大鼠視網(wǎng)膜色素上皮細胞

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產(chǎn)品屬性：

商品詳細介紹：

4.細胞簡介：

分離自視網(wǎng)膜組織；視網(wǎng)膜居于眼球壁的內(nèi)層，是一層透明的薄膜。視網(wǎng)膜由色素上皮層和視網(wǎng)膜感覺層組成，兩層間在病理情況下可分開，稱為視網(wǎng)膜脫離。色素上皮層與脈絡(luò)膜緊密相連，由色素上皮細胞組成，它們具有支持和營養(yǎng)光感受器細胞、遮光、散熱以及再生和修復(fù)等作用。組織學(xué)上視網(wǎng)膜分為10層，由外向內(nèi)分別為：色素上皮層、視錐、視桿細胞層、外界膜、外顆粒層、外叢狀層、內(nèi)顆粒層、內(nèi)叢狀層、神經(jīng)節(jié)細胞層、神經(jīng)纖維層、內(nèi)界膜。視網(wǎng)膜內(nèi)層為襯于血管膜內(nèi)面的一層薄膜，有感光作用；后部鼻側(cè)有一視神經(jīng)乳頭。視網(wǎng)膜上的感覺層是由三個神經(jīng)元組成。第一神經(jīng)元是視細胞層，專司感光，它包括錐細胞和桿細胞。視桿細胞主要在離中心凹較遠的視網(wǎng)膜上，而視錐細胞則在中心凹處多。第二層叫雙節(jié)細胞，約有10到數(shù)百個視細胞通過雙節(jié)細胞與一個神經(jīng)節(jié)細胞相聯(lián)系，負(fù)責(zé)聯(lián)絡(luò)作用。第三層叫節(jié)細胞層，專管傳導(dǎo)。視網(wǎng)膜是一層菲薄的但又非常復(fù)雜的結(jié)構(gòu)，它貼于眼球的后壁部，傳遞來自視網(wǎng)膜感受器沖動的神經(jīng)纖維跨越視網(wǎng)膜表面，經(jīng)由視神經(jīng)到達出口。視網(wǎng)膜的分辨力是不均勻的，在黃斑區(qū)，其分辨能力強。視網(wǎng)膜色素上皮(RPE)位于脈絡(luò)膜和光感受器細胞外節(jié)之間，是視網(wǎng)膜下腔和脈絡(luò)膜血管之間的離子、水、營養(yǎng)物質(zhì)和代謝終產(chǎn)物轉(zhuǎn)運通道；主要是由單層色素上皮細胞所構(gòu)成，排列十分規(guī)則。視網(wǎng)膜色素上皮參與循環(huán)，吞噬脫落的光感受器細胞外節(jié)以維持光感受器細胞興奮性，并分泌多種生長因子，幫助維持脈絡(luò)膜血管內(nèi)皮細胞和光感受器細胞的結(jié)構(gòu)完整性。細胞呈多角形，細胞分為三部分，即頂部、體部和基底部。視網(wǎng)膜色素上皮細胞無再生能力，細胞死亡后不被替換，而是鄰近的細胞向側(cè)面滑動，以填補死亡細胞遺留下來的空間。視網(wǎng)膜色素上皮位于脈絡(luò)膜和光感受器細胞外節(jié)之間，是視網(wǎng)膜下腔和脈絡(luò)膜血管之間的離子、水、營養(yǎng)物質(zhì)和代謝終產(chǎn)物轉(zhuǎn)運通道。視網(wǎng)膜色素上皮參與循環(huán)，吞噬脫落的光感受器細胞外節(jié)以維持光感受器細胞興奮性，并分泌多種生長因子，幫助維持脈絡(luò)膜血管內(nèi)皮細胞和光感受器細胞的結(jié)構(gòu)完整性。

5.方法簡介：

實驗室分離的采用胰dan白-膠原混合消化法結(jié)合差速貼壁法，并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測：

實驗室分離的經(jīng)PCK免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基  含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    每2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態(tài)  上皮細胞樣

傳代特性  可傳1-2代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相：空氣，95%；CO2，5%

操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

實驗報告：

HLA-DR抗體　內(nèi)臟異位相關(guān)蛋白/鋅指蛋白203封閉多肽　

磷化細胞核因子/k基因結(jié)合核因子p100抗體　GTPIMAP家族成員1封閉多肽　

酪氨蛋白激B3抗體　叉頭蛋白F2封閉多肽　

γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽2重鏈抗體　磷化促凋亡Bik蛋白封閉多肽　

鋅指蛋白321B抗體　精子成熟相關(guān)蛋白BOULE封閉多肽　

組織相容性復(fù)合體蛋白2反式激活因子抗體　胞漿蘋果1封閉多肽　

整合β6/Integrin β6抗體　染色體相關(guān)蛋白2封閉多肽　

線粒體鐵轉(zhuǎn)運蛋白2抗體　絲氨/蘇氨蛋白激Nek11封閉多肽　

成纖維細胞生長因子17抗體　FITM2蛋白封閉多肽　

DZANK1蛋白抗體　Kelch樣蛋白17封閉多肽　

G蛋白偶聯(lián)受體激6抗體　波形蛋白封閉多肽　

BEND4蛋白抗體　4號染色體開放閱讀框3封閉多肽　

鋅指脂蛋白-1b抗體　COPS9蛋白封閉多肽　

羥磺基轉(zhuǎn)移2抗體　異質(zhì)核糖核蛋白H封閉多肽　

血小板反應(yīng)蛋白2/敏感蛋白2抗體　KIAA0701蛋白封閉多肽　

磷化蛋白酪氨激JAK-3抗體　磷化γ氨基丁γ2受體封閉多肽　

自主生長因子GFI1抗體　視網(wǎng)膜色上皮細胞特異性蛋白65封閉多肽　

嗅覺受體5L2抗體　神經(jīng)突觸13封閉多肽　
大鼠視網(wǎng)膜色素上皮細胞人卵巢成纖維細胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

人臍帶血造血干細胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

人子宮平滑肌細胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

小鼠前列腺上皮細胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

大鼠牙齦成纖維細胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

大鼠真皮微血管內(nèi)皮細胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

HTR-8/Svneo (人絨毛膜滋養(yǎng)層細胞) RPMI-1640＋5% FBS＋1% P/S1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶