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大鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-21 16:25:00瀏覽次數(shù):216

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來源 腦組織
大鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:小鼠腸粘膜上皮細(xì)胞原代細(xì)胞5×105小鼠腹腔巨噬細(xì)胞原代細(xì)胞5×105小鼠腎小管上皮細(xì)胞原代細(xì)胞5×105小鼠腎小球系膜細(xì)胞原代細(xì)胞5×105小鼠腎小球內(nèi)皮細(xì)胞原代細(xì)胞5×105

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

大鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

腦組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

分離自腦組織;大腦分左右兩個(gè)半球,大腦皮質(zhì)(灰質(zhì))覆蓋著每個(gè)大腦半球的大部分,它是神經(jīng)元胞體集中的地方。內(nèi)部則是由神經(jīng)纖維或髓鞘構(gòu)成的白質(zhì)。每一個(gè)半球都有三個(gè)面,即外側(cè)面(約占整個(gè)皮質(zhì)面積的1/3)、內(nèi)側(cè)面和底面(占2/3的面積);半球表面有很多深淺不等的溝或裂,溝或裂之間的隆起叫回,它們大大增加了大腦的表面積;大腦外側(cè)面重要的溝、裂有大腦外側(cè)裂、頂枕裂和中央溝。由于三溝裂之界隔,使大腦皮質(zhì)組分為額葉、頂葉、顳葉、枕葉四大部分。小膠質(zhì)細(xì)胞是神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的一種,相當(dāng)于腦和脊髓中的巨噬細(xì)胞,是中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)中的第一道也是主要的一道免疫防線。小膠質(zhì)細(xì)胞大約占大腦中的神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的20%,小膠質(zhì)細(xì)胞不停地清除著中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的損壞的神經(jīng),斑塊及感染性物質(zhì)。無數(shù)臨床上和理學(xué)研究表明激活的小膠質(zhì)細(xì)胞在神經(jīng)退化類疾病的發(fā)病機(jī)理中起到十分重要的作用,如帕金森病、多發(fā)性硬化和阿茲海默癥等。但是過多激活或失控的小膠質(zhì)細(xì)胞會(huì)引起神經(jīng)毒性。它們是促炎因子和氧化應(yīng)激的重要來源,如腫瘤壞死因子(TNF),一氧化氮,白介素等有神經(jīng)毒性的物質(zhì)。神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞的主要功能:①神經(jīng)膠質(zhì)出現(xiàn)在大腦發(fā)育早期向成熟階段轉(zhuǎn)化的過程中;②當(dāng)程序性細(xì)胞死亡時(shí),或在大腦發(fā)育的過程中,中樞神經(jīng)系統(tǒng)受損或受到病理損壞時(shí),神經(jīng)膠質(zhì)可做為大腦的巨噬細(xì)胞;③膠質(zhì)細(xì)胞能在Ⅱ類組織相容性復(fù)合體表達(dá)CD-4陽性T細(xì)胞時(shí)表達(dá)抗原,能進(jìn)行Fc介導(dǎo)的巨噬作用,并且與造血細(xì)胞和巨噬細(xì)胞組織共享抗原。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用消化法結(jié)合差速貼壁法,在培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)缺失數(shù)天后經(jīng)搖床震蕩收集脫落細(xì)胞制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞經(jīng)CD11b免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  梭形、多角形

傳代特性  屬于終末分化細(xì)胞;屬于不增殖細(xì)胞群

消化液  (12mM)

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大?。?/span>
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

乳脫氫抗體 SAMD4B蛋白封閉多肽 

腫瘤抑抗體 核基質(zhì)結(jié)合區(qū)結(jié)合蛋白1封閉多肽  

β-連環(huán)蛋白/β-連環(huán)/β鏈接單克隆抗體 核苷交換因子相關(guān)蛋白封閉多肽 

磷化血管生成受體2抗體 細(xì)胞角蛋白73封閉多肽 

NCKAP5蛋白抗體 跨膜蛋白NOTCH4配體封閉多肽 

ATP結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)因子1抗體 ATP依賴RNA解旋DDX46封閉多肽 

蛋白磷2A-B55α抗體 重組人3-磷甘油醛脫氫蛋白 

CD68抗體 丙氨蛋白激C底物Marcks封閉多肽 

泛結(jié)合7相互作用蛋白5抗體 細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子Smad-1封閉多肽 

英文名稱: Procalcitonin(PCT) 酪蛋白激1結(jié)合蛋白封閉多肽 

防御β-113/β-defensin 113抗體 二甲基組蛋白H2B K5封閉多肽 

造血干細(xì)胞抗原CD133相關(guān)蛋白抗體 細(xì)胞分裂周期2樣蛋白激5封閉多肽 

松弛肽2/松弛2抗體 黑色瘤相關(guān)抗原gp100封閉多肽 

單核細(xì)胞趨化蛋白1抗體 細(xì)胞骨架相關(guān)蛋白4封閉多肽 

Saitohin蛋白抗體 HS3ST3B1蛋白封閉多肽 

交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian 半胱胺蛋白-6封閉多肽 

中心體相關(guān)蛋白激Nek2抗體 磷化原癌基因c-Raf封閉多肽 

DMRT2蛋白抗體 磷化腫瘤易感候選基因3封閉多肽 
大鼠神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞大鼠脊髓神經(jīng)少突膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基100mL大鼠脊髓神經(jīng)少突膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持大鼠脊髓神經(jīng)少突膠質(zhì)細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含大鼠脊髓神經(jīng)少突膠質(zhì)細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于大鼠脊髓神經(jīng)少突膠質(zhì)細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

豬主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL豬主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持豬主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含豬主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于豬主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

BS-C-1細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4BS-C-1細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持BS-C-1細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含BS-C-1細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于BS-C-1細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

OKT 11細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4OKT 11細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持OKT 11細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含OKT 11細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于OKT 11細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

OE19細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4OE19細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持OE19細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含OE19細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于OE19細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

KGN細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4KGN細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持KGN細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含KGN細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于KGN細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

M-7細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4M-7細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持M-7細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含M-7細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于M-7細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

 


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