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大鼠腸靜脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基

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更新時(shí)間:2023-04-25 11:15:36瀏覽次數(shù):239

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 100mL/125mL×4
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 產(chǎn)品濃度
大鼠腸靜脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基的相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1688細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4DMEM/F12培養(yǎng)基(含HEPES、20%FBS)125mL×4FRhK-4細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4MDA-MB-468細(xì)胞專用培養(yǎng)基(DMEM)125mL×4NK-92MI細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

產(chǎn)品形態(tài)

大鼠腸靜脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基

100mL/125mL×4

液體

商品詳細(xì)介紹:

由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持大鼠腸靜脈內(nèi)皮細(xì)胞最佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含大鼠腸靜脈內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無(wú)需添加任何成分,可直接用于大鼠腸靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)。本產(chǎn)品僅供進(jìn)一步科研使用,不得用于診斷、治療、臨床、家庭及其它用途。

產(chǎn)品說(shuō)明

產(chǎn)品形態(tài):液體

產(chǎn)品濃度:

產(chǎn)品規(guī)格:100mL/125mL×4

細(xì)菌檢測(cè):陰性

真菌檢測(cè):陰性

支原體檢測(cè):陰性

細(xì)胞生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn):細(xì)胞生長(zhǎng)良好,形態(tài)正常

內(nèi)毒素含量(EU/mL):≤3

儲(chǔ)存條件:2~8℃,避光儲(chǔ)存

運(yùn)輸條件:冰袋冷藏運(yùn)輸

有效期:3個(gè)月

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實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
公司產(chǎn)品僅用于科研

AHA3 Antibody Blocking PeptideAHA3(擬南芥)封閉多肽

AHNAK2 Antibody Blocking PeptideAHNAK核蛋白2封閉多肽

ATIC Antibody Blocking PeptideAICAR甲酰基轉(zhuǎn)移封閉多肽

AIMP2 Antibody Blocking PeptideAIMP2封閉多肽

AKIRIN1 Antibody Blocking PeptideAKIRIN1蛋白封閉多肽

AKIRIN2 Antibody Blocking PeptideAKIRIN2蛋白封閉多肽

AKTIP Antibody Blocking PeptideAKT相互作用蛋白蛋白封閉多肽

AKTIP Antibody Blocking PeptideAKT相互作用蛋白封閉多肽

ALDH3A2 Antibody Blocking PeptideALDH3A2封閉多肽

Streptavidin / AF350Alexa Fluor 350標(biāo)記鏈霉親和

Streptavidin / AF488Alexa Fluor 488標(biāo)記鏈霉親和

BSA / AF488Alexa Fluor 488標(biāo)記牛血清白蛋白

AIF 小鼠凋亡誘導(dǎo)因子ELISA試劑盒AIF ELISA Kit

Cav-1 大鼠窖蛋白Caveolin1ELISA試劑盒Cav-1 ELISA Kit

FASL 小鼠凋亡相關(guān)因子配體ELISA試劑盒FASL ELISA Kit

IGF-1 小鼠因子1ELISA試劑盒IGF-1 ELISA Kit
大鼠腸靜脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基MEM 無(wú)糖培養(yǎng)基 QSG-7701細(xì)胞專用培養(yǎng)基

MKN-74 細(xì)胞專用培養(yǎng)基 人肝動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基

iCell間充質(zhì)干細(xì)胞成軟骨誘導(dǎo)分化試劑盒 MT-4細(xì)胞專用培養(yǎng)基

小鼠胰腺星狀細(xì)胞永生化 細(xì)胞專用培養(yǎng)基 小鼠滑膜間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基

WPMY-1 細(xì)胞專用培養(yǎng)基 DB細(xì)胞專用培養(yǎng)基


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