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大鼠腸神經(jīng)嵴干細胞

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更新時間:2023-04-23 10:33:39瀏覽次數(shù):234

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 腸組織
大鼠腸神經(jīng)嵴干細胞的相關(guān)產(chǎn)品:大鼠外周血淋巴細胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶EB-3 (人Burkitt's淋巴瘤細胞)(STR鑒定正確)1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶豬成骨細胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶C918 (人眼脈絡(luò)黑色瘤細胞) (STR鑒定正確)1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶人膀胱成纖維細胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

詳細介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

大鼠腸神經(jīng)嵴干細胞

5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

腸組織

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自腸組織;神經(jīng)嵴干細胞(neural crest stem cells,NCSC),即外周神經(jīng)系統(tǒng)干細胞,起源于胚胎期的神經(jīng)管背側(cè),與中樞神經(jīng)系統(tǒng)干細胞在形態(tài)學上有著顯著不同,NCSC可表達低親和力神經(jīng)營養(yǎng)因子受體p75NTR而不能分化出少突膠質(zhì)細胞,而中樞神經(jīng)系統(tǒng)干細胞與之恰好相反。NCSC可在不同部位分化出多種組織,如神經(jīng)元、神經(jīng)膠質(zhì)、黑色素細胞、內(nèi)分泌細胞、平滑肌、骨骼肌及骨等,其中可特異性分化出腸神經(jīng)系統(tǒng)中神經(jīng)元和神經(jīng)膠質(zhì)的NCSC,被稱為腸神經(jīng)嵴干細胞(gut neural crest stem cells,GNCSC)。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用中性dan白 - 膠原聯(lián)合消化法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實驗室分離的經(jīng)嵴干細胞經(jīng)Nestin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  B-27 Supplement、EGF、bFGF、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  懸浮

細胞形態(tài)  球形

傳代特性  可傳1-3代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

溶質(zhì)載體家族蛋白34成員A3抗體 ZMYM1蛋白封閉多肽 

英文名稱: LOC103437570 果蠅CG6856-PA封閉多肽 

磷化酪氨蛋白激3/FER (phospho Y402)抗體 肌動蛋白相關(guān)蛋白2/3亞型1A封閉多肽 

轉(zhuǎn)運RNA核糖轉(zhuǎn)移結(jié)構(gòu)域蛋白QTRTD1抗體 煙堿型乙酰受體γ封閉多肽 

甲精結(jié)合蛋白17抗體 轉(zhuǎn)錄因子ER81蛋白封閉多肽 

膜粘連蛋白 Ⅱ抗體 甘油二酯激α/DGK-α封閉多肽 

B淋巴細胞粘附分子CD22抗體 NMDA受體調(diào)節(jié)1樣蛋白封閉多肽 

鋅指蛋白482抗體 上皮特異性ETs轉(zhuǎn)錄因子封閉多肽 

FAM205A蛋白抗體 酪氨激A/B/C封閉多肽 

腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子5抗體 Bcl2相互作用蛋白2封閉多肽 

英文名稱: ABCB11 生長激2/胎盤特異性生長激封閉多肽 

17β羥基類固醇脫氫11/17β-HSD11抗體 NADH脫氫黃蛋白1封閉多肽 

鋅指蛋白547抗體 乙酰肝2封閉多肽 

MAPK調(diào)控蛋白TRB2抗體 轉(zhuǎn)錄因子E2F-2封閉多肽 

磷化蛋白精氨N甲基4抗體 原鈣粘蛋白γA3封閉多肽 

嗅覺受體51B2抗體 8號染色體開放閱讀框47封閉多肽 

軟骨凝集蛋白CHODL抗體 補體C8β鏈封閉多肽 

著絲點關(guān)聯(lián)蛋白1抗體 Opticin蛋白封閉多肽 
大鼠腸神經(jīng)嵴干細胞RPMI-1640 (Dutch改良)500mL-

Ham's F-12K培養(yǎng)基(含10%FBS)125mL×4Ham's F-12K培養(yǎng)基是Ham's F-12營養(yǎng)混合物的Kaighn's改進型,在Ham's F-12的基礎(chǔ)上提高了氨基和的濃度,降低了葡萄糖的用量,并修改了鹽的成分和含量(Konigsbergs)。Ham's F-12K培養(yǎng)基初設(shè)計用于培養(yǎng)原代人肝細胞以及分化的大鼠和雞的細胞。

HPAC細胞專用培養(yǎng)基125mL×4HPAC細胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持HPAC細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含HPAC細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于HPAC細胞的體外培養(yǎng)。

人肺大動脈平滑肌細胞培養(yǎng)基100mL人肺大動脈平滑肌細胞培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持人肺大動脈平滑肌細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含人肺大動脈平滑肌細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于人肺大動脈平滑肌細胞的體外培養(yǎng)。

人支氣管平滑肌細胞培養(yǎng)基100mL人支氣管平滑肌細胞培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持人支氣管平滑肌細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含人支氣管平滑肌細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于人支氣管平滑肌細胞的體外培養(yǎng)。

人結(jié)腸成纖維細胞培養(yǎng)基100mL人結(jié)腸成纖維細胞培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持人結(jié)腸成纖維細胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含人結(jié)腸成纖維細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于人結(jié)腸成纖維細胞的體外培養(yǎng)。

Leibovitz's L-15(含雙抗)500mL-

 


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