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大鼠頜骨成纖維細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-21 13:37:43瀏覽次數(shù):260

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來(lái)源 頜骨組織
大鼠頜骨成纖維細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:Mahlavu人肝癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500MLMCF-10A人乳腺上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500MLMCF-7人乳腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基125MLMCF-7人乳腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500MLMCF-7/Adr人乳腺癌阿霉耐藥細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基125ML

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來(lái)源

大鼠頜骨成纖維細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

頜骨組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

分離自頜骨組織;頜骨,是指頜部的骨頭,分為上頜骨和下頜骨。構(gòu)成口腔上下部的骨頭和肌肉組織,上部叫上頜,下部叫下頜。成纖維細(xì)胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來(lái)。成纖維細(xì)胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛,細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng),在一定條件下,它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化;成纖維細(xì)胞對(duì)不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的表皮成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁,其中部分開(kāi)始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起;6h后細(xì)胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長(zhǎng),不聚集成團(tuán);細(xì)胞生長(zhǎng)迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),細(xì)胞排列緊密,有的交叉重疊生長(zhǎng),平坦、胞體較大,細(xì)胞質(zhì)透明,細(xì)胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細(xì)胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀;細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用胰dan白 - 膠原混合消化后差速貼壁制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  成纖維細(xì)胞樣

傳代特性  可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

1.png

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

轉(zhuǎn)錄因子ELYS蛋白抗體 GTP結(jié)合蛋白10封閉多肽 人鎂依賴性磷1(MDP1)ELISA試劑盒

熱休克因子蛋白4抗體 9號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框59封閉多肽 人梅毒螺旋體(TP)抗體(IgM)試劑盒ELISA

降鈣單克隆抗體 鋅指蛋白148封閉多肽 人梅毒螺旋體(TP)抗體(IgG)ELISA檢測(cè)試劑盒

高遷移率族蛋白B1抗體 短鏈脫氫/還原家族X(qián)封閉多肽 人麻疹病毒(MV)抗體(IgM)ELISA試劑盒

泛特異性SENP7抗體 脯氨酰羥化封閉多肽 人麻疹病毒(MV)抗體(IgG)試劑盒ELISA

神經(jīng)細(xì)胞粘附分子配體1重組兔單克隆抗體 γ1氨基丁受體GABAA Rβ1封閉多肽 人落葉型天皰瘡抗體(PF-Ab)檢測(cè)試劑盒elisa

檸檬合成CISY抗體 骨形態(tài)發(fā)生蛋白2受體封閉多肽 人絡(luò)氨(TYR)ELISA試劑盒

乙?;M蛋白H2B (Lys15)鼠單克隆抗體 通用轉(zhuǎn)錄因子3C多肽5/TFIIIC90封閉多肽 人輪狀病毒抗原(RV Ag)試劑盒ELISA

磷化蛋白激B抗體 β-酪蛋白封閉多肽 人輪狀病毒(RV)抗體(IgG)ELISA檢測(cè)試劑盒

G蛋白偶聯(lián)受體43抗體 防御β-108B/β-defensin 108B封閉多肽 人輪狀病毒(RV)IgM ELISA試劑盒

短卷曲螺旋蛋白SCOC抗體 跨膜蛋白176A封閉多肽 人卵清蛋白特異性IgG(OVA sIgG)試劑盒ELISA

結(jié)合轉(zhuǎn)化激活因子CITED1抗體  重組跨膜蛋白Smoothened 人卵清蛋白特異性IgE(OVA sIgE)檢測(cè)試劑盒elisa

線粒體核糖體蛋白L34抗體 絲裂原活化的蛋白激p38β封閉多肽 人卵清白蛋白ELISA試劑盒

COMM結(jié)構(gòu)域蛋白4抗體 鈉通道亞基β4封閉多肽 人卵泡抑樣蛋白1(FSTL-1)試劑盒ELISA

毛發(fā)角蛋白37抗體 肌側(cè)索硬化癥相關(guān)蛋白2(2號(hào)染色體)封閉多肽 人ELISA檢測(cè)試劑盒

核苷結(jié)合蛋白X抗體 嗜乳脂蛋白亞家族2成員A2封閉多肽 人?;D(zhuǎn)移(LCAT)ELISA試劑盒

FAM162A蛋白抗體 Ras-GTP激活蛋白3封閉多肽 人卵巢癌抗原X1(OVX1)試劑盒ELISA

1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框49抗體 磷化乳腺癌易感基因相互作用蛋白1封閉多肽 人氯離子胞內(nèi)通道蛋白4(CLIC4)檢測(cè)試劑盒elisa
大鼠頜骨成纖維細(xì)胞C2C12小鼠成肌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:C2C12細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

C3H/10T1/2 Clone8小鼠胚胎成纖維細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:C3H/10T1/2 Clone8細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

C3H/10T1/2 Clone8小鼠胚胎成纖維細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:C3H/10T1/2 Clone8細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

CT26小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:CT26細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

CT26小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:CT26細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

CT26+LUC小鼠結(jié)腸癌熒光標(biāo)記細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:CT26+LUC細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

CT26+LUC小鼠結(jié)腸癌熒光標(biāo)記細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:CT26+LUC細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

 


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