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人骨髓樹突狀細(xì)胞(成熟DC細(xì)胞)

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更新時間:2023-04-21 11:45:49瀏覽次數(shù):327

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 骨髓
人骨髓樹突狀細(xì)胞(成熟DC細(xì)胞)的相關(guān)產(chǎn)品:SK-NO-1人急性髓系白血病細(xì)胞人細(xì)胞系1×106SK-N-SH人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞人細(xì)胞系1×106SK-OV-3人卵巢癌細(xì)胞人細(xì)胞系1×106SK-OV-3+LUC人卵巢癌細(xì)胞熒光標(biāo)記人細(xì)胞系1×106smmc-7721人肝癌細(xì)胞人細(xì)胞系1×106

詳細(xì)介紹

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產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

人骨髓樹突狀細(xì)胞(成熟DC細(xì)胞)

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

骨髓

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡介:

分離自骨髓;骨髓是機體的造血組織,位于身體的許多骨骼內(nèi)。成年動物的骨髓分兩種:紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細(xì)胞、血小板和各種白細(xì)胞。血小板有止血作用,白細(xì)胞能殺滅與抑制各種病原體,包括細(xì)菌、病毒等;某些淋巴細(xì)胞能制造抗體。因此,骨髓不但是造血器官,它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中,是一種海綿狀的組織,能產(chǎn)生血細(xì)胞的骨髓略呈紅色,稱為紅骨髓。出生時,紅骨髓充滿全身骨髓腔,隨著年齡增大,脂肪細(xì)胞增多,相當(dāng)部分紅骨髓被黃骨髓取代,后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。骨髓DC細(xì)胞是由骨髓單核細(xì)胞誘導(dǎo)而成的;樹突狀細(xì)胞分為成熟樹突狀細(xì)胞和未成熟樹突狀細(xì)胞,典型的未成熟樹突狀細(xì)胞呈半貼壁生長,在GM-CSF、IL4的作用下形成葡萄串樣集落,細(xì)胞大而形態(tài)不規(guī)則,表面皺褶多,亦可見少量短刺狀突,胞內(nèi)細(xì)胞器豐富并可見吞噬泡,具有較強的遷移能力,伴隨有部分未誘導(dǎo)成的單核細(xì)胞,貼壁形態(tài)多樣。而成熟的樹突狀細(xì)胞由未成熟DC進一步經(jīng)TNFα、LPS等誘導(dǎo)而成,多數(shù)呈懸浮生長, 細(xì)胞呈圓形,細(xì)胞體積進一步增大,表面大量粗細(xì)不等的樹枝樣突起(高倍鏡或者電鏡下可觀察到 ),伴隨少量貼壁未成熟細(xì)胞或者單核細(xì)胞。未成熟DC細(xì)胞長時間培養(yǎng)也可能導(dǎo)致自發(fā)分化成熟。DC細(xì)胞尚無特異性細(xì)胞表面分子標(biāo)志,主要通過形態(tài)學(xué)、組合性細(xì)胞表面標(biāo)志、在混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)中能激活初始T細(xì)胞等特征進行鑒定。其中成熟樹突狀細(xì)胞表面高表達(dá)主要組織相容性復(fù)合物(MHC)以及CD80、CD86等共刺激分子,進而激活T淋巴細(xì)胞,誘導(dǎo)免疫應(yīng)答,處于啟動、調(diào)控、并維持免疫應(yīng)答的中心環(huán)節(jié);未成熟樹突狀細(xì)胞具有很強的抗原攝取加工能力,但由于缺乏多種共刺激分子不能使初始T細(xì)胞活化、增殖產(chǎn)生免疫應(yīng)答,不能激活T細(xì)胞的第二信號,可導(dǎo)致T細(xì)胞無能,從而誘導(dǎo)免疫低反應(yīng)或抗原免疫特異性耐受。未成熟樹突狀細(xì)胞表面CD80、CD86、MHC-Ⅱ類分子等共刺激分子表達(dá)較低,一般在30%以下。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用密度梯度離心法分離骨髓單個核細(xì)胞、培養(yǎng)過程添加細(xì)胞因子誘導(dǎo)而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實驗室分離的經(jīng)CD86免疫熒光鑒定、細(xì) 胞 形態(tài)等綜合鑒定,純度可達(dá)80%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  半貼半懸浮

細(xì)胞形態(tài)  圓形,樹突狀

傳代特性  屬于高度分化細(xì)胞;屬于不增殖細(xì)胞群

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

磷化17β羥基類固醇脫氫13抗體 甲基化樣蛋白19封閉多肽 人再生基因蛋白IV(REG-4)ELISA試劑盒

頂膜鈉依賴性膽鹽轉(zhuǎn)運體蛋白抗體 干擾β封閉多肽 人多功能蛋白聚糖(VS)試劑盒ELISA

轉(zhuǎn)錄因子SOX-11蛋白抗體 垂體瘤轉(zhuǎn)化蛋白2封閉多肽 人B細(xì)胞κ輕肽基因增強子核因子抑制因子ε(Nfkbie)ELISA檢測試劑盒

白介2抗體 核孔蛋白Nup37封閉多肽 人ADAM金屬肽含血小板反應(yīng)蛋白1基元4(ADAMTS4)elisa試劑盒

β3腎上腺能受體抗體 緊密連接蛋白1封閉多肽 人類似RIKENcDNA4933429F08基因試劑盒elisa

11號染色體開放閱讀框16抗體 微管蛋白封閉多肽 人孕酮和adipoQ受體家族成員Ⅶ(PAQR7)檢測試劑盒elisa

膜粘連蛋白13抗體 封閉多肽 人集蛋白亞家族成員11(COLEC11)ELISA試劑盒

10號染色體開放閱讀框27抗體 RNA結(jié)合蛋白34封閉多肽 人絲氨抑制因子肽抑制因子進化枝3G(Serpina3g)試劑盒ELISA

英文名稱: MUC2 氯離子通道調(diào)節(jié)蛋白1A封閉多肽 人類似RIKENcDNAA630077B13基因ELISA檢測試劑盒

金屬離子轉(zhuǎn)運體1抗體 真核翻譯起始因子4G封閉多肽 人類似RIKENcDNA3110050K21基因elisa試劑盒

雙皮質(zhì)抗體 磷化Ephrin B封閉多肽 人類似RIKENcDNA2610307008基因試劑盒elisa

自噬微管相關(guān)蛋白輕鏈β3抗體 磷化非受體酪氨激c-Abl封閉多肽 人類似RIKENcDNA2010109K09基因檢測試劑盒elisa

陽離子轉(zhuǎn)運蛋白2抗體 磷化磷脂酰肌醇激調(diào)節(jié)亞單位gamma封閉多肽 人ras同源物基因家族成員b(RHOB)ELISA試劑盒

細(xì)胞色C氧化蛋白6B2抗體 鋅指蛋白589封閉多肽 人假定蛋白LOC677340試劑盒ELISA

英文名稱: Cytokeratin 19 補體4結(jié)合蛋白封閉多肽 人假定蛋白LOC433328ELISA檢測試劑盒

CRB2蛋白抗體 ZNF792/鋅指蛋白792封閉多肽 人髓樣分化因子初次應(yīng)答基因88(MYD88)elisa試劑盒

/鈣調(diào)依賴蛋白激2b/2γ抗體 腱調(diào)蛋白/軟骨調(diào)節(jié)樣1蛋白封閉多肽 人干擾活化基因205(Ifi205)試劑盒elisa

妊娠特異性糖蛋白4抗體 活化半胱胺蛋白-3封閉多肽 人組織相容性2-K1-K區(qū)(H2-K1)檢測試劑盒elisa
人骨髓樹突狀細(xì)胞(成熟DC細(xì)胞)panc02小鼠胰腺癌細(xì)胞英文名稱:panc021×106DMEM+5%FBS+1%P/S(STR鼠源鑒定)報告

panc02+LUC小鼠胰腺癌細(xì)胞熒光標(biāo)記英文名稱:panc02+LUC1×106DMEM+5%FBS+1%P/S(panc02鼠源鑒定)報告

PT-67小鼠源基于MLV-10A1逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝細(xì)胞系英文名稱:PT-671×106DMEM+10%FBS+1%P/S(STR鼠源鑒定)報告

RAG小鼠腎腺癌細(xì)胞英文名稱:RAG1×106MEM+10%FBS+1%P/S (STR鼠源鑒定)報告

RAW 264.7小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞英文名稱:RAW 264.71×106DMEM+10%FBS+1%P/S  不能用消化細(xì)胞刮代替,易分化傳代時密度要大(STR鼠源鑒定)報告

RAW 264.7+GFP小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞+GFP英文名稱:RAW 264.7+GFP1×106DMEM+10%FBS+1%P/S  不能用消化細(xì)胞刮代替,易分化傳代時密度要大(提供RAW264.7鑒定)報告

Renca 小鼠腎癌細(xì)胞英文名稱:Renca 1×1061640+10%FBS+1%P/S(STR鼠源鑒定)報告


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