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人胚肺成纖維細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-21 14:11:37瀏覽次數(shù):243

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來源 胚胎;肺組織
人胚肺成纖維細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:Snu-182人肝癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基125MLSnu-182人肝癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500MLSnu-387人肝癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基125MLSnu-387人肝癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500MLSNU-398人胃癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基125ML

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

人胚肺成纖維細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

胚胎;肺組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

分離自胚肺組織;肺是機(jī)體的呼吸器官,位于胸腔,左右各一,覆蓋于心之上。肺有分葉,左二右三,共五葉。肺經(jīng)肺系(指氣管、支氣管等)與喉、鼻相連,故稱喉為肺之門戶,鼻為肺之外竅。成纖維細(xì)胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來。成纖維細(xì)胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛,細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng),在一定條件下,它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化;成纖維細(xì)胞對(duì)不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的胚肺成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起;6h后細(xì)胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長(zhǎng),不聚集成團(tuán);細(xì)胞生長(zhǎng)迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),細(xì)胞排列緊密,有的交叉重疊生長(zhǎng),平坦、胞體較大,細(xì)胞質(zhì)透明,細(xì)胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細(xì)胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀;細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。該細(xì)胞在合成和分泌細(xì)胞因子、維持血管內(nèi)外和凝血和纖溶的的動(dòng)態(tài)平衡中起重要作用。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用胰dan白 - 膠原混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  成纖維細(xì)胞樣

傳代特性  可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

無毛發(fā)蛋白抗體 抑制A/Inhibin βA封閉多肽 人Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽(CTX-I)ELISA試劑盒

原癌基因相關(guān)蛋白RAP2B抗體 BIVM蛋白封閉多肽 人Ⅰ型膠原C端肽(ICTP)試劑盒ELISA

RAS家族關(guān)聯(lián)結(jié)構(gòu)域蛋白9抗體 精神發(fā)育遲滯相關(guān)蛋白封閉多肽 人Ⅰ型膠原(Col Ⅰ)ELISA檢測(cè)試劑盒

核心蛋白聚糖抗體 有絲分裂激B封閉多肽 人1型1-磷鞘氨醇受體(S1P1)ELISA試劑盒

轉(zhuǎn)錄因子MAFF抗體 布氏桿菌菌體蛋白 人17-羥孕烯醇酮試劑盒ELISA

蛋白C抑制因子抗體 干擾epsilon 1蛋白封閉多肽 人17-α-羥化(17-α-OH)檢測(cè)試劑盒elisa

血管生成-1抗體 四分子交聯(lián)體12/四旋蛋白封閉多肽 人16α羥基雌酮1(16-α OHE-1)ELISA試劑盒

磷化鐵蛋白Fe65抗體 轉(zhuǎn)錄延伸因子3/ TCEB3封閉多肽 人15-羥基前列腺脫氫(15-PGDH)試劑盒ELISA

英文名稱: IGFBP3 FAM26E蛋白封閉多肽 人15-epi-氧脂 A4(15-epi-LXA4)ELISA檢測(cè)試劑盒

甲狀腺受體相互作用蛋白1抗體 腫瘤/睪丸抗原2封閉多肽 人14-3-3 蛋白 beta/alpha(YWHAB)ELISA試劑盒

核孔復(fù)合體蛋白88抗體 腎連蛋白封閉多肽 人12-脂氧化/脂加氧(LOX-12)試劑盒ELISA

Kelch樣蛋白17抗體 TEX261蛋白封閉多肽 人11-脫氧檢測(cè)試劑盒elisa

G蛋白偶聯(lián)受體GPR135蛋白抗體 血管生成-1封閉多肽 人11β羥類固醇脫氫1型(11β-HSD1)ELISA試劑盒

腦納前體抗體 MED17封閉多肽 人1,4,5-三磷肌醇(IP3)試劑盒ELISA

細(xì)胞死亡防衛(wèi)蛋白1抗體 重組2-S1蛋白 人1,25二羥基維生D3(1,25 DHVD3)ELISA檢測(cè)試劑盒

KIAA1109蛋白抗體 重組小鼠H2-Q10蛋白 人 Liprin alpha 1 ELISA試劑盒

PTCD3蛋白抗體 14號(hào)染色體開放閱讀框106封閉多肽 人原鈣黏1(PCDH1) ELISA試劑盒

結(jié)腸癌抗原8抗體 磷化14-3-3 τ封閉多肽  人白介2受體(IL-2R) 試劑盒 ELISA
人胚肺成纖維細(xì)胞人乳腺癌成纖維細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:人乳腺癌成纖維細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

人軟骨細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:人軟骨細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基100ML

人軟骨細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:人軟骨細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

小鼠角膜上皮細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:小鼠角膜上皮細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基100ML

小鼠角膜上皮細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:小鼠角膜上皮細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

小鼠肝星狀細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:小鼠肝星狀細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基100ML

小鼠肝星狀細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:小鼠肝星狀細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

 


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