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人腎動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-21 12:25:09瀏覽次數(shù):224

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來源 腎動(dòng)脈組織
人腎動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:OKT11小鼠雜交瘤(抗CD2)細(xì)胞小鼠細(xì)胞系1×106P19小鼠畸胎瘤細(xì)胞小鼠細(xì)胞系1×106P388D1小鼠淋巴樣瘤細(xì)胞小鼠細(xì)胞系1×106P815小鼠肥大細(xì)胞瘤細(xì)胞小鼠細(xì)胞系1×106panc02小鼠胰腺癌細(xì)胞小鼠細(xì)胞系1×106

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

人腎動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

腎動(dòng)脈組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡介:

分離自腎動(dòng)脈組織;腎動(dòng)脈的分支為葉間動(dòng)脈,穿行于腎柱內(nèi),上行至皮質(zhì)與髓質(zhì)交界處,形成與腎表面平行的弓狀動(dòng)脈。小葉間動(dòng)脈向被膜發(fā)出毛細(xì)血管,并向周圍的腎小體發(fā)出入球小動(dòng)脈,進(jìn)入腎小囊后形成球形的毛細(xì)血管網(wǎng),再匯集成出球小動(dòng)脈,出腎小體。直小動(dòng)脈分支形成毛細(xì)血管網(wǎng),再匯合成直小靜脈,入弓狀靜脈、葉間靜脈,后匯合成腎靜脈經(jīng)腎門出腎,注入下腔靜脈。腎動(dòng)脈既是腎的營養(yǎng)血管,又是腎的機(jī)能血管,與腎泌尿機(jī)能密切相關(guān)。腎動(dòng)脈在腎實(shí)質(zhì)內(nèi)形成兩個(gè)毛細(xì)血管網(wǎng):腎小球毛細(xì)血管網(wǎng),血壓較高,利于血漿濾過形成原尿;球后毛細(xì)血管網(wǎng),血壓較低,利于腎小管的重吸收。腎動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞是腎動(dòng)脈的重要結(jié)構(gòu)細(xì)胞之一,在機(jī)體的正常生理過程中發(fā)揮著重要作用。腎動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見細(xì)胞貼壁伸展,細(xì)胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細(xì)胞匯合,多數(shù)細(xì)胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,高低起伏;細(xì)胞密度低時(shí),常交織成網(wǎng)狀;密度高時(shí),則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點(diǎn)。

5.方法簡介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用胰dan白 - 膠原聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  成纖維細(xì)胞樣

傳代特性  可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

SLAMF7抗體 微小染色體維持缺陷蛋白10封閉多肽 人乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)ELISA試劑盒

G蛋白偶聯(lián)受體GPR176蛋白抗體 硫氧還蛋白相關(guān)跨膜蛋白3封閉多肽 人腦紅蛋白(NGB)試劑盒ELISA

瘦受體抗體 NOC2家族樣蛋白封閉多肽 人的牛血清白蛋白殘留檢測ELISA檢測試劑盒

磷化蛋白激B抗體 整合α3重鏈封閉多肽 人β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)elisa試劑盒

整合樣金屬與13型抗體 神經(jīng)母細(xì)胞瘤擴(kuò)增基因蛋白封閉多肽 人髓磷脂堿性蛋白(MBP)試劑盒elisa

/軟骨蛋白多糖1抗體 早老γ分泌2封閉多肽 人高遷移率族蛋白B1(HMGB-1)檢測試劑盒elisa

活化轉(zhuǎn)錄因子6抗體 磷肌醇磷脂PLCZ1封閉多肽 人結(jié)蛋白(Des)ELISA試劑盒

英文名稱: Keratin 14 26S調(diào)節(jié)亞型封閉多肽 人S100蛋白(S-100)試劑盒ELISA

英文名稱: Phospho-MSK1 (Ser376) 早老穩(wěn)定因子樣蛋白/γ分泌組件蛋白APH1封閉多肽 人S100B蛋白(S-100B)ELISA檢測試劑盒

癌胚抗原抗體 SCE1蛋白封閉多肽 人巨噬細(xì)胞炎性蛋白2(MIP-2)elisa試劑盒

精氨1抗體 淋巴細(xì)胞抗原6G封閉多肽 人凝膠原蛋白(gelson)試劑盒elisa

血管緊張II受體樣蛋白1抗體 CD226封閉多肽 人踝蛋白(talin)檢測試劑盒elisa

磷化p38MAPK抗體 1號(hào)染色體開放閱讀框181封閉多肽 人角化細(xì)胞內(nèi)分泌因子(KAF)/雙調(diào)蛋白(AR)ELISA試劑盒

英文名稱: AKT1 牛血清白蛋白(第五組分) 人β內(nèi)啡肽(β-EP)試劑盒ELISA

英文名稱: Calponin-1 2號(hào)染色體開放閱讀框68封閉多肽 小鼠趨化因子(fractalkine/CX3CL1)ELISA檢測試劑盒

3-磷甘油?;D(zhuǎn)移2抗體 UBXN2B蛋白封閉多肽 小鼠粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)elisa試劑盒

肌動(dòng)蛋白α/α-SMA/α Actin單克隆抗體 銅代謝結(jié)構(gòu)域蛋白9封閉多肽  小鼠細(xì)胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)試劑盒elisa

α-1抗胰糜/SERPINA3抗體 1號(hào)染色體開放閱讀框174封閉多肽 小鼠胰島樣生長因子1(IGF-1)檢測試劑盒elisa
人腎動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞A2058人黑色瘤細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:A2058細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

A2780人卵巢癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:A2780細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

A2780人卵巢癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:A2780細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

A2780+GFP人卵巢癌+GFP細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:A2780+GFP細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

A2780+GFP人卵巢癌+GFP細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:A2780+GFP細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

A3人T淋巴白血病細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:A3細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

A3人T淋巴白血病細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:A3細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

 


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