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大鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-21 11:14:09瀏覽次數(shù):275

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來源 腦組織
大鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:HL 60(hl-60)人早幼粒白血病細(xì)胞人細(xì)胞系1×106HL-7702[L-02]人肝細(xì)胞人細(xì)胞系1×106HMC3人小膠質(zhì)細(xì)胞人細(xì)胞系1×106HMEC-1人微血管內(nèi)皮細(xì)胞株人細(xì)胞系1×106HO-8910PM人高轉(zhuǎn)移卵巢癌細(xì)胞人細(xì)胞系1×106

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

大鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

腦組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

分離自腦組織;腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞是血腦屏障的主要組成成分,它是組成腦微血管腔面單層扁平上皮樣細(xì)胞,能夠限制可溶性物質(zhì)和細(xì)胞等從血液進(jìn)入大腦,大腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞與外周內(nèi)皮細(xì)胞相比具有一些相同特性。它所產(chǎn)生和分泌的生物活性物質(zhì)對(duì)維持血管張力、調(diào)節(jié)血壓、抗血栓形成等有重要作用,在腦血管疾病的發(fā)病機(jī)制中有重要病理生理學(xué)意義。與外周內(nèi)皮細(xì)胞相同,大腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞表面表達(dá)細(xì)胞粘附分子,調(diào)控白細(xì)胞進(jìn)入大腦。由于微血管內(nèi)皮細(xì)胞的器官特異性,內(nèi)皮細(xì)胞通常取源于疾病研究的相關(guān)組織。其主要特征如下:①腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞存在許多細(xì)胞間緊密連接,產(chǎn)生很高的跨內(nèi)皮阻抗,延遲細(xì)胞旁的通量;②腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞缺乏內(nèi)皮細(xì)胞的窗孔結(jié)構(gòu),其液相物質(zhì)胞飲水平較低;③腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞具有不對(duì)稱定位和載體介導(dǎo)轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng),從而產(chǎn)生“兩極分化"的表現(xiàn)型。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用膠原-中性dan白混合消化法結(jié)合密度梯度離心法、后通過內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  內(nèi)皮細(xì)胞樣

傳代特性  可傳2-3代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大?。?/span>
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

磷化腺苷單磷活化蛋白激β1抗體 富含GC啟動(dòng)子結(jié)合蛋白1/血管壁相連蛋白封閉多肽 人抗肌內(nèi)膜抗體IgA(EMAIgA)ELISA試劑盒

HER4抗體 應(yīng)激誘導(dǎo)磷蛋白1封閉多肽 人抗糖蛋白抗體(GP)試劑盒ELISA

富半胱氨肝結(jié)合蛋白61抗體 金屬調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄因子2封閉多肽 人抗單核細(xì)胞抗體(AMA)ELISA檢測(cè)試劑盒

轉(zhuǎn)錄因子AP2α+β抗體 溶質(zhì)載體家族25成員43封閉多肽 人氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)elisa試劑盒

英文名稱: PSD93/DLG2 鳥氨氨甲?;€粒體封閉多肽 人EJ抗體/抗甘氨酰tRNA合成抗體(EJ/GlyRS)試劑盒elisa

磷化雌激受體α抗體 芳基硫酯B封閉多肽 人低密度脂蛋白免疫復(fù)合物(LDL-IC)檢測(cè)試劑盒elisa

細(xì)胞色P450 3A4抗體 同類型染色單體凝聚蛋白4封閉多肽 人抗增殖細(xì)胞核抗原抗體(PCNA)ELISA試劑盒

鋅指蛋白93抗體 突觸泡蛋白2C封閉多肽 人抗IgE受體抗體試劑盒ELISA

G蛋白偶聯(lián)受體84抗體 鈣粘蛋白相關(guān)家庭成員5/μ-protocadherin封閉多肽 人抗IVIgG抗體ELISA檢測(cè)試劑盒

神經(jīng)元特異性烯醇化單克隆抗體 腺苷激-1封閉多肽 人抗心肌抗體(AMA)elisa試劑盒

一氧化氮合成-2(誘導(dǎo)型)抗體 天冬氨-胱氨特異性家族封閉多肽 人抗甲狀腺微粒體抗體(ATMA/TMAB)試劑盒elisa

活化半胱胺蛋白-3抗體 磷二酯7B封閉多肽 人抗甲狀腺球蛋白抗體(ATGA/TGAB)檢測(cè)試劑盒elisa

細(xì)胞凋亡抑制因子單克隆抗體 葡萄糖-6磷轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白封閉多肽 人谷氨脫羧自身抗體(GAD-Ab)ELISA試劑盒

環(huán)指蛋白156抗體 克侖特羅牛血清白蛋白偶聯(lián)物 人抗血小板抗體IgG/M/A(PA-IgG/M/A)試劑盒ELISA

精子頂體前體蛋白抗體 核轉(zhuǎn)錄因子SOX8封閉多肽 人抗淋巴細(xì)胞球蛋白(ALG)ELISA檢測(cè)試劑盒

磷化SH2結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)化蛋白1抗體 細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SMAD5封閉多肽 人抗胰(AT)elisa試劑盒

核受體RXRα抗體 Tuberin樣蛋白1封閉多肽 人抗核糖體P蛋白抗體(ARPA/Rib-P)試劑盒elisa

血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子抗體 磷二酯6β封閉多肽 人抗核糖體P蛋白抗體(ARPA/Rib-P)檢測(cè)試劑盒elisa
大鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞kyse30人食道癌細(xì)胞英文名稱:kyse301×10648%1640+48%F-12+2%FBS+1%L-+1%P/S提供STR鑒定報(bào)告

kyse150人食管鱗癌細(xì)胞英文名稱:kyse1501×10648.5%1640+48.5%F-12+2%FBS+1%P/S提供STR鑒定報(bào)告

KYSE-410人食道鱗狀細(xì)胞癌英文名稱:KYSE-4101×1061640+5-10%FBS+1%P/S +1%L- 提供STR鑒定報(bào)告

Li-7人肝癌細(xì)胞英文名稱:Li-71×1061640+10%FBS+1% L-+1%鈉+1%P/S 提供STR鑒定報(bào)告

LN229人膠質(zhì)瘤細(xì)胞英文名稱:LN2291×106DMEM+5%FBS+1%P/S  提供STR鑒定報(bào)告

LN229+LUC人膠質(zhì)瘤細(xì)胞熒光標(biāo)記英文名稱:LN229+LUC1×106DMEM+5%FBS+1%P/S  提供LN229細(xì)胞STR鑒定報(bào)告

LNCaP clone FGC人前列腺癌細(xì)胞英文名稱:LNCaP clone FGC1×1061640+10%FBS+1% L-+1%鈉+1%P/S 提供STR鑒定報(bào)告

 


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