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人腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞

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更新時間:2023-04-23 09:57:05瀏覽次數(shù):249

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 腦組織
人腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:T/G HA-VSMC (人血管平滑肌細(xì)胞)1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶SW872 (人脂肪肉瘤細(xì)胞) (L15) (STR鑒定正確)1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶SK-MES-1 (人肺鱗癌細(xì)胞) (STR鑒定正確)1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶MPC-11 (小鼠漿細(xì)胞瘤)1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶SW 780 [SW-780, SW780]

詳細(xì)介紹

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡介:

分離自腦組織;腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞是血腦屏障的主要組成成分,它是組成腦微血管腔面單層扁平上皮樣細(xì)胞,能夠限制可溶性物質(zhì)和細(xì)胞等從血液進入大腦,大腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞與外周內(nèi)皮細(xì)胞相比具有一些相同特性。它所產(chǎn)生和分泌的生物活性物質(zhì)對維持血管張力、調(diào)節(jié)血壓、抗血栓形成等有重要作用,在腦血管疾病的發(fā)病機制中有重要病理生理學(xué)意義。與外周內(nèi)皮細(xì)胞相同,大腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞表面表達(dá)細(xì)胞粘附分子,調(diào)控白細(xì)胞進入大腦。由于微血管內(nèi)皮細(xì)胞的器官特異性,內(nèi)皮細(xì)胞通常取源于疾病研究的相關(guān)組織。其主要特征如下:①腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞存在許多細(xì)胞間緊密連接,產(chǎn)生很高的跨內(nèi)皮阻抗,延遲細(xì)胞旁的通量;②腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞缺乏內(nèi)皮細(xì)胞的窗孔結(jié)構(gòu),其液相物質(zhì)胞飲水平較低;③腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞具有不對稱定位和載體介導(dǎo)轉(zhuǎn)運系統(tǒng),從而產(chǎn)生“兩極分化"的表現(xiàn)型。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用膠原-中性dan白混合消化法結(jié)合密度梯度離心法、后通過內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實驗室分離的經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  內(nèi)皮細(xì)胞樣

傳代特性  可傳2-3代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

人腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

腦組織

1.png

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

磷化TRAF2和NCK激相互作用蛋白抗體 生肌決定因子Myf5封閉多肽 

微管蛋白β輔助因子D抗體 磷化過氧化活化增生受體γ封閉多肽 

蝮蛇蛇毒蛋白抗體 核纖層蛋白B(細(xì)胞核膜標(biāo)志物)封閉多肽 

甘丙肽受體3抗體 磷化表皮生長因子受體封閉多肽 

氧化應(yīng)激反應(yīng)蛋白1抗體 凋亡加強結(jié)構(gòu)域蛋白12封閉多肽 

原鈣粘附蛋白17抗體 肥大細(xì)胞類胰封閉多肽 

ETS結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)錄因子FEV抗體 驅(qū)動蛋白家族成員26B封閉多肽 

選擇性剪接因子3亞基1抗體 7跨膜蛋白超家族成員1封閉多肽 

多配體聚糖4抗體 富含亮氨重復(fù)序列跨膜結(jié)構(gòu)域2封閉多肽 

TBC結(jié)構(gòu)域TBCD4蛋白抗體 轉(zhuǎn)錄因子SOX10封閉多肽 

eIF5A2蛋白抗體 增生肉蛋白1封閉多肽 

線粒體核糖體蛋白L20抗體 鋅轉(zhuǎn)運蛋白1封閉多肽 

肌球蛋白13抗體 絲氨/蘇氨蛋白磷1調(diào)節(jié)亞基10封閉多肽 

丙型肝炎病毒NS5A/Hepatitis C Virus NS5抗體 抑瘤M受體封閉多肽 

氨基丁轉(zhuǎn)運蛋白VGAT抗體 緊密連接蛋白4封閉多肽 

促黑細(xì)胞激γ抗體 重組人α-中連蛋白 

麻瘋病和帕金森氏病共同調(diào)節(jié)蛋白抗體 磷化HER2受體封閉多肽 

MPV17L2蛋白抗體 6號染色體開放閱讀框211封閉多肽 
人腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞CCRF-CEM [CCRF CEM]細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4CCRF-CEM [CCRF CEM]細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持CCRF-CEM [CCRF CEM]細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含CCRF-CEM [CCRF CEM]細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于CCRF-CEM [CCRF CEM]細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

SRSV/3T3細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4SRSV/3T3細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持SRSV/3T3細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含SRSV/3T3細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于SRSV/3T3細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

小鼠腸動脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL小鼠腸動脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持小鼠腸動脈內(nèi)皮細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含小鼠腸動脈內(nèi)皮細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于小鼠腸動脈內(nèi)皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

U-118 MG細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4U-118 MG細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持U-118 MG細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含U-118 MG細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于U-118 MG細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

大鼠肺成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基100mL大鼠肺成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持大鼠肺成纖維細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含大鼠肺成纖維細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于大鼠肺成纖維細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

小鼠腦微血管周細(xì)胞培養(yǎng)基100mL小鼠腦微血管周細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持小鼠腦微血管周細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含小鼠腦微血管周細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于小鼠腦微血管周細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

MH-S細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4MH-S細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持MH-S細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含MH-S細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于MH-S細(xì)胞的體外培養(yǎng)。
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

 


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