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大鼠心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-21 14:13:29瀏覽次數(shù):232

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來(lái)源 心臟組織
大鼠心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:SW480人結(jié)腸腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500MLSW948人結(jié)腸腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基125MLSW948人結(jié)腸腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500MLSW579人甲狀腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基125MLSW579人甲狀腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500ML

詳細(xì)介紹

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

分離自心臟組織;心臟是脊椎動(dòng)物身體中重要的一個(gè)器官,主要功能是為血液流動(dòng)提供壓力,把血液運(yùn)行至身體各個(gè)部分。心臟由心肌構(gòu)成,左心房、左心室、右心房、右心室四個(gè)腔組成。左右心房之間和左右心室之間均由間隔隔開(kāi),故互不相通,心房與心室之間有瓣膜(房室瓣),這些瓣膜使血液只能由心房流入心室,而不能倒流。心臟的作用是推動(dòng)血液流動(dòng),向器官、組織提供充足的血流量,以供應(yīng)氧和各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),并帶走代謝的終產(chǎn)物(如二氧化碳、無(wú)機(jī)鹽、尿素和尿酸等),使細(xì)胞維持正常的代謝和功能。心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞是組成心臟微血管腔面單層扁平上皮樣細(xì)胞,它所產(chǎn)生和分泌的生物活性物質(zhì)對(duì)維持血管張力、調(diào)節(jié)血壓、抗血栓形成等有重要作用,在心臟血管疾病的發(fā)病機(jī)制中有重要病理生理學(xué)意義。近年來(lái)大量研究表明,心肌微血管內(nèi)皮細(xì)胞的功能和病理改變直接影響心肌細(xì)胞功能,也是諸多毒素、炎癥因子及病毒等重要靶位,其作為體外研究的細(xì)胞模型在心肌缺血-再灌注發(fā)病機(jī)制和細(xì)胞間旁分泌細(xì)胞生長(zhǎng)因子研究中起著重要作用。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用膠原-中性dan白混合消化法結(jié)合密度梯度離心法、后通過(guò)內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  內(nèi)皮細(xì)胞樣

傳代特性  可傳2-3代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來(lái)源

大鼠心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

心臟組織

1.png

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

肌球蛋白4抗體 溶體α-甘露糖苷封閉多肽 人巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子(MIF)ELISA檢測(cè)試劑盒

腫瘤抑制基因NME2抗體 GLTPD1蛋白封閉多肽 人組織因子途徑抑制物(TFPI)ELISA Kit

原癌蛋白CBL2單克隆抗體 肝炎病毒S蛋白封閉多肽 人干擾誘導(dǎo)蛋白10(IP-10/CXCL10)ELISA試劑盒

LRSAM1蛋白抗體 EHM2蛋白封閉多肽 人白介1(IL-1)試劑盒 ELISA

細(xì)胞周期蛋白G相關(guān)激抗體 磷化細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SMAD7封閉多肽 人白介17(IL-17)ELISA檢測(cè)試劑盒

分泌載體膜蛋白5抗體 血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子C型封閉多肽 人白介1β (IL-1β)ELISA Kit

囊泡轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白SEC20 抗體 ADCK5蛋白封閉多肽 人表皮生長(zhǎng)因子(EGF)ELISA試劑盒

磷脂?;嫉鞍拙厶?/span>-5抗體 舞蹈癥相關(guān)蛋白KALRN封閉多肽 人堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF)試劑盒 ELISA

電壓門(mén)控鉀通道亞基KV9.3抗體 肝糖原磷化封閉多肽 人巨噬細(xì)胞炎性蛋白5(MIP-5)ELISA檢測(cè)試劑盒

鈉依賴性脯氨轉(zhuǎn)運(yùn)PROT抗體 甲基丙二尿癥和高胱氨尿癥C型蛋白同源封閉多肽 人可溶性E選擇(sE-selectin)ELISA Kit

磷化心臟肌球蛋白輕鏈2抗體 磷甘油脫氫封閉多肽 人可溶性細(xì)胞間粘附分子1(sICAM-1)ELISA試劑盒

激活抗體 FAM55A蛋白封閉多肽 人細(xì)胞間粘附分子2(ICAM-2/CD102)試劑盒 ELISA

甲狀腺激受體相互作用11抗體 聚磷肌醇磷1封閉多肽 人細(xì)胞間粘附分子3(ICAM-3/CD50)ELISA檢測(cè)試劑盒

過(guò)氧化物體生物合成因子19抗體 同源轉(zhuǎn)錄因子DLX5封閉多肽 人結(jié)締組織生長(zhǎng)因子(CTGF)ELISA Kit

α1微球蛋白抗體 谷氨酰-tRNA合成蛋白1封閉多肽 人白介18(IL-18)ELISA試劑盒

核轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子YY1抗體 線粒體核糖體蛋白L32封閉多肽 人粘膜相關(guān)上皮趨化因子(MEC/CCL28) 試劑盒 ELISA

老年癡呆相關(guān)類鈣粘蛋白CS1抗體 核蛋白NHN1封閉多肽 人粘膜相關(guān)上皮趨化因子(MEC/CCL28) ELISA檢測(cè)試劑盒

腫瘤壞死因子配體超家族成員14抗體 端粒保護(hù)蛋白1封閉多肽 人B細(xì)胞活化因子受體(BAFF-R) ELISA Kit
大鼠心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞小鼠角膜基質(zhì)細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:小鼠角膜基質(zhì)細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基100ML

小鼠角膜基質(zhì)細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:小鼠角膜基質(zhì)細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

小鼠腸間質(zhì)細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:小鼠腸間質(zhì)細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基100ML

小鼠腸間質(zhì)細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:小鼠腸間質(zhì)細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

人支氣管平滑肌細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:人支氣管平滑肌細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基100ML

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貓主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:貓主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基100ML
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

 


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