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小鼠膀胱移行上皮細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-21 16:34:12瀏覽次數(shù):252

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來源 皮膚組織
小鼠膀胱移行上皮細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:小鼠中耳上皮細(xì)胞原代細(xì)胞5×105小鼠肌腱干細(xì)胞原代細(xì)胞5×105小鼠肌腱細(xì)胞原代細(xì)胞5×105小鼠椎體終板軟骨干細(xì)胞原代細(xì)胞5×105小鼠骨髓基質(zhì)干細(xì)胞原代細(xì)胞5×105

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

小鼠膀胱移行上皮細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

膀胱組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡介:

分離自膀胱組織;膀胱是一個(gè)儲(chǔ)尿器官,在哺乳類動(dòng)物,它是由平滑肌組成的一個(gè)囊形結(jié)構(gòu),位于骨盆內(nèi),其后端開口與尿道相通。膀胱與尿道的交界處有括約肌,可以控制尿液的排出。膀胱壁由三層組織組成,由內(nèi)向外為黏膜層、肌層和外膜。肌層由平滑肌纖維構(gòu)成,稱為逼尿肌,逼尿肌收縮,可使膀胱內(nèi)壓升高,壓迫尿液由尿道排出。在膀胱與尿道交界處有較厚的環(huán)形肌,形成尿道內(nèi)括約肌。在括約肌收縮能關(guān)閉尿道內(nèi)口,防止尿液自膀胱漏出。膀胱壁分為三層:即漿膜層(蜂窩脂肪組織)、肌肉層(逼尿肌、膀胱三角區(qū)肌)和黏膜層(極薄的一層移行上皮組織)。其主要作用有:①組成過濾屏障內(nèi)壁的重要部分;②在炎癥和致血栓物質(zhì)的刺激合成必要的生物活性分子;③受損后影響系膜細(xì)胞和上皮細(xì)胞,進(jìn)而影響腎臟病變。

5.方法簡介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用胰dan白-膠原混合消化法結(jié)合差速貼壁法,并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)Cytokeratin-AE1/AE3免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  上皮細(xì)胞樣

傳代特性  可傳1-2代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

叉頭蛋白M1抗體 中心體蛋白1+2封閉多肽 

多效生長因子抗體 AAGAB蛋白封閉多肽 

蛋氨腺苷轉(zhuǎn)移抗體 EXOC6蛋白封閉多肽 

磷化絲氨/蘇氨激p90RSK蛋白抗體 BRPF3蛋白封閉多肽 

碳酐7抗體 角質(zhì)蛋白β封閉多肽 

周期K抗體 神經(jīng)突觸蛋白NGL3封閉多肽 

癌胚抗原相關(guān)細(xì)胞粘附分子3抗體 雪藻脂肪延長封閉多肽 

EBPL蛋白抗體 細(xì)胞角蛋白81封閉多肽 

英文名稱: EEF1A1 相關(guān)死亡促進(jìn)因子Bad封閉多肽 

FNDC7蛋白抗體 細(xì)胞增殖誘導(dǎo)蛋白54封閉多肽 

嗜粒細(xì)胞趨化蛋白14抗體 生長/肥胖抑制活性多肽 

軟骨蛋白聚糖抗體 酪蛋白激1/casein kinase Iα封閉多肽 

水蛭抗體 磷化熱休克蛋白-70封閉多肽 

減數(shù)分裂內(nèi)切EME2抗體 CD20樣蛋白2封閉多肽 

核結(jié)合蛋白NUCB1抗體 MATH5蛋白封閉多肽 

泛硫酯L1+3抗體 ZCCHC10蛋白封閉多肽 

淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的基因64蛋白抗體 細(xì)胞表面趨化因子受體3封閉多肽 

原鈣粘蛋白γB6抗體 表皮生長因子樣蛋白2封閉多肽  
小鼠膀胱移行上皮細(xì)胞小鼠胎盤間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基100mL小鼠胎盤間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持小鼠胎盤間充質(zhì)干細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含小鼠胎盤間充質(zhì)干細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于小鼠胎盤間充質(zhì)干細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

小鼠腮腺細(xì)胞培養(yǎng)基100mL小鼠腮腺細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持小鼠腮腺細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含小鼠腮腺細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于小鼠腮腺細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

MEM培養(yǎng)基(含NEAA、20%FBS)125mL×4MEM培養(yǎng)基(Minimum Essential Medium)也稱低必需培養(yǎng)基、小基本培養(yǎng)基或Eagle培養(yǎng)基,由Harry Eagle在Eagle基本培養(yǎng)基(BEM)的基礎(chǔ)上發(fā)展而來的,是一種基本、適用范圍廣的培養(yǎng)基,是動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中常用的培養(yǎng)基之一。MEM培養(yǎng)基僅含有12種必需氨基、和8種維生,成分簡單,主要用于貼壁細(xì)胞的培養(yǎng),配方修改后也可用于其他類型細(xì)胞培養(yǎng)。MEM含NEAA(非必須氨基)的培養(yǎng)基,是在MEM培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上添加L-丙氨、L-谷氨、L-天(門)冬酰胺、L-天(門)冬氨、L-脯氨、L-絲氨和甘氨7種NEAA,能降低細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)細(xì)胞自身生產(chǎn)非必須氨基的副作用,有效促進(jìn)細(xì)胞增殖代謝。

小鼠脾淋巴細(xì)胞培養(yǎng)基100mL小鼠脾淋巴細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持小鼠脾淋巴細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含小鼠脾淋巴細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于小鼠脾淋巴細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

COV434細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4COV434細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持COV434細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含COV434細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于COV434細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

Hela S3細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4Hela S3細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持Hela S3細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含Hela S3細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于Hela S3細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

RPMI-1640(不含L-)500mL-

 


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