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小鼠羊膜間質(zhì)細(xì)胞

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更新時間:2023-04-21 11:48:23瀏覽次數(shù):251

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 胎盤組織
小鼠羊膜間質(zhì)細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:T98G 人膠質(zhì)母細(xì)胞瘤人細(xì)胞系1×106TCCSUP人膀胱癌細(xì)胞人細(xì)胞系1×106TE-1人食管癌細(xì)胞人細(xì)胞系1×106TE-12人食管癌細(xì)胞人細(xì)胞系1×106THLE-2人正常肝細(xì)胞人細(xì)胞系1×106

詳細(xì)介紹

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產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

小鼠羊膜間質(zhì)細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

胎盤組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡介:

分離自胎盤組織;胎盤(placenta)是哺乳動物妊娠期間由胚胎的胚膜和母體子宮內(nèi)膜聯(lián)合長成的母子間交換物質(zhì)的過渡性器官,由羊膜、葉狀絨毛膜和底蛻膜構(gòu)成。胎兒在子宮中發(fā)育,依靠胎盤從母體取得營養(yǎng),而雙方保持相當(dāng)?shù)莫毩⑿?。胎盤還產(chǎn)生多種維持妊娠的激素,是一個重要的內(nèi)分泌器官。有些爬行類和魚類也以胎生方式繁殖后代,胚胎生長出一些輔助結(jié)構(gòu)如卵黃囊、鰓絲等與母體組織緊密結(jié)合,以達(dá)到母子間物質(zhì)的交換,這樣的結(jié)構(gòu)稱假胎盤。羊膜是胎盤的內(nèi)層,與眼結(jié)膜組織結(jié)構(gòu)相似,含有眼表上皮細(xì)胞,包括結(jié)膜細(xì)胞和角膜上皮細(xì)胞生長所需要的物質(zhì),其光滑,無血管、神經(jīng)及淋巴,具有一定的彈性;在電鏡下,其分為五層:上皮層、基底膜、致密層、纖維母細(xì)胞層和海綿層,羊膜基底膜和羊膜羊膜基質(zhì)層含有大量不同的膠元,主要為Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ型膠原和纖維粘連蛋白、層粘連蛋白等成份。羊膜細(xì)胞主要由羊膜上皮細(xì)胞和羊膜間充質(zhì)細(xì)胞組成,均具有多分化潛能,可轉(zhuǎn)化為神經(jīng)元,且還有合成、釋放生物活性物質(zhì)和神經(jīng)營養(yǎng)因子的功能。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用胰dan白 - 膠原聯(lián)合消化法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實驗室分離的經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  成纖維細(xì)胞樣

傳代特性  可傳3代左右

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

孕激受體膜相關(guān)元件抗體 磷化磷脂酰肌醇激PIK3-γ封閉多肽  人上皮膜抗原(EMA)ELISA試劑盒

去整合樣金屬11抗體 磷化糖原合激3β封閉多肽 人凝聚(CLU)試劑盒ELISA

英文名稱: alpha smooth muscle Actin 磷化親環(huán)蛋白(親環(huán))PPIG封閉多肽 人OJ抗體/抗異亮氨酰tRNA合成抗體(OJ/IleRS)ELISA檢測試劑盒

英文名稱: Mad2L1 tRNA剪接內(nèi)切2封閉多肽 人抗著絲點抗體(ACA/CENP)elisa試劑盒

磷化原癌基因c-Jun抗體 精子赤道區(qū)域蛋白1封閉多肽 人肌細(xì)胞生成(MYOG)試劑盒elisa

磷化整合β1(CD29)抗體 磷化卡波西氏肉瘤皰疹病毒潛伏核抗原相互作用蛋白1封閉多肽 人A組鏈球菌菌壁多糖抗體(ASP)檢測試劑盒elisa

銅代謝結(jié)構(gòu)域蛋白3抗體 PTD016蛋白封閉多肽 人活化蛋白C抵抗(APCR)ELISA試劑盒

端粒體復(fù)制結(jié)合因子1抗體 高遷移率族蛋白N4封閉多肽 人N端外顯肽(Ext-N)試劑盒ELISA

白細(xì)胞介4受體抗體 肌球蛋白4封閉多肽 人分泌成分(SC)ELISA檢測試劑盒

2型補體受體(CD21)抗體 NADH氧化還原輔10封閉多肽 人二磷腺苷(ADP)elisa試劑盒

補體C1S鏈多肽抗體 HOXB4封閉多肽 人蛋白聚糖(PG)試劑盒elisa

代謝型谷氨受體5B抗體 白血病相關(guān)蛋白18/癌蛋白18封閉多肽 人吡啶酚(PYD)檢測試劑盒elisa

原鈣粘蛋白β12抗體 NDST2蛋白封閉多肽 人5羥基吲哚乙(5-HIAA)ELISA試劑盒

活化半胱胺蛋白-3抗體 細(xì)胞色B561結(jié)構(gòu)域蛋白1封閉多肽 人12羥二十烷四烯(12-HETE)試劑盒ELISA

前列腺性磷抗體 乳腺癌雌激調(diào)控蛋白GREB1封閉多肽 人羥脯氨(Hyp)ELISA檢測試劑盒

磷化蛋白激AKT3抗體 免疫球蛋白樣結(jié)構(gòu)域受體1封閉多肽 人一氧化氮(NO)elisa試劑盒

磷化腫瘤抑制基因P53抗體 磷化真核啟動因子2α封閉多肽 人上皮中性粒細(xì)胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)試劑盒elisa

干擾調(diào)節(jié)因子3 磷化組蛋白H3封閉多肽 人維生C(VC)檢測試劑盒elisa
小鼠羊膜間質(zhì)細(xì)胞NRK-49F正常大鼠腎細(xì)胞英文名稱:NRK-49F1×106DMEM+10%FBS+1%P/S(鼠源種屬鑒定)

NRK-52E大鼠腎細(xì)胞英文名稱:NRK-52E1×106DMEM(含NaHCO3 1.5g/L )+5%FBS+1%P/S (鼠源種屬鑒定)

PC12低分化大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞 低分化 英文名稱:PC12低分化1×106IMDM(或1640)+10%FBS+1%P/S(鼠源種屬鑒定)

PC12低分化+GFP大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞低分化+GFP英文名稱:PC12低分化+GFP1×106IMDM(或1640)+10%FBS+1%P/S(鼠源PC12低分化種屬鑒定)

PC12高分化大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞 高分化 英文名稱:PC12高分化1×1061640+10%FBS+1%P/S (鼠源種屬鑒定)

PC12未分化大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞 未分化 英文名稱:PC12未分化1×1061640+10%HS(馬血清)+5%FBS+1%P/S (鼠源種屬鑒定)

RBL-2H3大鼠嗜堿性白血病細(xì)胞英文名稱:RBL-2H31×106MEM+15%FBS+1%P/S (鼠源種屬鑒定)


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