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大鼠脂肪干細胞培養(yǎng)基

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更新時間:2023-04-26 15:49:54瀏覽次數:284

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產品簡介

供貨周期 現貨 規(guī)格 100mL/125mL×4
主要用途 僅供科研實驗 產品濃度
大鼠脂肪干細胞培養(yǎng)基的相關產品:大鼠胸腺上皮細胞 人腹膜毛細血管內皮細胞 小鼠神經少突膠質前體細胞 人腹膜毛細血管內皮細胞培養(yǎng)基DMS 53人肺癌細胞專用培養(yǎng)基 人肝癌組織源細胞 大鼠三叉神經元細胞 人肝癌組織源細胞培養(yǎng)基大鼠表皮角質形成細胞 人肝動脈內皮細胞

詳細介紹

產品屬性:

產品名稱

規(guī)格

產品形態(tài)

大鼠脂肪干細胞培養(yǎng)基

100mL/125mL×4

液體

商品詳細介紹:

由技術團隊精心優(yōu)化,經過長期測試,本產品可保持大鼠脂肪干細胞最佳的生長狀態(tài)。本產品中已包含大鼠脂肪干細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于大鼠脂肪干細胞的體外培養(yǎng)。本產品僅供進一步科研使用,不得用于診斷、治療、臨床、家庭及其它用途。

產品說明

產品形態(tài):液體

產品濃度:1×

產品規(guī)格:100mL/125mL×4

細菌檢測:陰性

真菌檢測:陰性

支原體檢測:陰性

細胞生長實驗:細胞生長良好,形態(tài)正常

內毒素含量(EU/mL):≤3

儲存條件:2~8℃,避光儲存

運輸條件:冰袋冷藏運輸

有效期:3個月

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實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
公司產品僅用于科研

PSG6 Antibody Blocking Peptide妊娠特異性糖蛋白6封閉多肽

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Villin Antibody Blocking Peptide絨毛蛋白封閉多肽

Villin Antibody Blocking Peptide絨毛蛋白封閉多肽

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GCM1 Antibody Blocking Peptide絨毛膜特異性轉錄因子GCMa封閉多肽

lysozyme Antibody Blocking Peptide封閉多肽

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