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大鼠脊髓神經(jīng)干細胞

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更新時間:2023-04-21 13:42:05瀏覽次數(shù):281

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 脊髓組織
大鼠脊髓神經(jīng)干細胞的相關產(chǎn)品:MRC-5(有限人胚肺成纖維細胞專用培養(yǎng)基細胞培養(yǎng)基125MLMRC-5(有限人胚肺成纖維細胞專用培養(yǎng)基細胞培養(yǎng)基500MLMS751人子宮頸表皮癌細胞專用培養(yǎng)基細胞培養(yǎng)基125MLMS751人子宮頸表皮癌細胞專用培養(yǎng)基細胞培養(yǎng)基500MLMT-4人急性淋巴母白血病細胞專用培養(yǎng)基細胞培養(yǎng)基125ML

詳細介紹

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自脊髓組織;脊髓是細細的管束狀的神經(jīng)結(jié)構(gòu),位于脊柱的椎管內(nèi)且被脊椎保護;是源自腦的中樞神經(jīng)系統(tǒng)延伸部分。中樞神經(jīng)系統(tǒng)的細胞依靠復雜的聯(lián)系來處理傳遞信息。脊髓的主要功能是傳送腦與外周之間的神經(jīng)信息。人和脊椎動物中樞神經(jīng)系統(tǒng)的一部分,在椎管里面,上端連接延髓,兩旁發(fā)出成對的神經(jīng),分布到四肢、體壁和內(nèi)臟。脊髓的內(nèi)部有一個H形(蝴蝶型)灰質(zhì)區(qū),主要由神經(jīng)細胞構(gòu)成;在灰質(zhì)區(qū)周圍為白質(zhì)區(qū),主要由有髓神經(jīng)纖維組成;脊髓是許多簡單反射的中樞。脊髓兩旁發(fā)出許多成對的神經(jīng)(稱為脊神經(jīng))分布到全身皮膚、肌肉和內(nèi)臟器官。脊髓是周圍神經(jīng)與腦之間的通路,也是許多簡單反射活動的低級中樞。按脊神經(jīng)的出入可把脊髓也分為相應的31節(jié),31對脊神經(jīng)就是由不同的脊椎發(fā)出的。神經(jīng)干細胞是一類具有分裂潛能和自更新能力的母細胞,它可以通過不對等的分裂方式產(chǎn)生神經(jīng)組織的各類細胞。需要強調(diào)的是,在腦脊髓等所有神經(jīng)組織中,不同的神經(jīng)干細胞類型產(chǎn)生的子代細胞種類不同,分布也不同。神經(jīng)干細胞作為干細胞的一種,它具有其它所有干細胞的基本特征:具有自我維持和自我更新能力,具有多種分化潛能,具有分化為本系統(tǒng)大部分類型細胞的能力,這種自我更新和分化潛能可以維持相當長的時間甚至終生,對損傷和疾病具有反應能力。神經(jīng)干細胞在疾病、損傷狀態(tài)下具有增殖、遷移,并向神經(jīng)細胞、星形膠質(zhì)細胞和少突膠質(zhì)細胞分化的能力,已成為神經(jīng)系統(tǒng)損傷修復和再生研究的熱點,體外建立穩(wěn)定的神經(jīng)干細胞培養(yǎng)模型是其基礎和臨床應用的前提。神經(jīng)干細胞在培養(yǎng)3-4d后,可形成神經(jīng)球,神經(jīng)球在培養(yǎng)基中呈懸浮生長。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用胰dan白消化后差速貼壁,結(jié)合神經(jīng)干細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實驗室分離的經(jīng)干細胞經(jīng)Nestin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  B-27 Supplement、EGF、bFGF、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  懸浮

細胞形態(tài)  球形

傳代特性  可傳2-3代

消化液  0.25%胰dan白,Accutase

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

大鼠脊髓神經(jīng)干細胞

5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

脊髓組織

1.png

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大?。?/span>
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

卵黃樣羧肽抗體 磷化細胞外信號調(diào)節(jié)激5封閉多肽 人抗甲型肝炎病毒(HAV)抗體ELISA試劑盒

生長激誘導跨膜蛋白抗體 同源盒蛋白A1封閉多肽 人抗基底節(jié)(BG)自身抗體試劑盒ELISA

1號染色體開放閱讀框185抗體 T細胞淋巴瘤浸潤和轉(zhuǎn)移蛋白2封閉多肽 人抗肌內(nèi)膜抗體(EMA)(IgA)ELISA檢測試劑盒

英文名稱: CD47 鋅指蛋白346封閉多肽 人抗肌內(nèi)膜(EMA)抗體(IgG)ELISA試劑盒

組蛋白去甲基化JARID1A抗體 補體C9a封閉多肽 人抗肌集鈣蛋白抗體(IgG)試劑盒ELISA

膠原蛋白6α2抗體 HS6ST2蛋白封閉多肽 人抗黃體生成抗體(Anti LH Ab)檢測試劑盒elisa

轉(zhuǎn)導β1X連鎖蛋白抗體 ELAVL1封閉多肽 人抗環(huán)胍氨肽(CCP)抗體ELISA試劑盒

磷化染色體結(jié)構(gòu)維持蛋白質(zhì)1抗體 鋅指蛋白182封閉多肽 人抗琥珀脫氫黃亞單位抗體(IgG)試劑盒ELISA

基質(zhì)金屬-1抗體 重組人血管內(nèi)皮生長因子受體1蛋白 人抗呼吸道合胞病毒抗體(RSV IgM)ELISA檢測試劑盒

Bloom綜合征相關蛋白抗體 單加氧X封閉多肽 人抗呼吸道合胞病毒(RSV)抗體ELISA試劑盒

G蛋白激活內(nèi)向鉀通道5抗體 核相關精子蛋白N2封閉多肽 人抗呼吸道合胞病毒(RSV)抗體(IgG)試劑盒ELISA

前列腺分泌蛋白抗體 GalNAc-T7蛋白封閉多肽 人抗核周因子(APF)抗體檢測試劑盒elisa

L12R1蛋白抗體 線粒體核糖體蛋白L40封閉多肽 人抗弓形體(tox)抗體(IgM)ELISA試劑盒

轉(zhuǎn)化生長因子β1結(jié)合蛋白1抗體 細胞骨架銜接蛋白BIN3封閉多肽 人抗弓形體(tox)抗體(IgG)試劑盒ELISA

交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian 細胞色C氧化蛋白7A2封閉多肽 人抗肝PF4復合物抗體/HIT抗體-IgM(HIT)ELISA檢測試劑盒

鉀離子通道蛋白家族成員4抗體 脊髓小腦共濟失調(diào)10封閉多肽 人抗甘氨酰tRNA合成(GARS)抗體ELISA試劑盒

細胞角蛋白36抗體 5-羥色胺受體1F封閉多肽 人抗副流感病毒IgM抗體(anti-PIV IgM)試劑盒ELISA

跨膜蛋白74抗體 FGD6蛋白封閉多肽 人抗副流感病毒IgG抗體(anti-PIV IgG)檢測試劑盒elisa
大鼠脊髓神經(jīng)干細胞MLE-12小鼠肺上皮細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:MLE-12細胞專用培養(yǎng)基500ML

MS1小鼠胰島內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:MS1細胞專用培養(yǎng)基125ML

MS1小鼠胰島內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:MS1細胞專用培養(yǎng)基500ML

MOVAS小鼠主動脈血管平滑肌細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:MOVAS細胞專用培養(yǎng)基125ML

MOVAS小鼠主動脈血管平滑肌細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:MOVAS細胞專用培養(yǎng)基500ML

MPC-5小鼠腎足細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:MPC-5細胞專用培養(yǎng)基125ML

MPC-5小鼠腎足細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:MPC-5細胞專用培養(yǎng)基500ML
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

 


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