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大鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)前體細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-21 13:01:21瀏覽次數(shù):216

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來(lái)源 腦組織
大鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)前體細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:CaSKi人宮頸癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基125MLCaSKi人宮頸癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500MLCCD841 CON人正常結(jié)腸上皮(有限系)細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基125MLCCD841 CON人正常結(jié)腸上皮(有限系)細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500MLCCRF-CEM人急性淋巴白血病細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基125ML

詳細(xì)介紹

1.png

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來(lái)源

大鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)前體細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

腦組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

分離自腦皮層組織;大腦分左右兩個(gè)半球,大腦皮質(zhì)(灰質(zhì))覆蓋著每個(gè)大腦半球的大部分,它是神經(jīng)元胞體集中的地方。內(nèi)部則是由神經(jīng)纖維或髓鞘構(gòu)成的白質(zhì)。少突膠質(zhì)細(xì)胞分布于中樞神經(jīng)系統(tǒng),在銀浸染標(biāo)本中,少突膠質(zhì)細(xì)胞比星狀膠質(zhì)細(xì)胞小,其突起也較小而少,呈珠狀,故被稱為少突膠質(zhì)細(xì)胞或寡突膠質(zhì)細(xì)胞。少突膠質(zhì)細(xì)胞(oligodendrocyte)是中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)的成髓鞘神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞,其發(fā)育要經(jīng)歷少突膠質(zhì)細(xì)胞祖細(xì)胞、前少突膠質(zhì)細(xì)胞祖細(xì)胞、未成熟和成熟少突膠質(zhì)細(xì)胞等階段。有學(xué)者將少突膠質(zhì)細(xì)胞按其發(fā)育程度和形態(tài)分為三型。但是,細(xì)胞發(fā)育是一個(gè)連續(xù)的過(guò)程,其形態(tài)、表達(dá)產(chǎn)物和功能的演變沒(méi)有嚴(yán)格的界限,因此,其分類是相對(duì)的。這三型分別為:Ⅰ型少突膠質(zhì)細(xì)胞又稱前O2A(pre-O2A progenitor cell)。細(xì)胞呈圓形,表面光滑,直徑約3μm,體外混合培養(yǎng)時(shí)成簇生長(zhǎng)在星形膠質(zhì)表面,具有很強(qiáng)的分裂增殖潛力,表達(dá)神GM1、波形蛋白和多唾液酸—神經(jīng)粘附分子(polysialic acid-neural cell adhesion molecule,PSA-NCAM)等。Ⅱ型少突膠質(zhì)細(xì)胞胞體常有雙極或三極突起,極少數(shù)為單極突起,直徑約7μm,有一定的分裂增殖能力。體外培養(yǎng)時(shí)為雙潛能細(xì)胞,既可分化為少突膠質(zhì)細(xì)胞又可分化為Ⅱ型星形膠質(zhì),故又稱為少突膠質(zhì)細(xì)胞-Ⅱ型星形膠質(zhì)祖細(xì)胞(oligodendrocyte-type-2 astrocyte progenitor cell,O2A)。O2A除表達(dá)GM1和波形蛋白外還表達(dá)神苷脂GD3和GQ(淋巴雜交瘤株A2B5產(chǎn)生GQ的抗體),故常用A2B5抗體標(biāo)記O2A。Ⅲ型少突膠質(zhì)細(xì)胞不再具有分裂增殖能力,為分裂終期細(xì)胞。直徑約10μm。根據(jù)其形成髓鞘的能力,又分為不成熟的和成熟的兩類少突膠質(zhì)細(xì)胞。不成熟的OL胞體常伸出4~5條較粗大突起,表面還殘留有A2B5標(biāo)記物,同時(shí)也表達(dá)O1-O4抗原,無(wú)形成髓鞘的能力。成熟的少突膠質(zhì)細(xì)胞突起有如蜘蛛網(wǎng),大量表達(dá)半乳糖腦苷脂(galactocerebro side,GC)、蛋白脂蛋白(proteio lipid protein,PLP)、髓鞘堿性蛋白(myelin basic protein,MBP)等,有對(duì)軸突髓鞘化的能力。體外培養(yǎng)的少突膠質(zhì)細(xì)胞前體細(xì)胞(簡(jiǎn)稱少突膠質(zhì)細(xì)胞前體細(xì)胞)包括前O2A和O2A和未成熟少突膠質(zhì)細(xì)胞,前兩者具有增殖能力。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用胰dan白消化、混合細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)缺失培養(yǎng)、搖床振蕩結(jié)合差速貼壁法并通過(guò)專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)少突膠質(zhì)前體細(xì)胞經(jīng)A2B5免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  B-27、PDGF、bFGF、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  雙極、多極形

傳代特性  不傳代,不增殖,存活1-2周

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

磷化雙微體2癌基因抗體 磷化周期E1封閉多肽 大鼠可溶性血管細(xì)胞粘附分子1(sVCAM-1)ELISA試劑盒

調(diào)節(jié)元件相關(guān)蛋白1抗體 肽酰tRNA水解ICT1封閉多肽 大鼠免疫球蛋白A(IgA)試劑盒ELISA

骨形態(tài)發(fā)生蛋白1/膠原C蛋白肽鏈內(nèi)切抗體 細(xì)胞色氧化缺失蛋白1封閉多肽 大鼠免疫球蛋白E(IgE)ELISA檢測(cè)試劑盒

嗅介蛋白樣蛋白2B抗體 卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白102B封閉多肽 大鼠免疫球蛋白G(IgG)elisa試劑盒

粘蛋白-1抗體 鋅指蛋白785封閉多肽 大鼠免疫球蛋白M(IgM)試劑盒elisa

轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子β受體3抗體 突觸生長(zhǎng)相關(guān)蛋白封閉多肽 大鼠內(nèi)皮抑(ES)檢測(cè)試劑盒elisa

氫鉀ATP通道蛋白抗體 C型凝集結(jié)構(gòu)域家族2成員H封閉多肽 大鼠腦鈉/腦鈉尿肽(BNP)ELISA試劑盒

磷化GATA結(jié)合蛋白3抗體 配子生成結(jié)合蛋白1封閉多肽 大鼠前列腺E2(PGE2)試劑盒ELISA

磷化CD244抗體 叉頭蛋白D2封閉多肽 大鼠神經(jīng)特異性烯醇化(NSE)ELISA檢測(cè)試劑盒

人程序性死亡1單克隆抗體 轉(zhuǎn)錄因子Tbx3封閉多肽 大鼠細(xì)胞間粘附分子2(ICAM-2/CD102)elisa試劑盒

CD30抗體 重組猴痘病毒A29L蛋白 大鼠細(xì)胞間粘附分子3(ICAM-3/CD50)試劑盒elisa

磷化死亡相關(guān)蛋白激3抗體 FAM103A1蛋白封閉多肽 大鼠纖溶原激活物抑制因子1(PAI-1)檢測(cè)試劑盒elisa

磷化蛋白激B抗體 FAM100B蛋白封閉多肽 大鼠纖溶原激活物抑制因子(PAI)ELISA試劑盒

原癌基因蛋白/活化蛋白1抗體 趨化因子受體1封閉多肽 大鼠血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)試劑盒ELISA

磷化絲裂原活化蛋白激3K9抗體 重組大鼠CD90蛋白 大鼠血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)ELISA檢測(cè)試劑盒

去整合樣金屬15抗體 重組人IL-4 (活性的, Tag free) 大鼠血小板衍生生長(zhǎng)因子(PDGF)elisa試劑盒

SIAH結(jié)合蛋白1抗體 磷化p21激活激2封閉多肽 大鼠氧化低密度脂蛋白(OxLDL)試劑盒elisa

孕激受體抗體 鋅指蛋白461封閉多肽 大鼠血小板活化因子(PAF)檢測(cè)試劑盒elisa
大鼠神經(jīng)少突膠質(zhì)前體細(xì)胞MCF-7+luc人乳腺癌熒光標(biāo)記細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:MCF-7+luc細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

MCF-7+luc人乳腺癌熒光標(biāo)記細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:MCF-7+luc細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

MDA-KB2人乳腺細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:MDA-KB2細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

MDA-KB2人乳腺細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:MDA-KB2細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

MDA-MB-157人乳腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:MDA-MB-157細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

MDA-MB-157人乳腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:MDA-MB-157細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

MDA-MB-231人乳腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:MDA-MB-231細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML


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