的腎小管上皮細(xì)胞模型,在腎小管間質(zhì)疾病的發(fā)病機(jī)制和治療藥物篩選的研究中是非常重要的。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用先機(jī)械研磨過(guò)不銹鋼網(wǎng)篩分離得到腎小管、后用膠原消化,結(jié)合上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  上皮細(xì)胞樣

傳代特性  可傳1-2代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

細(xì)胞外基質(zhì)蛋白FRAS1抗體 艾滋病Rev結(jié)合蛋白2封閉多肽 人抗釀酒酵母抗體(ASCA) ELISA試劑盒

FbxL6蛋白抗體 血小板源性生長(zhǎng)因子C封閉多肽 人遲現(xiàn)抗原4(VLA4) 試劑盒 ELISA

F-box蛋白2抗體 重組黃熱病毒包膜糖蛋白E 人吖啶橙(AO)ELISA檢測(cè)試劑盒

生長(zhǎng)抑制因子1抗體 細(xì)胞增殖誘導(dǎo)蛋白5/肺癌相關(guān)蛋白10封閉多肽 人甲胺喋呤(MTX) ELISA Kit

煙堿型乙酰受體A2(神經(jīng)型)抗體 磷化高遷移率核小體結(jié)合蛋白1封閉多肽 人對(duì)氨基苯甲(PABA) ELISA試劑盒

RhoA抗體 重組人粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子3蛋白 人苯丙氨(LPA) 試劑盒 ELISA

結(jié)合蛋白4單克隆抗體 SUSD2蛋白封閉多肽 人免疫核糖核(Irna) ELISA檢測(cè)試劑盒

DNA結(jié)合蛋白C抗體 細(xì)胞周期末期促進(jìn)復(fù)合蛋白APC1封閉多肽 人β萘酚(β-Nph) ELISA Kit

交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian NT5C3樣蛋白封閉多肽 人β內(nèi)酰胺抑制劑(BLI) ELISA試劑盒

CD90抗體 重組小鼠白介4蛋白 人α半乳糖基抗體(Gal) 試劑盒 ELISA

磷化非受體酪氨激c-Abl抗體 接觸蛋白相關(guān)蛋白4封閉多肽 人αN已酰氨基葡糖苷(αNAG) ELISA檢測(cè)試劑盒

谷氨受體相關(guān)蛋白1抗體 胞嘧啶脫氨封閉多肽 人α2纖溶抑制物(α2-PI) ELISA Kit

反應(yīng)元件調(diào)節(jié)蛋白抗體 精子發(fā)生相關(guān)蛋白15封閉多肽 人腺嘌呤二核苷磷(NADPH) ELISA試劑盒

結(jié)合蛋白4單克隆抗體 重組人C反應(yīng)蛋白 人鈣粘蛋白相關(guān)的神經(jīng)受體1(CNR-1)試劑盒 ELISA

粘附分子JAML蛋白抗體 磷化熱休克蛋白70封閉多肽 人毛細(xì)血管擴(kuò)張性共濟(jì)失調(diào)突變基因(ATM)ELISA檢測(cè)試劑盒

PerCP-Cy5.5標(biāo)記小鼠抗人CD8單克隆抗體 Avi-Tag多肽 人芳香烴受體(AhR) ELISA Kit

乙二醛1抗體 食道癌抑制生長(zhǎng)蛋白封閉多肽 人特異性巨噬細(xì)胞武裝因子(SMAF) ELISA試劑盒

TUB蛋白抗體 妊娠相關(guān)血漿蛋白A2封閉多肽 人促有絲分裂因子(MF/MPF) 試劑盒 ELISA
小鼠腎小管上皮細(xì)胞大鼠神經(jīng)干細(xì)胞英文名稱:大鼠神經(jīng)干細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

大鼠腦血管成纖維細(xì)胞英文名稱:大鼠腦血管成纖維細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

大鼠DRG神經(jīng)元細(xì)胞英文名稱:大鼠DRG神經(jīng)元細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

大鼠下丘腦神經(jīng)元細(xì)胞英文名稱:大鼠下丘腦神經(jīng)元細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

大鼠背根神經(jīng)節(jié)細(xì)胞英文名稱:大鼠背根神經(jīng)節(jié)細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

大鼠三叉神經(jīng)星形膠質(zhì)細(xì)胞英文名稱:大鼠三叉神經(jīng)星形膠質(zhì)細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

大鼠脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞英文名稱:大鼠脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

 


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