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雞骨骼肌細(xì)胞

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更新時間:2023-04-21 15:59:16瀏覽次數(shù):307

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 骨骼肌組織
雞骨骼肌細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:大鼠子宮成纖維細(xì)胞原代細(xì)胞5×105大鼠子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞原代細(xì)胞5×105大鼠卵泡膜細(xì)胞原代細(xì)胞5×105大鼠海綿體內(nèi)皮細(xì)胞原代細(xì)胞5×105大鼠宮頸上皮細(xì)胞原代細(xì)胞5×105

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

雞骨骼肌細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

骨骼肌組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡介:

分離自四肢肌肉組織;骨骼肌又稱橫紋肌,肌肉中的一種,約占全身重量的40%。骨骼肌纖維為長柱形的多核細(xì)胞,肌膜的外面有基膜緊密貼附。屬于橫紋肌,橫紋肌還包括心肌與內(nèi)臟橫紋肌,其中骨骼肌主要分布于四肢。每塊肌肉都是具有一定形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能的器官,有豐富的血管、淋巴分布,在軀體神經(jīng)支配下收縮或舒張,進(jìn)行隨意運(yùn)動。肌肉可根據(jù)共形狀、大小、位置、起止點、纖維方向和作用等命名。依形態(tài)命名的如斜方肌、菱形肌、三角肌、梨狀肌等。骨骼肌細(xì)胞呈纖維狀,不分支,有明顯橫紋,核很多,且都位于細(xì)胞膜下方。肌細(xì)胞內(nèi)有許多沿細(xì)胞長軸平行排列的細(xì)絲狀肌原纖維。每一肌原纖維都有相間排列的明帶(Ⅰ帶)及暗帶(A帶)。明帶染色較淺,而暗帶染色較深。暗帶中間有一條較明亮的線稱H線。H線的中部有一M線。明帶中間,有一條較暗的線稱為Z線。兩個Z線之間的區(qū)段,叫做一個肌節(jié)。骨骼肌細(xì)胞也稱橫紋肌細(xì)胞,細(xì)胞呈纖維狀,不分支,有明顯橫紋,核很多,且都位于細(xì)胞膜下方,細(xì)胞多呈梭行,具有一定的方向性。骨骼肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見細(xì)胞貼壁伸展,細(xì)胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細(xì)胞匯合,多數(shù)細(xì)胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,高低起伏;細(xì)胞密度低時,常交織成網(wǎng)狀;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用混合膠原消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實驗室分離的經(jīng)α-Sarcometric actin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  成纖維細(xì)胞樣

傳代特性  可傳2-3代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

英文名稱: Cecropin-A 細(xì)胞維甲結(jié)合蛋白2封閉多肽 

多瘤病毒增強(qiáng)了結(jié)合蛋白2β抗體 真核翻譯起始因子3亞基L/eIF3e蛋白封閉多肽 

神經(jīng)細(xì)胞死亡誘導(dǎo)蛋白激抗體 1號染色體開放閱讀框191封閉多肽 

溶質(zhì)載體家族蛋白26成員6抗體 重組人腫瘤壞死因子α蛋白 

纖維性鞘結(jié)合蛋白1抗體 2’,3’-環(huán)腺苷-3’-磷二酯封閉多肽 

維甲相關(guān)孤兒受體γt抗體 溶質(zhì)載體家族蛋白26成員6封閉多肽 

阻抑/腫瘤抑制因子單克隆抗體 亞精胺合成封閉多肽 

丙酰羧化β鏈抗體 合成封閉多肽 

多效生長因子抗體 嗅覺感受器蛋白10G9封閉多肽 

組蛋白甲基轉(zhuǎn)移SMYD4抗體 磷化細(xì)胞分裂相關(guān)蛋白CSTF64封閉多肽 

新朊蛋白抗體(C端) 膠原三股螺旋重復(fù)蛋白1封閉多肽 

人絨毛膜促性腺激α 亞基單抗 分離蛋白SCRN2封閉多肽 

泛甲基賴氨抗體 神經(jīng)內(nèi)分泌肽QRFP封閉多肽 

蛋白磷2Cα抗體 著絲粒蛋白P封閉多肽 

英文名稱: SARS-CoV-2 () Spike protein S2 丙型肝炎病毒-NS4a封閉多肽 

鋅指蛋白415抗體 蛋氨氨肽2封閉多肽 

酪氨蛋白激受體A4抗體 NCKAP5蛋白封閉多肽 

磷化細(xì)胞骨架肌動蛋白樣蛋白3抗體 ZC3H7A蛋白封閉多肽 
雞骨骼肌細(xì)胞D-蟲熒光鈉鹽英文名稱:D-Luciferin, sodium salt , D-蟲熒光25mg

D-英文名稱:D-無水250g

牛胰島英文名稱:牛胰島100mg

遺傳霉硫鹽英文名稱:G-418100mg

英文名稱:Dexamethasone100mg

L-脯氨英文名稱:脯氨25g

氨甲蝶呤英文名稱:氨甲蝶呤10mg

 


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