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大鼠腦靜脈血管平滑肌細胞

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更新時間:2023-04-21 12:58:28瀏覽次數(shù):232

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 腦靜脈組織
大鼠腦靜脈血管平滑肌細胞的相關(guān)產(chǎn)品:BxPC-3人原位胰腺腺癌細胞專用培養(yǎng)基細胞培養(yǎng)基500MLC666-1人鼻咽癌細胞專用培養(yǎng)基細胞培養(yǎng)基125MLC666-1人鼻咽癌細胞專用培養(yǎng)基細胞培養(yǎng)基500MLC-33A人宮頸癌細胞專用培養(yǎng)基細胞培養(yǎng)基125MLC-33A人宮頸癌細胞專用培養(yǎng)基細胞培養(yǎng)基500ML

詳細介紹

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自腦靜脈組織;與腦動脈相比,腦靜脈管壁較薄。與身體其他部位的靜脈不同,腦靜脈管壁中沒有靜脈瓣,靜脈血的回流依賴高位的勢能。腦靜脈血的回流路徑可以歸納為:大部腦靜脈血經(jīng)腦深部靜脈和腦血竇流入頸內(nèi)靜脈;小部腦靜脈血經(jīng)眼部翼狀靜脈叢,進入靜脈導(dǎo)血管再到頭皮,后流入椎管中的椎旁靜脈系統(tǒng)。腦靜脈系統(tǒng)有大量交通枝靜脈叢,即使兩側(cè)頸內(nèi)靜脈都被阻塞,大腦靜脈血仍可經(jīng)椎靜脈和頸外靜脈系統(tǒng)完成其回流。腦靜脈平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見細胞貼壁伸展,細胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細胞匯合,多數(shù)細胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,高低起伏;細胞密度低時,常交織成網(wǎng)狀;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用胰dan白 - 膠原聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實驗室分離的經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態(tài)  成纖維細胞樣

傳代特性  可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

大鼠腦靜脈血管平滑肌細胞

5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

腦靜脈組織

1.png

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

英文名稱: PCNA (Nuclear Loading Control) 鉀離子通道調(diào)節(jié)蛋白KCNRG封閉多肽 大鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISA試劑盒

絲裂原活化蛋白激2抗體 HLA Class II DR4封閉多肽 大鼠前列腺性磷(PAP)試劑盒ELISA

磷化谷氨受體2B抗體 KIAA1751蛋白封閉多肽 大鼠游離前列腺特異性抗原(fPSA)ELISA檢測試劑盒

英文名稱: IRF3 叉頭蛋白N2封閉多肽 大鼠前列腺特異性抗原(PSA)elisa試劑盒

N-鈣粘附分子抗體 小核糖核蛋白SNRPC封閉多肽 大鼠卵巢癌標志物CA125試劑盒elisa

叉頭蛋白O1抗體 DISC1 N端封閉多肽 大鼠乳腺癌標志物-CA153檢測試劑盒elisa

英文名稱: phospho-STAT1 (Ser727) 補體C3dg片段封閉多肽 大鼠胃腸癌標志物CA199ELISA試劑盒

19號染色體開放閱讀框67抗體 神經(jīng)肽 Y(1-36)多肽 大鼠血紅氧合1(HO-1)試劑盒ELISA

PSD95結(jié)合蛋白2抗體 磷化活化復(fù)制因子2封閉多肽 大鼠磷脂A2(PL-A2)ELISA檢測試劑盒

磷化細胞分裂周期蛋白25C抗體 中心體蛋白72封閉多肽 大鼠組織因子途徑抑制物(TFPI)elisa試劑盒

轉(zhuǎn)錄因子E2F-5抗體 腸道病毒71型/手足口病病毒VP4抗體封閉多肽 大鼠水通道蛋白5(AQP-5)試劑盒elisa

Ras相關(guān)區(qū)域家族1A抗體 鋅指蛋白蛋白474封閉多肽 大鼠水通道蛋白4(AQP-4)檢測試劑盒elisa

鞘脂激活蛋白原抗體 鉀離子通道蛋白2封閉多肽 大鼠水通道蛋白3(AQP-3)ELISA試劑盒

英文名稱: SARS-CoV-2 () Spike S1 巨噬細胞炎癥因子1α封閉多肽 大鼠水通道蛋白1(AQP-1)試劑盒ELISA

同源蛋白UNCX抗體 激活受體2A封閉多肽 大鼠水通道蛋白0(AQP-0)ELISA檢測試劑盒

乙?;M蛋白H2B抗體 重組小鼠膠質(zhì)細胞谷氨運載蛋白2 大鼠水通道蛋白2(AQP-2)elisa試劑盒

環(huán)腺苷應(yīng)答元件結(jié)合蛋白抗體 EPB41L5蛋白封閉多肽 大鼠甲狀腺球蛋白(TG)試劑盒elisa

液泡分選蛋白4抗體 類胰δ1封閉多肽 大鼠抑制A(INH-A)檢測試劑盒elisa
大鼠腦靜脈血管平滑肌細胞KYSE-410人食道鱗狀癌細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:KYSE-410細胞專用培養(yǎng)基125ML

KYSE-410人食道鱗狀癌細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:KYSE-410細胞專用培養(yǎng)基500ML

Li-7人肝癌細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:Li-7細胞專用培養(yǎng)基125ML

Li-7人肝癌細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:Li-7細胞專用培養(yǎng)基500ML

LN229人膠質(zhì)瘤細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:LN229細胞專用培養(yǎng)基125ML

LN229人膠質(zhì)瘤細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:LN229細胞專用培養(yǎng)基500ML

LN229+LUC人膠質(zhì)瘤熒光標記細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:LN229+LUC細胞專用培養(yǎng)基125ML
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

 


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