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兔骺軟骨細胞

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更新時間:2023-04-21 12:57:48瀏覽次數(shù):257

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 生長板組織
兔骺軟骨細胞的相關(guān)產(chǎn)品:BJ人皮膚成纖維細胞專用培養(yǎng)基細胞培養(yǎng)基500MLBIU-87人膀胱癌細胞專用培養(yǎng)基細胞培養(yǎng)基125MLBIU-87人膀胱癌細胞專用培養(yǎng)基細胞培養(yǎng)基500MLBT-474人乳腺導(dǎo)管癌細胞專用培養(yǎng)基細胞培養(yǎng)基125MLBT-474人乳腺導(dǎo)管癌細胞專用培養(yǎng)基細胞培養(yǎng)基500ML

詳細介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

兔骺軟骨細胞

5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

生長板組織

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自骨骺生長板;骨骺生長板位于長骨兩端骨骺和骨干之間的軟骨組織,其中的骺軟骨細胞可分裂、成熟、肥大,終被骨組織所替換,對于長骨生長具有重要作用。幼稚的骺軟骨細胞位于軟骨組織的表層,單個分布、體積較小、呈橢圓形,長軸與軟骨表面平行,越向深層的骺軟骨細胞體積之間增大呈圓形,細胞核圓形或卵圓形,染色淺,細胞質(zhì)弱嗜堿性,常見數(shù)量不一的脂滴。成熟的骺軟骨細胞多2-8個成群分布于軟骨陷窩內(nèi),這些骺軟骨細胞由同一個母細胞分裂增殖而成,稱為同源細胞群。電鏡下,骺軟骨細胞有突起和皺褶,細胞質(zhì)內(nèi)有大量的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和發(fā)達的高爾基復(fù)合體及少量的線粒體。在組織切片中,骺軟骨細胞收縮為不規(guī)則形,在軟骨囊和細胞之間出現(xiàn)較大的腔隙。體外培養(yǎng)的骺軟骨細胞對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用膠原 - 中性dan白聯(lián)合消化并軟骨細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實驗室分離的經(jīng)Ⅱ型膠原蛋白免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    3-4天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態(tài)  梭形、多角形

傳代特性  可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

微管相關(guān)蛋白1A抗體 磷化粘著斑激封閉多肽 大鼠血紅氧合2(HO-2)ELISA試劑盒

增生肉蛋白1抗體 細胞色CYP3A1封閉多肽 大鼠骨膠原交聯(lián)(Cr)試劑盒ELISA

磷化腺苷單磷活化蛋白激α2抗體 磷化DNA甲基轉(zhuǎn)移-3α封閉多肽 大鼠Ⅰ型前膠原C末端肽(CⅠCP)ELISA檢測試劑盒

卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白46抗體 著絲粒蛋白S封閉多肽 大鼠脫氧吡啶酚/脫氧吡啶啉(DPD)elisa試劑盒

脫中胚蛋白抗體 橋粒糖蛋白4封閉多肽 大鼠吡啶交聯(lián)物(PY)試劑盒elisa

血管內(nèi)皮生長因子抗體 B細胞遷移基因2封閉多肽 大鼠骨橋(OPN)檢測試劑盒elisa

磷化孕激受體抗體 Toll樣受體1封閉多肽 大鼠骨特異性堿性磷B(ALP-B)ELISA試劑盒

跨膜受體蛋白Notch-3抗體 腺病毒早期E1A蛋白封閉多肽 大鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR/CD71)試劑盒ELISA

英文名稱: Cyclophilin B(Loading Control) 前列腺E受體蛋白4封閉多肽 大鼠半胱氨抑制劑/胱抑C(Cys-C)ELISA檢測試劑盒

泛蛋白連接D2抗體 鈣粘蛋白28封閉多肽 大鼠第八因子相關(guān)抗原(FⅧAg)elisa試劑盒

絲裂原活化蛋白激磷-2抗體 原鈣粘附蛋白11X封閉多肽 大鼠激M2型同工(M2-PK)試劑盒elisa

9號染色體開放閱讀框72抗體 G蛋白偶聯(lián)受體TGR7蛋白封閉多肽 大鼠乙酰受體抗體(AChRab)檢測試劑盒elisa

PRPF4蛋白抗體 細胞核轉(zhuǎn)錄因子X盒結(jié)合蛋白封閉多肽 大鼠γ氨基丁(GABA)ELISA試劑盒

遺傳性血色病蛋白相關(guān)蛋白1抗體 膜粘連蛋白11封閉多肽 大鼠5羥色胺(5-HT)試劑盒ELISA

堿性成纖維細胞生長因子抗體 生長抑多肽 大鼠P物質(zhì)受體(SP-R)ELISA檢測試劑盒

基質(zhì)金屬-7抗體 豬藍耳病病毒GP5蛋白封閉多肽 大鼠P物質(zhì)(SP)elisa試劑盒

驅(qū)動蛋白家族蛋白13B抗體 EAT2蛋白封閉多肽 大鼠αL巖藻糖苷(AFU)試劑盒elisa

淋巴細胞抗原6G抗體 鋅指蛋白144封閉多肽 大鼠甲狀腺過氧化物(TPO)檢測試劑盒elisa
兔骺軟骨細胞KGN人卵巢顆粒瘤細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:KGN細胞專用培養(yǎng)基125ML

KGN人卵巢顆粒瘤細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:KGN細胞專用培養(yǎng)基500ML

KLE人子宮內(nèi)膜癌細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:KLE細胞專用培養(yǎng)基125ML

KLE人子宮內(nèi)膜癌細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:KLE細胞專用培養(yǎng)基500ML

KNS-89人腦膠質(zhì)瘤細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:KNS-89細胞專用培養(yǎng)基125ML

KNS-89人腦膠質(zhì)瘤細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:KNS-89細胞專用培養(yǎng)基500ML

KTC-1人甲狀腺癌細胞專用培養(yǎng)基英文名稱:KTC-1細胞專用培養(yǎng)基125ML

 


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