詳細介紹
運輸和保存:
視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養(yǎng),如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿培養(yǎng)基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
規(guī)格參數(shù):
產(chǎn)品名稱 | 大鼠胚胎干細胞 |
組織來源 | 囊胚 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 |
4.細胞簡介:
分離自囊胚胚胎組織;胚胎干細胞(Embryonic stem cell,ESCs,簡稱ES、EK或ESC細胞)是早期胚胎(原腸胚期之前)或原始性腺中分離出來的一類細胞,它具有體外培養(yǎng)無限增殖、自我更新和多向分化的特性。無論在體外還是體內(nèi)環(huán)境,ES細胞都能被誘導分化為機體幾乎所有的細胞類型。進一步說,胚胎干細胞(ES細胞)是一種高度未分化細胞。它具有發(fā)育的全能性,能分化出成體動物的所有組織和器官,包括生殖細胞。ES細胞具有與早期胚胎細胞相似的形態(tài)結(jié)構(gòu),細胞核大,有一個或幾個核仁,胞核中多為常染色質(zhì),胞質(zhì)胞漿少,結(jié)構(gòu)簡單。體外培養(yǎng)時,細胞排列緊密,呈集落狀生長。用堿性磷酸染色,ES細胞呈棕紅色,而周圍的成纖維細胞呈淡黃色。細胞克隆和周圍存在明顯界限,形成的克隆細胞彼此界限不清,細胞表面有折光較強的脂狀小滴。細胞克隆形態(tài)多樣,多數(shù)呈島狀或巢狀。小鼠ES細胞的直徑7 微米~18 微米,豬、牛、羊ES細胞的顏色較深,直徑12 微米~18 微米。胚胎干細胞與普通細胞有顯著差別,有其特定的生長特性和特定的標志,例如堿性磷酸活性非常高,帶有胚胎階段特異性表面抗原( Stage- specific embryonic antigens,SSEA),人類胚胎干細胞還帶有高分子量的糖蛋白TRA1-60、TRA-1-81等標志,這些特性和標志均可以用于對胚胎干細胞進行鑒定,除此之外,胚胎干細胞還可以在體外傳代,并保持正常核型。在體外培養(yǎng)體系中加入分化抑制劑如白血病抑制因子( Leukaemia inhibitory factor,LF)或者在小鼠胚胎成纖維細胞飼養(yǎng)層(MEF)上培養(yǎng)時,胚胎干細胞都能呈克隆性增殖,長期保持核型正常和穩(wěn)定,凍存解凍也不影響不分化的特性。另外,胚胎干細胞還表現(xiàn)岀高水平端?;钚?,目前證明端粒與細胞衰老密切相關,多數(shù)成熟細胞的端粒活性都很低。這些都是胚胎干細胞與成熟細胞不同的重要特點,也可能是其復制生命期限遠比體細胞長的原因。
5.方法簡介:
實驗室分離的采用分離囊胚組織,去除胚胎透明帶、使用特制專用培養(yǎng)基篩選培養(yǎng),胰消化傳代純化制備而來,細胞總量約為5×105cells/瓶。
6.質(zhì)量檢測:
實驗室分離的經(jīng)Oct-4免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
7.培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含LIF、BMP、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 短梭形、多角形
傳代特性 可傳3-5代左右
消化液 0.025%胰dan白
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
收到如何處理:
1、首先,觀察培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請拍照,并及時與技術支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù))。
2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3、仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。⒓毎螒B(tài)、所用基礎培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù));建議細胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細胞:若細胞生長密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,預留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細胞:將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時,若細胞密度超過80%,可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),補加培養(yǎng)基至5ml;若細胞密度未超過80%,將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作。
FITC標記小鼠抗人CD19單克隆抗體 突觸受體相關蛋白43封閉多肽 大鼠1,3-βD葡葡糖苷(1,3-βD-Glu)ELISA試劑盒
叉頭蛋白P3抗體 磷脂酰絲氨脫羧PISD封閉多肽 大鼠可溶性血管內(nèi)皮細胞蛋白C受體(sEPCR)聯(lián)免疫分析大鼠可溶性血管內(nèi)皮細胞蛋白C受體(sEPCR)聯(lián)免疫分析體(sEPCR)試劑盒ELISA
尿苷二磷葡糖醛基轉(zhuǎn)移1A7抗體 神經(jīng)營養(yǎng)因子1/B淋巴細胞刺激因子3封閉多肽 大鼠CD30分子(CD30)ELISA檢測試劑盒
胃粘液抗體 DISC1 C端封閉多肽 大鼠E鈣黏蛋白/上皮鈣黏蛋白(E-Cad)elisa試劑盒
磷化組胺受體H1抗體 小核核糖核蛋白E封閉多肽 大鼠β細胞(BTC)試劑盒elisa
脫帽1A抗體 脈周蛋白1封閉多肽(胃癌抗原蛋白Ga50) 大鼠血管生成2(ANG-2)檢測試劑盒elisa
17號染色體開放閱讀框74抗體 HRC蛋白封閉多肽 大鼠血管生成1(ANG-1)ELISA試劑盒
磷化帕金蛋白抗體 肌相關蛋白1封閉多肽 大鼠血管生長(ANG)試劑盒ELISA
X染色體開放閱讀框66抗體 磷化酪蛋白激casein kinase Iα封閉多肽 大鼠角化細胞內(nèi)分泌因子(KAF)/雙調(diào)蛋白(AR)ELISA檢測試劑盒
磷化eIF4E結(jié)合蛋白抗體 鈣結(jié)合蛋白39封閉多肽 大鼠(cAMP)elisa試劑盒
骨堿性磷抗體 GRHL3蛋白封閉多肽 大鼠(cAMP)試劑盒elisa
半胱天冬-3原抗體 成纖維細胞生長因子21封閉多肽 大鼠白細胞活化黏附因子(ALCAM)檢測試劑盒elisa
核糖體S6蛋白激抗體 糖基轉(zhuǎn)移8結(jié)構(gòu)域1封閉多肽 大鼠白介9(IL-9)ELISA試劑盒
胱硫醚γ裂解抗體 重組人冠狀病毒HCoV-NL63核蛋白 大鼠巨噬細胞移動抑制因子(MIF)試劑盒ELISA
組織胺H4受體抗體 ZC3H13蛋白封閉多肽 大鼠轉(zhuǎn)化生長因子α(TGF-α)ELISA檢測試劑盒
細胞粘附分子CD112抗體 原癌基因M-ras封閉多肽 大鼠孕激/孕酮(PROG)elisa試劑盒
磷化周期依賴性激2抗體 肌肉骨骼受體酪氨激封閉多肽 大鼠雌激(E)試劑盒elisa
程序性死亡配體1(CD274)抗體 核仁磷蛋白2封閉多肽 大鼠血管內(nèi)皮細胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)檢測試劑盒elisa
大鼠胚胎干細胞MM.1S人多發(fā)性骨髓瘤細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:MM.1S細胞專用培養(yǎng)基500ML
MOLT-4人急性淋巴母白血病細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:MOLT-4細胞專用培養(yǎng)基125ML
MOLT-4人急性淋巴母白血病細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:MOLT-4細胞專用培養(yǎng)基500ML
MonoMac6人急性單核白血病細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:MonoMac6細胞專用培養(yǎng)基125ML
MonoMac6人急性單核白血病細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:MonoMac6細胞專用培養(yǎng)基500ML
MRC-5(有限人胚肺成纖維細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:MRC-5(有限細胞系)細胞專用培養(yǎng)基125ML
MRC-5(有限人胚肺成纖維細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:MRC-5(有限細胞系)細胞專用培養(yǎng)基500ML