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大鼠胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)基

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更新時(shí)間:2023-04-23 16:06:39瀏覽次數(shù):379

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 100mL/125mL×4
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 產(chǎn)品濃度
大鼠胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)基的相關(guān)產(chǎn)品:B16細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4大鼠前列腺上皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mLMcCoy's 5A(含雙抗)500mL大鼠胚胎肝母細(xì)胞培養(yǎng)基100mLHCCC-9810細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

產(chǎn)品形態(tài)

大鼠胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)基

100mL/125mL×4

液體

商品詳細(xì)介紹:

由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持大鼠胚胎干細(xì)胞最佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含大鼠胚胎干細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無(wú)需添加任何成分,可直接用于大鼠胚胎干細(xì)胞的體外培養(yǎng)。本產(chǎn)品僅供進(jìn)一步科研使用,不得用于診斷、治療、臨床、家庭及其他用途。

產(chǎn)品說(shuō)明

產(chǎn)品形態(tài):液體

產(chǎn)品濃度:

產(chǎn)品規(guī)格:100mL/125mL×4

細(xì)菌檢測(cè):陰性

真菌檢測(cè):陰性

支原體檢測(cè):陰性

細(xì)胞生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn):細(xì)胞生長(zhǎng)良好,形態(tài)正常

內(nèi)毒素含量(EU/mL):≤3

儲(chǔ)存條件:2~8℃,避光儲(chǔ)存

運(yùn)輸條件:冰袋冷藏運(yùn)輸

有效期:3個(gè)月

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實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大?。?/span>
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
公司產(chǎn)品僅用于科研

磷化多巴胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白DAT抗體 味覺(jué)受體蛋白家族2亞基16封閉多肽 

一氧化氮合成-1(神經(jīng)型)抗體 細(xì)胞色P450 3A5封閉多肽 

抑癌蛋白UBIAD1抗體 E3連接蛋白ARIH2封閉多肽 

腺苷環(huán)化Gα蛋白/Gαs/olf抗體 鋅指蛋白3封閉多肽 

樁蛋白抗體 磷化原癌基因蛋白c-kit封閉多肽 

磷化腺瘤樣息肉抗體 γ氨基丁受體相關(guān)蛋白樣1封閉多肽 

PSMα3抗體 細(xì)胞角蛋白4封閉多肽 

鈣和整合結(jié)合蛋白4抗體 RAN結(jié)合蛋白2/核孔蛋白封閉多肽 

ATP依賴解旋DDX1抗體 Caspase激活的脫氧核糖核抑制劑封閉多肽 

英文名稱: GAPDH (Loading Control, animal-free) 干擾α21封閉多肽 

激活受體Atr抗體 微管相關(guān)蛋白4封閉多肽 

英文名稱: DUSP1 FITC標(biāo)記雞卵白蛋白 

腺瘤性結(jié)腸息肉病蛋白2抗體 RAD51D蛋白封閉多肽 

心臟和神經(jīng)嵴衍生蛋白2抗體 軸突導(dǎo)向受體蛋白3封閉多肽 

酯抑制劑8抗體 絲氨棕櫚酰轉(zhuǎn)移2封閉多肽 

血清淀粉樣蛋白4抗體 磷化磷酯Cβ3封閉多肽 

疣狀表皮發(fā)育不良蛋白1抗體 鐵蛋白重鏈封閉多肽 

KIAA1970蛋白抗體 Bcl-2封閉多肽 
大鼠胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)基大鼠嗅上皮細(xì)胞組織來(lái)源:嗅上皮組織

大鼠雪旺氏細(xì)胞組織來(lái)源:神經(jīng)組織

大鼠血管外膜成纖維細(xì)胞組織來(lái)源:血管組織

大鼠牙胚細(xì)胞組織來(lái)源:牙胚組織

大鼠牙乳頭細(xì)胞組織來(lái)源:牙乳頭組織

大鼠牙髓干細(xì)胞組織來(lái)源:牙髓組織

大鼠牙齦成纖維細(xì)胞組織來(lái)源:牙齦組織


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