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大鼠小腸黏膜上皮細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-21 13:41:39瀏覽次數(shù):265

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來源 小腸組織
大鼠小腸黏膜上皮細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:MM.1S人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500MLMOLT-4人急性淋巴母白血病細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基125MLMOLT-4人急性淋巴母白血病細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500MLMonoMac6人急性單核白血病細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基125MLMonoMac6人急性單核白血病細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500ML

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

大鼠小腸黏膜上皮細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

小腸組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

分離自小腸組織;小腸位于腹中,上端接幽門與胃相通,下端通過闌門與大腸相連,是食物消化吸收的主要場(chǎng)所。小腸盤曲于腹腔內(nèi),上連胃幽門,下接盲腸,分為十二指腸、空腸和回腸三部分。小腸內(nèi)消化是至關(guān)重要的,因?yàn)槭澄锝?jīng)過小腸內(nèi)胰液、膽汁和小腸液的化學(xué)性消化及小腸運(yùn)動(dòng)的機(jī)械性消化后,基本上完成了消化過程,同時(shí)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)被小腸黏膜吸收了。小腸管壁由黏膜、黏膜下層、肌層和漿膜構(gòu)成。其結(jié)構(gòu)特點(diǎn)是管壁有環(huán)形皺襞,黏膜有許多絨毛,絨毛根部的上皮下陷至固有層,形成管狀的腸腺,其開口位于絨毛根部之間。絨毛和腸腺與小腸的消化和吸收功能關(guān)系密切;構(gòu)成腸腺的細(xì)胞有柱狀細(xì)胞、杯狀細(xì)胞、潘氏細(xì)胞和未分化細(xì)胞。柱狀細(xì)胞和內(nèi)分泌細(xì)胞與絨毛上皮相似,接近絨毛的柱狀細(xì)胞與吸收細(xì)胞相似,絨毛深部的柱狀細(xì)胞微絨毛少而短,不形成紋狀緣。小腸有三種功能即消化、吸收和分泌及運(yùn)動(dòng)功能,其中以吸收和分泌功能為主。平滑肌細(xì)胞的收縮是負(fù)責(zé)腸蠕動(dòng)的動(dòng)力,促使食物向下運(yùn)動(dòng)。腸黏膜上皮細(xì)胞是機(jī)體內(nèi)外環(huán)境的重要屏障,持續(xù)暴露于大量抗原中,也是機(jī)體面對(duì)病原微生物的第一道防線。因此,腸黏膜上皮細(xì)胞除有吸收、分泌和轉(zhuǎn)運(yùn)等重要生理功能之外,在黏膜先天性和獲得性免疫防御機(jī)制中也起著重要作用。腸黏膜上皮細(xì)胞作為首先接觸抗原的細(xì)胞,在黏膜免疫反應(yīng)的起始階段發(fā)揮關(guān)鍵作用,它決定黏膜免疫反應(yīng)的發(fā)生、性質(zhì)和強(qiáng)度。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用先機(jī)械分離法、后膠原消化法并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  上皮細(xì)胞樣

傳代特性  可傳1-2代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

豬瘟病毒抗體 DMRT2蛋白封閉多肽 人抗連接IgG抗體ELISA試劑盒

線粒體核糖體蛋白L52抗體 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白亞基6封閉多肽 人抗利尿激V2受體/精氨加壓受體2(AVPR2)試劑盒ELISA

8號(hào)染色體開放閱讀框33抗體 植物血球凝集(PHA) 人抗類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎核抗原抗體(RANA)ELISA檢測(cè)試劑盒

磷化微管相關(guān)蛋白抗體 膜相關(guān)蛋白Numb封閉多肽 人抗狼瘡抗凝抗體(IgG)ELISA試劑盒

囊性組織液體蛋白15抗體 磷化δ連環(huán)蛋白封閉多肽 人抗蘭尼堿受體鈣釋放通道抗體試劑盒ELISA

脫氧核糖核γ抗體 鋅指蛋白141封閉多肽 人抗狂犬病毒(RV)抗體檢測(cè)試劑盒elisa

SH2結(jié)構(gòu)域蛋白D4A抗體 補(bǔ)體C5封閉多肽 人抗狂犬病毒(RV)抗體(IgM)ELISA試劑盒

SH2結(jié)構(gòu)域接頭蛋白B抗體 磷化鉀通道蛋白DRK1封閉多肽 人抗狂犬病毒(RV)抗體(IgG)試劑盒ELISA

交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian 范可尼綜合征相關(guān)蛋白FAN1封閉多肽 人抗可溶性肝抗原抗體(SLA)ELISA檢測(cè)試劑盒

LIM同源框蛋白1抗體 1號(hào)染色體開放閱讀框55封閉多肽 人抗菌肽LL-37 ELISA試劑盒

GPROPDR蛋白抗體 磷化Bcl-xL蛋白封閉多肽 人抗菌肽(CAMP)試劑盒ELISA

APC-Cy7標(biāo)記小鼠抗人CD4單克隆抗體 葡萄糖苷木糖基轉(zhuǎn)移2封閉多肽 人抗菌肽(Attacin)檢測(cè)試劑盒elisa

交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian 細(xì)胞分裂周期蛋白16封閉多肽 人抗巨細(xì)胞病毒(CMV)抗體(IgM)ELISA試劑盒

激活受體3抗體 泛連接NEDD4結(jié)合蛋白2樣蛋白2封閉多肽 人抗巨細(xì)胞病毒(CMV)抗體(IgG)試劑盒ELISA

NSUN5P2蛋白抗體 信號(hào)通路Wnt16封閉多肽 人抗巨噬細(xì)胞抗體(anti-macrophage Ab)ELISA檢測(cè)試劑盒

SAMD11蛋白抗體 腫瘤壞死因子-α/TNFα封閉多肽 人抗角蛋白抗體ELISA試劑盒

上皮鈣粘附分子抗體 9號(hào)染色體開放閱讀框169封閉多肽 人抗甲型肝炎病毒抗體IgM(anti-HAV IgM)試劑盒ELISA

固醇攜帶蛋白2抗體 氧氣調(diào)節(jié)蛋白150封閉多肽 人抗甲型肝炎病毒抗體IgG(anti-HAV IgG)檢測(cè)試劑盒elisa
大鼠小腸黏膜上皮細(xì)胞MEF(絲裂霉C處理)小鼠胚胎成纖維細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:MEF(絲裂霉C處理)細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

MEF(絲裂霉C處理)小鼠胚胎成纖維細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:MEF(絲裂霉C處理)細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

MFC小鼠前胃癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:MFC細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

MFC小鼠前胃癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:MFC細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

MH-S小鼠肺泡巨噬細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:MH-S細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

MH-S小鼠肺泡巨噬細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:MH-S細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

MLE-12小鼠肺上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:MLE-12細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

 


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