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大鼠肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-21 16:21:22瀏覽次數(shù):241

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來(lái)源 肝臟組織
大鼠肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:小鼠食管成纖維細(xì)胞原代細(xì)胞5×105小鼠胃黏膜上皮細(xì)胞原代細(xì)胞5×105小鼠胃平滑肌細(xì)胞原代細(xì)胞5×105小鼠胃成纖維細(xì)胞原代細(xì)胞5×105小鼠小腸黏膜上皮細(xì)胞原代細(xì)胞5×105

詳細(xì)介紹

1.png

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱(chēng)

規(guī)格

組織來(lái)源

大鼠肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

肝臟組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

分離自肝臟組織;肝臟是身體內(nèi)以代謝功能為主的一個(gè)器官,并在身體里面起著去氧化、儲(chǔ)存肝糖、分泌性蛋白質(zhì)的合成等作用;肝臟也制造消化系統(tǒng)中之膽汁。肝臟是機(jī)體內(nèi)臟里大的器官,位于機(jī)體中的腹部位置,在右側(cè)橫隔膜之下,位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方,胃的上方。肝臟是機(jī)體消化系統(tǒng)中大的消化腺,為一紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官,又是新陳代謝的重要器官。肝臟在機(jī)體位置和形態(tài)結(jié)構(gòu):肝臟位于右上腹,隱藏在右側(cè)膈下和肋骨深面,大部分肝為肋弓所復(fù)蓋,僅在腹上區(qū)、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁,肝上面則與膈及腹前壁相接。通過(guò)控制激素調(diào)控的分泌和吸收,在保持、調(diào)整和擴(kuò)大膽小管的結(jié)構(gòu)中發(fā)揮重要作用,肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞在先天性和獲得性免疫應(yīng)答方面起著積極作用。肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞約占肝細(xì)胞總數(shù)的5%,其在肝內(nèi)膽道系統(tǒng)內(nèi)形成復(fù)雜的網(wǎng)狀管形結(jié)構(gòu)。肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞具有復(fù)雜的生理代謝功能,參與肝臟的代謝、排泌、免疫等生理過(guò)程,在肝臟疾病的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中起一定的作用。研究表明,常見(jiàn)的肝內(nèi)膽管病變例如原發(fā)性硬化性膽管炎、膽管癌等疾病,都是以肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞為病變靶位,進(jìn)而引起肝內(nèi)膽管上皮損傷。因此,了解正常肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞的生物學(xué)特征和病變肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞的病理特征對(duì)研究肝內(nèi)膽管病變的發(fā)病機(jī)制、診斷和治療具有重要意義。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用膠原灌注消化法后,再用膠原-DNA聯(lián)合消化,接種至預(yù)先包被鼠尾膠原的培養(yǎng)瓶中,通過(guò)上皮細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)Cytokeratin-19免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  上皮細(xì)胞樣

傳代特性  可傳1-2代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,5%

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框198抗體 SUSD3蛋白封閉多肽 

細(xì)胞核受體ERBA相關(guān)基因2抗體 水解結(jié)構(gòu)域蛋白13封閉多肽 

人乳頭瘤病毒18型E4抗體 組蛋白去甲基化UTX封閉多肽 

環(huán)指蛋白19抗體 19號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框66封閉多肽 

Rho相關(guān)結(jié)構(gòu)域BTB蛋白質(zhì)1抗體 α-甲基?;忾]多肽  

英文名稱(chēng): NADPH 衣殼蛋白-ζ1封閉多肽 

Naked1蛋白抗體 上皮細(xì)胞特異性轉(zhuǎn)錄因子1封閉多肽 

抗表皮生長(zhǎng)因子抗體 LSM10相關(guān)蛋白封閉多肽 

葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78單克隆抗體 NUDT12蛋白封閉多肽 

TIP30蛋白抗體 中胚層配對(duì)同源蛋白2封閉多肽 

菱形結(jié)合域同源蛋白RHBDF1抗體 周期E1封閉多肽 

B細(xì)胞遷移基因1抗體 川楝牛血清白蛋白偶聯(lián)物 

胞吐分泌蛋白Sec8抗體 磷化叉頭蛋白4封閉多肽 

溶質(zhì)載體家族22成員14抗體 DYX1C1蛋白封閉多肽 

內(nèi)質(zhì)網(wǎng)蛋白ERp72抗體 磷化蛋白激B封閉多肽 

組蛋白乙酰轉(zhuǎn)移KAT7抗體 豬圓環(huán)病毒Ⅱ型衣殼蛋白封閉多肽 

骨巢蛋白抗體 PSP封閉多肽 

HER4抗體 zcrb1蛋白封閉多肽 
大鼠肝內(nèi)膽管上皮細(xì)胞小鼠表皮角化細(xì)胞培養(yǎng)基100mL小鼠表皮角化細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持小鼠表皮角化細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含小鼠表皮角化細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無(wú)需添加任何成分,可直接用于小鼠表皮角化細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

BE(2)-M17細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基125mL×4BE(2)-M17細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持BE(2)-M17細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含BE(2)-M17細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無(wú)需添加任何成分,可直接用于BE(2)-M17細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

人牙齦上皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL人牙齦上皮細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持人牙齦上皮細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含人牙齦上皮細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無(wú)需添加任何成分,可直接用于人牙齦上皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

人胃黏膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL人胃黏膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持人胃黏膜上皮細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含人胃黏膜上皮細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無(wú)需添加任何成分,可直接用于人胃黏膜上皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

SK-N-AS細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基125mL×4SK-N-AS細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持SK-N-AS細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含SK-N-AS細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無(wú)需添加任何成分,可直接用于SK-N-AS細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

TNM-FH昆蟲(chóng)細(xì)胞培養(yǎng)基125mL×4-

小鼠輸尿管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL小鼠輸尿管上皮細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持小鼠輸尿管上皮細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含小鼠輸尿管上皮細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無(wú)需添加任何成分,可直接用于小鼠輸尿管上皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)。


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