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人食管平滑肌細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-23 10:34:20瀏覽次數(shù):269

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來源 食管組織
人食管平滑肌細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:D283 Med (人腦髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞) (STR鑒定正確)1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶大鼠腹腔巨噬細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶大鼠肝枯否細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶人表皮角質(zhì)形成細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶兔胰腺星狀細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

詳細(xì)介紹

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

分離自食管組織;食管可分為頸段、胸段和腹段,脊椎動(dòng)物食管的頸段位于氣管背后和脊柱前端,胸段位于左、右肺之間的縱膈內(nèi),胸段通過膈孔與腹腔內(nèi)腹相連,腹段很短與胃相連。哺乳動(dòng)物的食管結(jié)構(gòu)上由內(nèi)向外分四層:黏膜層、黏膜下層、肌層和外膜。其中,肌層上1/3段為骨骼肌,下1/3為平滑肌,中段為骨骼肌和平滑肌混合組成。其中,肌纖維的排列方式分為內(nèi)環(huán)形和外縱形兩層。食管的蠕動(dòng)是由食管平滑肌收縮嚴(yán)格控制,食管還有括約肌,位于環(huán)狀軟骨水平的,稱為食管上括約肌;位于食管下端,一部分在膈上,穿過膈孔,另一部分在膈下的高壓帶,稱為食管下括約肌。食管平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見細(xì)胞貼壁伸展,細(xì)胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細(xì)胞匯合,多數(shù)細(xì)胞伸展呈長(zhǎng)梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長(zhǎng),高低起伏;細(xì)胞密度低時(shí),常交織成網(wǎng)狀;密度高時(shí),則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長(zhǎng)較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長(zhǎng)特點(diǎn)。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用胰dan白 - 膠原聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  成纖維細(xì)胞樣

傳代特性  可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

人食管平滑肌細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

食管組織

1.png

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

6號(hào)染色體開放閱讀框211抗體 GATA2/GATA3封閉多肽 

鈣激活氯離子通道4蛋白抗體 甘油吸收/轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白GUP1封閉多肽 

激肝型抗體 驅(qū)動(dòng)蛋白家族KIF17封閉多肽 

核內(nèi)切G樣蛋白1抗體 金標(biāo)記蛋白A(10nm/15nm) 

英文名稱: STAT1 alpha 豬藍(lán)耳病病毒N蛋白封閉多肽 

白細(xì)胞介34抗體 致癌基因C-Myc封閉多肽 

p21活化蛋白激ARHG7抗體 絲氨抑制劑B8封閉多肽 

CES1P1蛋白抗體 重組食蟹猴CD122/IL2RB蛋白 

鋅指蛋白189抗體 EIF2D蛋白封閉多肽 

鈣粘附蛋白9抗體 磷化白介-1受體相關(guān)激1封閉多肽 

精神發(fā)育遲滯相關(guān)蛋白Oligophrenin-1抗體 過氧化物體生物合成因子16封閉多肽 

性神經(jīng)酰胺1抗體 纖維蛋白溶原封閉多肽 

神經(jīng)內(nèi)分泌長(zhǎng)卷曲螺旋蛋白2抗體 血藍(lán)蛋白偶聯(lián)物 

ZDHHC15蛋白抗體 環(huán)指蛋白31封閉多肽 

溶質(zhì)載體轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白家族29成員3抗體 水稻白葉枯病菌Os05g0477200蛋白封閉多肽 

黑色瘤相關(guān)抗原C2抗體 錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白26封閉多肽 

KLHL1蛋白抗體 E3泛蛋白連接封閉多肽DTX1封閉多肽 

吞噬細(xì)胞運(yùn)動(dòng)蛋白2抗體 肌微管相關(guān)蛋白12封閉多肽 
人食管平滑肌細(xì)胞NCI-H508[H508]細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4NCI-H508[H508]細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持NCI-H508[H508]細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含NCI-H508[H508]細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于NCI-H508[H508]細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

IMR-32細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4IMR-32細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持IMR-32細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含IMR-32細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于IMR-32細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

MDA-kb2細(xì)胞專用培養(yǎng)基(L15)125mL×4MDA-kb2細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持MDA-kb2細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含MDA-kb2細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于MDA-kb2細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

DMEM低糖培養(yǎng)基(含20%FBS)125mL×4Dulbecco's改良培養(yǎng)基——DMEM(Dulbecco's Modified Eagle Medium)是在MEM培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上研制的,與MEM培養(yǎng)基相比,氨基的含量增加了2倍,維生增加了4倍,同時(shí)還增加了非必須氨基、微量鐵離子以及鈉。DMEM培養(yǎng)基初設(shè)計(jì)葡萄糖含量為1000mg/L(低糖型),后來又發(fā)展出葡萄糖含量為4500mg/L(高糖型),現(xiàn)已廣泛應(yīng)用于各種細(xì)胞的培養(yǎng)。DMEM低糖培養(yǎng)基更適合代謝作用較慢、依賴性貼壁細(xì)胞的培養(yǎng)。

大鼠脂肪細(xì)胞培養(yǎng)基100mL大鼠脂肪細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持大鼠脂肪細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含大鼠脂肪細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于大鼠脂肪細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

HT-29細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4HT-29細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持HT-29細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含HT-29細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于HT-29細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

人甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL人甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持人甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含人甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于人甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)。
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

 


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